BIOCONTROLE E TRANSMISSÃO DE Gerlachia spp. E Bipolaris spp. DE SEMENTES PARA PLÂNTULAS DE ARROZ
LUDWIG, Juliane1; MOURA, Andréa Bittencourt2; SCHAFER, Jaqueline Tavares2; CORRÊA, Bianca Obes3 
Universidade Federal de Pelotas – FAEM.  C.P.354 CEP: 96010-300
1Doutoranda Bolsista CNPq; 2Departamento de Fitossanidade
3 Mestranda Bolsista CAPES juludwig@yahoo.com.br

1- INTRODUÇÃO

A transmissão de patógenos por sementes é um mecanismo eficiente pelo qual os fitopatógenos são introduzidos em novas áreas de cultivo, disseminados a longas distâncias e distribuídos através da população de plantas como focos de inóculo primário [6]. Os parasitas necrotróficos, servem-se da semente como veículo de disseminação, abrigo e meio de sobrevivência. 
No Brasil, citam-se Pyricularia oryzae e Bipolaris oryzae como os principais patógenos associados às sementes, seguidos de Gerlachia oryzae, Cercospora oryzae, Phoma spp., Alternaria padwickii, Fusarium spp., Nigropsora oryzae, Tilletia barclayana [1]. 
Os danos causados por B. oryzae, agente etiológico da mancha-parda, e G. oryzae, agente etiológico da escaldadura, são devido à diminuição da germinação, redução na qualidade dos grãos, além da redução no número de grãos por panícula e o peso dos grãos [2]. Estudos realizados sobre a eficiência de transmissão semente-plântula de B. oryzae chegam a 15,1% de passagem do fungo de sementes para órgãos foliares ou radiculares de plântulas de arroz [5].
Para o controle dessas doenças é necessário, na maioria dos casos, a aplicação de algum tipo de fungicida protetor ou sistêmico, com o intuito de reduzir o inóculo presente nas sementes, no entanto, esta prática implica no risco de contaminação ambiental, bem como de quem aplica o produto. Assim, a busca por agentes de bioproteção de sementes, parece ser uma alternativa viável, uma vez que não há risco do surgimento de populações resistentes por parte do patógeno e nem a contaminação ambiental ou humana.
O objetivo deste trabalho constituiu em avaliar a transmissão de B. oryzae e G. oryzae em lotes de sementes naturalmente infestadas e microbiolizadas com isolados bacterianos biocontroladores destes patógenos.

2- MATERIAL E MÉTODOS

Sementes de arroz dos lotes 375 e 376, das cultivares Formosa e Chumbinho, respectivamente, com alta incidência de Gerlachia spp. foram imersas durante 30 minutos sob agitação e temperatura de 10°C, em suspensão salina de cada um dos isolados bacterianos: DFs185 (Pseudomonas synxatha), DFs223 (P. fluorescens), DFs306 (ainda não identificado), DFs416 (Bacillus sp.) e DFs418 (Bacillus sp.) selecionados para o biocontrole de doenças do arroz [3], com 24 horas de crescimento em meio 523 de Kado e Heskett (1970), cuja concentração foi ajustada para OD540=0,5. As testemunhas foram imersas somente em solução salina (NaCl 0,85%).
As sementes microbiolizadas foram plantadas em recipientes com capacidade para 50 mL, contendo vermiculita esterilizada, sendo depositada uma semente por recipiente. O ensaio foi conduzido no interior de caixas plásticas transparentes, mantendo-se câmara úmida, onde foram colocados 25 recipientes, e incubados sob temperatura de 23±2ºC, constituindo cada caixa, uma parcela experimental. O delineamento estatístico utilizado foi de blocos completamente casualizados, com 4 repetições de cada tratamento. 
A avaliação das plântulas ocorreu 21 dias após a semeadura. Cada planta recebeu uma nota quanto à intensidade dos sintomas apresentados onde: 0= plântula sem sintomas, 1=plântula levemente necrosada; 2=plântula medianamente necrosada, 3=plântula altamente necrosada e, 4=semente não germinada. Posteriormente, das sementes germinadas, destacou-se o sistema radicular da parte aérea, na altura do colo, e procedeu-se a medição de ambos. Para cálculo das respostas de cada tratamento, o valor da testemunha, em cada uma das variáveis, foi transformado para 100%.
Adicionalmente, as sementes que não germinaram, foram retiradas dos recipientes e desinfestadas em hipoclorito de sódio à 1%, durante 1 minuto. Após, foram lavadas em água corrente e plaqueadas em caixas tipo gerbox, para a verificação da presença ou não de um dos dois patógenos.

