Title: A queima das bainhas, causada pelo fungo Rhizoctonia solani, encontra-se disseminada em praticamente todas as áreas do mundo o
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POTENCIAL DE ISOLADOS BACTERIANOS, NO BIOCONTROLE DE RHIZOCTONIA SOLANI, EM CASA-DE-VEGETAÇÃO, EM DUAS ÉPOCAS DE PLANTIO

Ludwig, J.^1; Moura, A. B.^1; Santos, A. S.^1
^1Laboratório de Bacteriologia – DFS – FAEM/UFPel
Campus Universitário – Caixa Postal 354 - CEP: 96010-900 Pelotas-RS
juludwig@yahoo.com.br

1.INTRODUÇÃO

A queima das bainhas, causada pelo fungo Rhizoctonia solani, encontra-se disseminada em praticamente todas as áreas do mundo onde se cultiva o arroz, principalmente em condições irrigadas. Escleródios do fungo sobrevivem no solo e são disseminados através da água de irrigação. Sua importância vem aumentando devido ao uso de fertilizantes e de variedades altamente produtivas; isto implica em maior perfilhamento da planta e, conseqüentemente, em aumento de umidade na cultura, criando condições favoráveis ao patógeno [5].
As recentes preocupações com o meio ambiente e resistência do patógeno aos fungicidas têm estimulado as tentativas em reduzir a quantidade de defensivos, além da busca de métodos alternativos de controle da doença como a solarização, a adoção de certas práticas culturais e a aplicação de microorganismos antagonistas, que são agentes biológicos capazes de reduzir a densidade populacional do patógeno ou a manifestação da doença através de um ou mais mecanismos de ação. Vários microorganismos antagonistas estão sendo estudados no biocontrole de R. solani, entre eles, alguns isolados de Bacillus spp. e vários outros de Trichoderma spp. [8]. Isolados de Pseudomonas fluorescens também já foram testados no controle dessa doença [7]. 
Assim, o objetivo desse trabalho, foi o de avaliar o potencial de biocontrole de algumas bactérias pré-selecionadas para o biocontrole de Bipolaris oryzae [6] sobre a severidade da doença (intensidade de sintomas e porcentagem de área atacada) em casa-de-vegetação, em dois ensaios conduzidos em épocas distintas.

2.MATERIAL E MÉTODOS

Foram utilizadas os isolados DFs185 (Pseudomonas sp.), DFs223 (P. amygdali), DFs306 (não identificado), DFs416 (Bacillus cereus), DFs418 (B. subtis), DFs419 (B. cereus), DFs422 (B. subtilis) e DFs471 (Xanthomonas maltophilia). Sementes da cultivar El Passo foram microbiolizadas com a suspensão de cada uma dessas bactérias, individualmente, utilizando-se para isso uma solução salina (NaCl) à 0,85% juntamente com a bactéria com 24hs de crescimento, e posteriormente agitadas por trinta minutos a 10ºC. Utilizaram-se duas testemunhas: uma tratada somente com solução salina e a outra com o fungicida Carboxin-Thiran [3]. Dez sementes foram depositadas em cada um dos vasos contendo 1 quilo de uma mistura de solo não estéril e areia na proporção de 3:1. O tipo de delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado.
Quando as plantas atingiram 10 dias, foi realizado o desbaste, deixando-se quatro plantas por vaso, juntamente com a primeira inoculação do fungo, previamente crescido em arroz com casca + casca (autoclavado) na proporção de 3:1 [2] e o procedimento adotado foi a distribuição de uma camada uniforme dos grãos infestados sobre a superfície do solo. Essa inoculação foi realizada de dez em dez dias, totalizando três inoculações. A avaliação ocorreu sete dias após a última inoculação, avaliando-se a severidade da doença, numa escala que vai de 1 a 9, de acordo com a intensidade dos sintomas e porcentagem de área atacada [4], cujas maiores notas são atribuídas as plantas mais severamente atacadas pela doença.
Foram realizados dois plantios, o primeiro cuja data de semeio foi 19 de janeiro de 2004 apresentou temperatura média diária de 23,5ºC e o segundo dia 14 de abril de 2004 em cuja temperatura média diária se manteve em 16,4ºC.

