DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-Trypanosoma cruzi EM DOADORES DE SANGUE DO HEMOCENTRO REGIONAL DE PELOTAS, RS, BRASIL 

ARAÚJO, Anelise Bergmann1,2; VIANNA, Élvia Elena Silveira1; LOGES, Luciana Ângelo2; BERNE, Maria Elisabeth Aires1

1Programa de Pós-graduação em Parasitologia – IB/DEMP/UFPel -Campus Universitário – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900. 2Hemocentro Regional de Pelotas – Av. Bento Gonçalves 4569 – CEP 96015-400
anelise_araujo@yahoo.com.br

1. INTRODUÇÃO

	A Doença de Chagas sempre manteve a transmissão de T. cruzi pelo vetor como a mais importante. No entanto, com as medidas voltadas ao controle destes, o aumento do êxodo rural e o uso abundante da hemoterapia, a transmissão deste protozoário por transfusão sangüínea tornou-se significativa para a propagação da doença, especialmente nos centros urbanos. Estando a forma tripomastigota do parasito no sangue periférico dos infectados, os hemocomponentes produzidos podem ser veículos de T. cruzi. (ANVISA/MS, 2005). 
	A real possibilidade de risco de transmissão por esta via é evidenciada pelos dados de infecção por T. cruzi entre doadores de sangue. Em diversos serviços de hemoterapia no Brasil, foi calculado um descarte de 1,09% de bolsas por reatividade na triagem para Doença de Chagas (Wendel et al., 2004). No Centro Regional de Hemoterapia de Ribeirão Preto (SP), 1,1% dos doadores foram positivos, entre 1996 e 2001 (Soussumi et al., 2004), semelhante ao valor encontrado em hospital do Rio de Janeiro (1,17%) por Silveira et al., 2003. Schmunis et al. (1998) observaram entre doadores, prevalência de 14,79% na Bolívia, 1,2% no Chile e Colômbia, 0,2% no Equador, 0,24% na Nicarágua, 4,5% no Paraguai e 1,32% na Venezuela.
A constante preocupação com a vigilância no processamento do sangue e de sua qualidade tem garantido melhoria no controle da Doença de Chagas por transmissão transfusional. Estudo retrospectivo do Hemocentro Regional de Sobral – CE aponta redução progressiva da prevalência de doadores infectados por T. cruzi (Almeida et al., 2005), o que também Figueiredo et al. (2005) e Sabino et al. (2003) observaram na Bahia e São Paulo, respectivamente. Entretanto, o estudo de De Paula et al. (2004) em São Paulo, demonstrou transmissão transfusional da Doença de Chagas em 0,84% dos pacientes politransfundidos. Portanto, o conhecimento de casos de infecção por transfusão sangüínea, assim como das possibilidades de que isto ocorra, caso não haja controle da qualidade do sangue usado na hemoterapia, justificam a investigação da transmissão da Doença de Chagas em bancos de sangue.  Assim, buscou-se verificar soropositividade para T. cruzi entre doadores de sangue do Hemocentro Regional de Pelotas (Hemopel), de modo a estimar o descarte de bolsas de sangue devido à Doença de Chagas e verificar fatores epidemiológicos relacionados com os doadores considerados infectados para esta doença. 
	
2. MATERIAL E MÉTODOS

A amostra foi constituída por todos os doadores de sangue do Hemopel de 
janeiro de 2004 a dezembro de 2005, sendo estes moradores de Pelotas e provenientes de municípios vizinhos, como Santa Vitória do Palmar, São Lourenço do Sul, Pinheiro Machado, Arroio Grande, Herval, Pedro Osório, Canguçu. A triagem sorológica de rotina para pesquisa de anticorpos anti-T. cruzi foi realizada no laboratório de sorologia do Hemopel através de teste de ELISA automatizado utilizando kit CHAGATEST® (Wiener lab, Argentina), disponibilizado no mercado com metodologia própria. As amostras que na triagem apresentaram valores superiores ao valor do cut off e com valores dentro dos 20% inferiores foram repetidas. Em caso de permanência da reatividade, foi solicitada coleta de nova amostra do doador, a qual foi analisada em duplicata pela mesma técnica (ELISA Chagatest), sendo o resultado liberado com o devido encaminhamento. Para classificar cada indivíduo como positivo ou negativo para Doença de Chagas, todas as amostras de sangue dos doadores que apresentaram reatividade na triagem foram processadas por outras quatro técnicas sorológicas: CHAGATEK® (biolab-Mérieux, Rio de Janeiro, Brasil) e ELISA ALKA, HA (CHAGATEST HAI® – screening A-V - Wiener lab, Argentina) e IFI (IMUNOCRUZI® - biolab-Mérieux, Rio de Janeiro, Brasil), todas com metodologia própria, para comparação dos resultados. Em amostras com resultados discordantes foi usado o TESA-Blot (Umezawa et al., 1996)  como método confirmatório. O levantamento de dados referente ao perfil dos candidatos à doação e dos doadores positivos para Doença de Chagas foi realizado em documentos de registro do Hemopel.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO
	
