Title: Comparação de técnicas de Centrífugo-flutuação (FAUST) e Flutuação espontânea (WILLIS-MOLLAY) para dioagnóstico de helmintoses intestinais em cães
Author: Denise
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COMPARAÇÃO DE TÉCNICAS DE CENTRÍFUGO-FLUTUAÇÃO (FAUST) E FLUTUAÇÃO ESPONTÂNEA (WILLIS) PARA DIAGNÓSTICO DE PARASITOSES INTESTINAIS EM CÃES

DIAS; Denise Gamio^1; RECUERO, Ana Lúcia Coelho^1; RECUERO, Rebeca da Cunha^2; JORGE, Sérgio^2; PIZZARO, Anna Beatriz^3; PILTCHER, Maira Guedes^3;BROD, Claudiomar Soares^3

^1Pós Graduação em Parasitologia UFPel; ^2Acadêmicos de Veterinária UFPel; ^3 Faculdade de Veterinária UFPel 
denisegamiodias@hotmail.com

Na prática laboratorial é rotina utilizar-se mais de um método para detecção de ovos, larvas de helmintos, cistos e oocistos de protozoários, principalmente para aumentar o número de casos positivos. 
	O trabalho pretende comparar a sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivos e negativos, prevalências verdadeira e aparente, acurácia e coeficiente de correlação intracelular (Kappa) entre os métodos parasitológicos de FAUST et al. (1939) e Willis (1921), citados em Hoffmann (1987). O primeiro método baseia-se no princípio de flutuação espontânea em solução de cloreto de sódio (densidade 1,20) e o segundo consiste na centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco (densidade 1,18).
	O método de Willis (1921) tem por objetivo identificar ovos de nematódeos e oocistos de protozoários. Já o método de FAUST e cols. (1939) objetiva pesquisar ovos ou larvas de helmintos e cistos de protozoários.^8  Com o intuito de comparação das técnicas foram processadas 60 amostras de fezes de cães errantes da localidade do Sangão do Município do Capão do Leão-RS, entre os meses de junho e julho de 2005.
As amostras foram coletadas no meio ambiente, acondicionadas em potes plásticos, devidamente identificados, refrigeradas em isopor com gelox e transportadas ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas. Cada amostra foi processada pelas técnicas de FAUST e Willis, sendo preparadas lâminas pareadas para leitura.
Para análise estatística utilizou-se o Programa Epi-Info 6,04 ^5, sendo encontrado os resultados apresentados na Tabela 1.
Das 60 amostras coletadas, 54 (90%) apresentaram ovos e oocistos de parasitos intestinais, nas quais, considerando o somatório dos métodos, encontrou-se 86,7% de ancilostomídeos, 15% de Trichuris spp., 8,3% de Strongyloides spp., 8,3% de Isospora spp., 5% de Toxocara spp. e 1,7% de Sarcocystis spp..

Tabela 1 - Prevalência de parasitoses intestinais detectada por métodos de exame de fezes em 60 amostras de cães do Sangão do Município do Capão do Leão, RS.

Parasitos | Prevalência
| Método de Faust | Método de Willis | Faust + Willis
| Nº | % | Nº | % | Nº | %
ancilostomídeo | 15 | 25,0 | 51 | 85,0 | 52 | 86,7
Trichuris spp. | 1 | 1,7 | 8 | 13,3 | 9 | 15,0
Strongyloides spp. | 5 | 8,3 | 1 | 1,7 | 5 | 8,3
Isospora spp. | 0 | 0 | 5 | 8,3 | 5 | 8,3
Toxocara spp. | 2 | 3,3 | 2 | 3,3 | 3 | 5,0
Sarcocystis spp. | 1 | 1,7 | 0 | 0 | 1 | 1,7

Das amostras positivas, 30 (55,56%) apresentaram-se como monoparasitismo, sendo identificados ancilostomídeos, Trichuris spp. e Toxocara spp., e como poliparasitismo encontrou-se 24 (44,44%) amostras, com várias associações que podem ser observadas na Tabela 2.

Tabela 2. Freqüência de mono e poliparasitismo intestinais detectada por métodos de exame de fezes em 60 amostras de cães do Sangão do Município do Capão do Leão, RS.