3.RESULTADOS E DISCUSSÃO

Destacou-se no primeiro ensaio o isolado DFs306, que propiciou 38% de controle, seguido pelo isolado DFs185 (15%), sendo que ambos diferiram estatisticamente da testemunha + fungicida e do isolado DFs418 (Tabela 1). 

Tabela 1.  Notas segundo a severidade de sintomas e porcentagem de área atacada, peso seco da parte aérea (PSA) (g) e peso seco de raízes (PSR) (g) de plantas oriundas de sementes microbiolizadas com diferentes bactérias, com plantio realizado em 19/01/04.

Tratamento | Notas | PSA | PSR
DFs185 | 5,5ab | 0,957a | 2,487a
DFs223 | 6,0ab | 0,810ab | 2,024a
DFs306 | 4,0b | 0,653abc | 1,591ab
DFs416 | 6,0ab | 0,458abc | 1,226ab
DFs418 | 9,0a | 0,156bc | 0,315b
DFs419 | 7,0ab | 0,639abc | 1,785ab
DFs422 | 7,5ab | 0,450abc | 0,911ab
DFs471 | 8,0ab | 0,144bc | 0,411b
T | 6,5ab | 0,389bc | 0,988ab
T+F | 9,0a | 0,02,c | 0,679b

         Valores seguidos por mesma letra na coluna não diferem estatisticamente, pelo teste de Tuckey, ao nível de 5% de probabilidade             T=testemunha tratada somente com salina; T+F= testemunha tratada com salina mais o  fungicida,

  

 Relacionado ao peso seco da parte aérea, observou-se, neste ensaio, que o isolado DFs185 mostrou-se superior à testemunha com fungicida e aos isolados DFs418 e DFs471, porém não diferiu dos demais tratamentos. Quanto ao peso seco de raízes, destacaram-se neste ensaio, os isolados DFs185 e DFs223, que incrementaram em 252% e 205% o peso em relação à testemunha, mostrando-se superiores aos demais tratamentos, porém diferindo estatisticamente apenas da testemunha + fungicida, e dos isolados DFs418 e DFs471. 
No segundo ensaio, observou-se um bom nível de controle da doença proporcionado pelo isolado DFs185 (79%) e DFs223 (43%), seguido pelo isolado DFs306 (31%), porém nenhum dos tratamentos diferiu estatisticamente da testemunha. Tomando-se como base o peso seco da parte aérea, observou-se diferença entre o isolado DFs185 e os demais, sendo que este incrementou em 122% o peso, mas, diferiu estatisticamente apenas do isolado DFs422. Já no peso seco de raízes, também ficou evidenciada uma diferença em relação à testemunha, porém em se tratando de outro isolado, o DFs418, que incrementou, também, em 122% o peso, entretanto, não houve diferença estatística entre nenhum dos tratamentos.

Tabela 2.  Notas segundo a severidade de sintomas e porcentagem de área atacada, peso seco da parte aérea (PSA) (g) e peso seco de raízes (PSR) (g) de plantas oriundas de sementes microbiolizadas com diferentes bactérias, com plantio realizado em 14/04/04.