3- RESULTADOS E DISCUSSÃO

Em todas as variáveis foi observado o comportamento superior nas plantas cujas sementes foram microbiolizadas com os isolados biocontroladores. No lote 375, dados referentes à germinação, destacaram o isolado DFs306, que incrementou esta em 23% em relação à testemunha. Em contrapartida, quando se avaliou o lote 376, este teve sua germinação incrementada em 18% quando as sementes foram bacterizadas com o isolado DFs416. 
Quando se avaliou o comprimento de raízes, observou-se que o isolado DFs418 aumentou o comprimento das raízes em 26% no lote 375, comportamento este mantido no lote 376, onde este mesmo isolado incrementou em 33% as mesmas. Este aumento poderá vir a contribuir quando as plantas tratadas com este isolado forem levadas à campo, uma vez que poderão explorar um volume maior de solo, propiciando melhores condições de nutrição a estas [10]. Já para comprimento de folhas, foi observado que o isolado DFs306, no lote 376, propiciou os maiores incrementos em relação ao tamanho das folhas, aumentando em 32% o comprimento destas em relação à testemunha (Figura 1A-1B). 
Na avaliação da severidade, notou-se que as plantas microbiolizadas com os agentes de biocontrole mostraram redução dos sintomas na parte aérea, destacando-se a eficiência do isolado DFs306, capaz de reduzir a severidade em ambas cultivares, em até 60% em relação à testemunha. 
Na avaliação da incidência dos patógenos nas sementes não germinadas, no que se refere ao controle de Bipolaris spp., observou-se que o isolado DFs306 reduziu em 22 e 26% a incidência deste patógeno, nos lotes 375 e 376, respectivamente. Em contrapartida, quando se considerou a porcentagem de controle de Gerlachia spp, o isolado DFs223 merece destaque, uma vez que foi capaz de reduzir a incidência deste patógeno em 30 e 24% nos lotes 375 e 376, respectivamente (Figura 2A -2B). 

B

A

Figura 1- Germinação (G), comprimento de raízes (Rz) (cm) e comprimento de folhas (Ae) (cm) de plantas oriundas de sementes do lote 375 (A) e 376 (B) infestados naturalmente por Bipolaris spp. e Gerlachia spp. e microbiolizados com isolados de bactérias biocontroladoras

B

A

Figura 2- Severidade de sintomas em plântulas (Sv) e número de sementes infestadas/infectadas por Bipolaris spp. (Bi) e Gerlachia spp. (Ge) nos lotes de sementes 375 (A) e 376 (B) naturalmente infestados por estes patógenos e microbiolizados com isolados de bactérias biocontroladoras

Estes resultados podem ser comparados com trabalhos realizados anteriormente, onde foi avaliada a porcentagem de controle destes patógenos pelos mesmos isolados em ensaios conduzidos em caixas do tipo gerbox, sendo observado um comportamento diferenciado em relação à eficiência de controle[4], possivelmente explicada pela especificidade de colonização em relação à cultivar por estes isolados [9], produção de antibióticos por alguns destes isolados [7] ou outro mecanismo de ação, o qual ainda não foi elucidado. 

4- CONCLUSÃO

Com os resultados pôde-se concluir, que todos os isolados utilizados apresentam algum potencial em promover o biocontrole e reduzir a transmissibilidade de patógenos presentes nas sementes para a parte aérea, bem como incrementar o comprimento de raízes e folhas.

5- BIBLIOGRAFIA

[1]AMARAL, H.M.; FURLAN, S.H.; MENTEM, J.OM. Localização de Drechslera oryzae, Rhinchosporium oryzae e Trichoconiella padwickii em sementes de arroz (Oryza sativa L.). CONGRESSO BRASILEIRO DE SEMENTES, 4, 1985, Brasília. Resumos... Brasília, 1985. p.118.

[2]LEE, F.N. Grain disease-grain discoloration. In: WEBSTER, R.K.; GRUNNEL, P.S. (ed.). Compendium of rice diseases. Saint Paul: APS Press, 1992. 62p.

[3]LUDWIG, J. Biocontrole de doenças no arroz irrigado (Oryza sativa L.) pela microbiolização de sementes. Pelotas, UFPel, 2005. 36f. Dissertação de Mestrado.

[4]LUDWIG, J.; MOURA, A.B.; SCHAFER, J.T. Redução da incidência de Gerlachia spp. e Bipolaris spp. em lotes de sementes infestados e microbiolizados com isolados biocontroladores. CONGRESSO BRASILEIRO DE ARROZ IRRIGADO, 4, 2005, Santa Maria. Anais...Santa Maria, 2005. p.547-549.

[5]MALAVOLTA, V.M.A.; PARISI, J.J.D.; TAKADA, H.M.; MARTINS, M.C. Efeito de diferentes níveis de infecção por Bipolaris oryzae em sementes de arroz sobre aspectos fisiológicos, transmissão do patógenos às plântulas e produtividade. Fitopatologia Brasileira, v.27 (Suplemento), p. 130. 2002 (Resumo).

[6]TANAKA, M.A.S.; MACHADO, J. da C. Patologia de sementes. Informe Agropecuário, v.11, p.40-46. 1985.

[7]SILVEIRA, A.O. MOURA, A.B.; SILVA. E.G.; RIBEIRO, A.S. Investigações sobre aptidões de RBPCs biocontroladoras de patógenos de arroz. REUNIÃO DE CONTROLE BIOLÓGICO DE FITOPATÓGENOS, 7, 2001, Bento Gonçalves. Anais...Bento Gonçalves, 2001.

[8]ZANATTA, Z.G.C.N. Potencial de bactérias para biocontrole de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. Pelotas, UFPel, 2004. 67f. Tese de Doutorado.

[9] ZANATTA, Z. C.N.; SCHAFER, J.T.; MOURA, A.B.; LUDWIG, J.; SANTOS, A.S. Colonização do sistema radicular de sementes de arroz por rizobactérias biocontroladoras e promotoras de crescimento. Fitopatologia Brasileira, v.29 (Suplemento), p.175, 2004 (Resumo).