Monoparasitismo ou associações encontradas | Nº de Positivos
Método de FAUST | Método de WILLIS | Faust | Willis | Faust + Willis
ancilostomídeo. | ancilostomídeo. | 1 | 28 | 5
Trichuris spp. | Trichuris spp. | 0 | 1 | 0
Toxocara spp. | Toxocara spp. | 0 | 0 | 1
| Toxocara spp. + ancilostomídeo | 0 | 1 | 0
ancilostomídeo + Strongyloides spp. | ancilostomídeo. + Isospora spp. | 0 | 0 | 1
ancilostomídeo + Strongyloides spp. | ancilostomídeo. + Trichuris spp. | 0 | 0 | 1
ancilostomídeo + Strongyloides spp. + Sarcocystis spp.. | ancilostomídeo | 0 | 0 | 1
| ancilostomídeo + Trichuris spp. | 0 | 3 | 0
ancilostomídeo | ancilostomídeo + Trichuris spp. | 0 | 0 | 2
ancilostomídeo + Trichuris spp. | ancilostomídeo | 0 | 0 | 1
| ancilostomídeo + Trichuris spp. + Isospora spp. | 0 | 1 | 0
ancilostomídeo + Strongyloides spp. | ancilostomídeo. | 0 | 0 | 1
Toxocara spp. | ancilostomídeo. | 0 | 0 | 1
| ancilostomídeo + Isospora spp. | 0 | 2 | 0
Strongyloides spp. | ancilostomídeo | 0 | 0 | 1
ancilostomídeo. | ancilostomídeo + Isospora spp. | 0 | 0 | 1
ancilostomídeo. + Trichuris spp. | | 1 | 0 | 0
Total | 2 | 36 | 16

Na tabela 3 pode se observar os valores de sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivas e negativas, prevalências verdadeira e aparente, acurácia e kappa para os parasitos encontrados. 

Considerando-se Willis como padrão ouro, observou-se que para o diagnóstico de ancilostomídeos o método de Faust apresentou uma sensibilidade muito baixa (27,45%), apesar de apresentar poucos falsos positivos, com um VP^+ de 93,3%, apresentou muitos falsos negativos, o que fez com que o VP^- fosse de somente 17,7%. A acurácia entre os dois métodos foi muito baixa (36,6%) e também o coeficiente de correlação Kappa (0,062). Referente ao método de Willis, encontramos uma prevalência de 85%, sendo o parasito mais prevalente, o que concorda com outros autores  que encontraram 71,3% e 40% de ancilostomídeo, respectivamente ^10, ^2. Em relação ao método de FAUST, analisando fezes coletadas em praças públicas de Pelotas, encontraram 22% de prevalência de ancilostomídeos ^6, o que se assemelha aos 25% detectados neste trabalho.
Quanto a Strongyloides spp., é notória a superioridade do método de Faust, uma vez que Willis detectou apenas 20% do total de positivos, pressupondo uma prevalência de 1,67% na amostra, quando na realidade ela foi de 8,33%. A sensibilidade e o VP^- foram de 100% em relação ao Willis. O valor de Kappa (0,314) é considerado regular, indicando a necessidade de testes em paralelo para a identificação do parasito, apesar de ter-se identificado um número pequeno destes em relação ao total. Outros estudos realizados detectaram pelo método de Willis 3% de Strongyloides spp.. ^10
Para Toxocara spp. as duas técnicas mostraram a mesma sensibilidade (50%), com um valor de Kappa moderado (0,483) e uma acurácia de 96,7%, porém, do mesmo modo que para Strongyloides spp., este dado deve ser analisado com cautela, já que o número de positivos foi pequeno na amostra analisada, identificando-se uma prevalência de 3,3% com cada um dos métodos, acusando uma prevalência geral de 5%. Levantamento realizado  pela técnica de Willis, encontrou 1% de Toxocara spp. ^2, discordando de outros autores, que encontraram prevalências maiores ^1, ^3, ^9, sendo detectado em outro trabalho  9,3% ^10, mais próximo dos resultados deste trabalho. Já pela técnica de FAUST, detectaram 1,76%.^6 A baixa prevalência encontrada parece relacionar-se com um pequeno número de amostras de animais jovens, já que as fezes foram coletadas no meio ambiente e, geralmente, os cães jovens defecam em seu ambiente domiciliar.
Para Sarcocystis spp., como somente encontrou-se uma amostra positiva (Prevalência de 1,67%) e esta somente identificada pelo método de Faust, torna-se impossível uma comparação, o que é confirmado pelo coeficiente de correlação Kappa com valor de zero.
Quanto a Trichuris spp., ainda que a sensibilidade e o VP^- do Faust sejam zero, vale a pena conjugar as duas técnicas no diagnóstico, uma vez que Willis deixou de detectar um positivo, encontrando uma prevalência de 13,33%, quando na realidade ela seria de 15%. Trabalhos realizados pela técnica de Willis, detectaram 32,5% de Trichuris spp. na área central do Balneário do Cassino, RS; ^10 e, pela técnica de FAUST, 15,84%.^6
Para Isospora spp., poucas amostras foram positivas, prevalência de 8,33%, entretanto, todas detectadas somente por Willis, não justificando-se, portanto, a utilização do método de Faust para a identificação deste parasito, apesar de sua alta especificidade e VP^-, ou seja, não apresenta falsos positivos.
Conclui-se que FAUST foi inferior a Willis para detecção de ancilostiomídeo, Trichuris spp. e Isospora spp., e Willis inferior a FAUST para detecção de Sarcocystis spp., portanto não é aconselhável usar apenas um método de concentração em uma rotina laboratorial, a fim de aumentar o número de casos positivos.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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