	No período determinado, foram realizadas 4.482 coletas de sangue em doadores do Hemopel. Destas, 0,96% (43/4.482) foram reativas para T. cruzi na triagem inicial. Neste período, a Doença de Chagas apareceu como segundo motivo para o descarte de bolsas de sangue por reatividade entre os agentes infecciosos pesquisados na triagem sorológica.	Todos os indivíduos cujos testes foram reativos (43), foram chamados para uma segunda coleta, comparecendo apenas 31. Destes, 21 pacientes foram considerados positivos para a infecção por T. cruzi, o que representa 0,47% (21/4482) das doações do Hemopel nos anos de 2004-2005. Estes resultados foram similares aos observados na Bahia por Figueiredo et al (2005), que obtiveram 0,35% de positividade e superiores aos de Valente et al. (2005) em Ribeirão Preto, SP, que observaram positividade de 0,14% para T. cruzi. Já em doadores de sangue de Nova Iguaçu (RJ) e de Londrina (PR), a prevalência de infecção por T. cruzi foi superior à do Hemopel, 1,2 e 1,3%, respectivamente (Silveira et al., 2003; Bonametti et al., 1998).
	Também foi verificado que a reatividade das amostras variou entre as diferentes técnicas utilizadas, sendo que das 43 amostras inicialmente reativas para ELISA Chagatest, apenas 20, 18 e 18 apresentaram reatividade no ELISA Chagatek, HAI e IFI, respectivamente. Estas diferenças nos resultados podem estar relacionadas a variáveis biológicas (amostras lipêmicas, ictéricas ou hemolisadas; reações cruzadas ou indivíduos em tratamento) ou técnicas. Também, a origem da cepa, forma evolutiva do parasito usada, qualidade e pureza do extrato podem interferir no resultado final  (Morel et al., 1980; Carneiro et al., 1991; Souto et al., 1996; Añez et al., 2004), além de problemas na execução e diferenças nos métodos.
	Na análise do perfil dos doadores de sangue do Hemopel, 66% dos doadores
 foram homens e 34% mulheres. Contudo, quando foi avaliado o número de indivíduos positivos para Doença de Chagas, as mulheres estiveram em maior número (12/21). 
	Os dados de escolaridade demonstram que a ocorrência da Doença de Chagas no Hemopel coincidiu com o baixo nível de escolaridade, tendo acometido dois analfabetos (9,5%), 14 com 1º grau incompleto (66,7%), dois com 1º grau completo (9,5%), um com 2º grau incompleto (4,8%) e dois com 2º grau completo (9,5%). A idade dos casos positivos variou entre 20 e 60 anos, com uma média de 47,2 anos. 
	De acordo com os relatórios do Hemopel referentes à triagem clínica, nenhuma informação fornecida pelos candidatos os relacionou à Doença de Chagas; entretanto, foram detectados casos positivos, demonstrando o desconhecimento dos portadores. Cabe ressaltar, que a existência de portadores desinformados dificulta o controle da doença e, fenômenos como o êxodo rural, também contribuem para que indivíduos assintomáticos tornem-se fontes disseminadoras de T.cruzi em centros urbanos, fazendo com que a via transfusional supere a vetorial, a qual se restringe às áreas onde se encontra o vetor.
	Quanto à origem dos doadores positivos, esta coincidiu com regiões consideradas endêmicas para a Doença de Chagas (Baruffa e Alcântara Filho, 1985), sendo a maioria (10/21) oriunda de Canguçu.
	A transmissão transfusional é um importante meio de expansão da doença de Chagas para áreas não endêmicas, sendo necessário traçar estratégias de controle, incluindo triagem de doadores consciente, triagem sorológica cuidadosa e utilização do tratamento hemoterápico apenas quando necessário.	
	 
4. CONCLUSÕES 

	A partir dos resultados obtidos pode-se concluir que há indivíduos positivos e que desconhecem estarem infectados por T. cruzi entre os doadores de sangue, sendo a segunda causa de descarte de  bolsas de sangue no Hemopel, no período de 2004-2005. Os casos positivos são mais freqüente em mulheres, indivíduos com menor escolaridade e na faixa etária média de 47, 2 anos. Há necessidade de aliar as técnicas de diagnóstico para um resultado conclusivo e seguro.
		
5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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