Tratamento | Notas | PSA | PSR
DFs185 | 0,75a | 0,236a | 0,442a
DFs223 | 2,0a | 0,198ab | 0,386a
DFs306 | 2,4a | 0,186ab | 0,534a
DFs416 | 3,25a | 0,184ab | 0,507a
DFs418 | 5,0a | 0,195ab | 0,595a
DFs419 | 2,75a | 0,219ab | 0,459a
DFs422 | 5,5a | 0,166b | 0,419a
DFs471 | 5,0a | 0,223ab | 0,391a
T | 3,5a | 0,194ab | 0,491a
S+F | 4,0a | 0,202ab | 0,452a

      Valores seguidos por mesma letra  na colunaa não diferem estatisticamente, pelo teste de Tuckey, ao nível de 5% de probabilidade          T=testemunha tratada somente com salina; T+F= testemunha tratada com salina mais o  fungicida,  

Nesses dois ensaios nota-se uma tendência dos isolados DFs185, DFs223 e DFs306 manterem-se superiores aos demais tratamentos, em todos os parâmetros avaliados. No entanto, devido às condições de temperatura mais baixas durante o segundo ensaio, a severidade de sintomas e porcentagem da área atacada ficaram sensivelmente reduzidos em relação ao primeiro ensaio, assim como os pesos secos de aéreo e de raiz, apesar da porcentagem de controle ter sido consideravelmente superior neste.
Esses resultados podem ser comparados com os obtidos por outros autores. Rabindran e Vidhyasekaran [7] verificaram a redução da queima das bainhas, tanto a campo quanto em casa-de-vegetação, de até 55% usando um produto formulado com Pseudomonas fluorescens e turfa. Chatergeee et al [1] usando o mesmo antagonista, obtiveram redução na incidência da doença a campo, de até 84,5%. Porém, vale ressaltar, que os isolados usados nesse trabalho, foram selecionados nas condições locais de clima, e trabalhos posteriores levados até a produção, indicarão os isolados com maior efeito biocontrolador sobre a doença até o final do ciclo da cultura.

4.CONCLUSÃO

Os isolados DFs185, DFs223 e DFs306, mostraram possuir alto potencial de biocontrole de Rhizoctonia solani.

4. BIBLIOGRAFIA

[1] CHATTERJEE, A.; VALASUMBRAMANIAN, R.; MA, W.-L.; VACHHANI, A.K.; GNANAMANIACKAM, S.; CHATTERJEE, A.K. Isolation of ant mutants of Pseudomonas fluorescens strain Pf7-14 altered in antibiotic production, cloning of ant^+ DNA, and evaluation of the role of antibiotic production in the control of blast and sheath blight of rice. Biological Control, v.7, p.185-195, 1996.

[2] DODE, L.B. Avaliação da resistência de arroz a queima das bainhas (Rhizoctonia solani Kuhn) através de diferentes métodos. Pelotas, 1993. 97f. Dissertação (Mestrado em Agronomia-Área de Concentração em Fitomelhoramento), Universidade Federal de Pelotas, 1993.

[3] EMBRAPA Clima Temperado; IRGA; EPAGRI. Arroz irrigado: recomendações técnicas da pesquisa para o sul do Brasil. Pelotas: EMBRAPA Clima Temperado, 1999. 124p.

[4] INTERNACIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Sistema de Evaluación Estándar para Arroz. Los Baños, 1975. 64p.

[5] KIMATI, H.; AMORIM, L.; BERGAMIM FILHO, A.; CAMARGO, L.E.A.; REZENDE, J.A.M. Doenças do arroz. In: Manual de Fitopatologia: Doenças das plantas cultivadas. 3.ed. São Paulo: Editora CERES, 1997. v.2,p. 85-104.

[6] MOURA, A.B., SILVA, E.G., RIBEIRO, A.S. Biocontrole de Gerlachia oryzae e Bipolaris oryzae pela microbiolização de sementes. Informativo ABRATES, v.11, p.148, 2001. 

[7] RABINDRAN, R. & VIDHYASEKARAN, P. Development of a formulation of Pseudomonas fluorescens PfALR2 for management of rice sheath blight. Crop Protection, v.15, n.8, p.715-721, 1996

[8] YU, G.Y.; SINCLAIR, J.B.; HARTMAN, G.L. & BERTAGNOLLI, B.L. Production of iturin A by Bacillus amyloliquefaciens suppressing Rhizoctonia solani. Soil Biology & Biochemestry, v.34, p.955-963, 2002.