Title: As espécies de Pleurotus apresentam uma grande variedade de cores, que vão do branco ao azul escuro, marrom, amarelo, rosa, variando conforme a espécie, incidência de luz durante a frutificação, necessidades nutricionais e tempo de incubação, logo este
Author: User

CULTIVO DE Pleurotus spp. NO SUBSTRATO CAPIM-ELEFANTE (Pennisetum purpureum Schum) PASTEURIZADO

BERNARDI, Eduardo^1; MINOTTO, Elisandra^1; DONINI, Lorena Pastorini^1;       NASCIMENTO, José Soares do^1.

^1Laboratório Experimental de Micologia (LEMICO)-Departamento de Microbiologia e Parasitologia-IB-UFPEL - Campus Universitário s/n- CEP 96010-900 bernardieduardo@yahoo.com.br

1.	INTRODUÇÃO

As espécies de Pleurotus apresentam uma grande variedade de cores, que vão do branco ao azul escuro, marrom, amarelo, rosa, variando conforme a espécie, incidência de luz durante a frutificação, necessidades nutricionais e tempo de incubação. 
Os cogumelos são alimentos excelentes para dietas, pois nutrem e não engordam, principalmente devido às suas características nutricionais. Apresentam alto teor de proteína (27-48%), baixos valores de lipídeos (2-8%), além da presença de vitaminas (tiamina, riboflavina, niacina), minerais (cálcio, ferro, fósforo), beta-glucanos e compostos com atividade antioxidante (Manzi et al., 2001; Savón et al., 2002; Zhang et al., 2002). 
A produção de cogumelos apresenta vantagens em relação a outras culturas, pois exige menor área de cultivo, apresenta ciclo de vida curto e pode ser cultivado em diversos tipos de substratos, bem como utilização de resíduos agrícolas como meio para seu crescimento (Silva, 2004). 
No Brasil, a produção de Pleurotus spp. é baixa, em torno de 450 toneladas/ano, sendo toda produzida convencionalmente em composto à base de capim e bagaço de cana-de-açúcar. Por esta técnica, o substrato passa pela compostagem, pasteurização e acondicionamento, implicando no aumento do tempo de preparo, na mão-de-obra e no gasto de energia. O substrato umedecido durante 24 horas promove uma hidratação e a ação de microrganismos, consumindo as substâncias facilmente assimiláveis. Supõe-se que a pasteurização a 100ºC/30minutos seja suficiente para eliminar os contaminantes, e os demais não serão capazes de competir com o Pleurotus spp., que é lignolítico, pelo substrato pobre nutricionalmente. 
Este trabalho teve por objetivo avaliar a técnica de cultivo apenas com substrato capim-elefante (Pennisetum purpureum) pasteurizado para três espécies de Pleurotus.

2. MATERIAIS E MÉTODOS

Neste trabalho foram utilizadas as espécies P. ostreatus (linhagens BF24 e DF33), P. ostreatoroseus (linhagem POR01/06) e P. citrinopileatus (linhagem PAM01/06), sendo as duas primeiras linhagens oriundas do Módulo de Cogumelos FCA/UNESP/Botucatu, todas depositadas na micoteca do LEMICO/DEMP/IB/UFPel. 
As linhagens foram multiplicadas em meio de cultura à base de                      capim-elefante+dextrose+ágar (Donini et al., 2005) e incubadas a 28ºC por 7 dias, para obtenção de crescimento miceliano adequado. 
Para o preparo do inóculo (‘spawn’) foram utilizados grãos de sorgo (Sorghum bicolor L. Moench), previamente cozidos por 15 minutos, adicionados de 1% de gesso agrícola (v/v). Em seguida foram acondicionados em frascos de vidro de 8,6x14cm, os quais foram fechados com papel alumínio e filme plástico e autoclavados a 121ºC (1atm) por 45 minutos. 
Após o processo de esterilização os frascos foram inoculados com discos de 10mm de diâmetro de cultura de cada linhagem, previamente preparadas conforme descrito anteriormente, sendo em seguida incubados a 28ºC até a colonização dos grãos pelo fungo, constituindo-se, assim, o inóculo ou “spawn”. 
Como substrato foi utilizado o capim-elefante (Pennisetum purpureum Schum) o qual foi cortado ainda quando se encontrava em estado vegetativo, posteriormente foi fragmentado em tamanho de 2cm, e seco a temperatura ambiente. Para o preparo do material a ser utilizado no experimento, o substrato foi previamente umedecido por 24 horas, sendo posteriormente acondicionados em sacos de polipropileno de alta densidade e submetidos a tratamento térmico a 100ºC por 35 minutos com auxílio de autoclave vertical.
Após resfriamento do substrato, a temperatura de 30ºC, o mesmo foi inoculado com 3% de “spawn” de cada linhagem e acondicionado em sacos plásticos contendo 1kg de substrato úmido cada.
Os sacos foram acondicionados em prateleiras à temperatura ambiente (25-30ºC) durante a fase de colonização. Após a completa colonização os sacos foram transferidos para uma câmara de frutificação com temperaturas entre 20-28ºC e umidade relativa do ar de 75-90%. A coleta dos cogumelos iniciou aos 25 dias após a inoculação, extendendo-se durante 80 dias e compreendendo três fluxos de produção. 
Os cogumelos foram coletados manualmente e as variáveis avaliadas foram massa fresca e seca, produtividade em base úmida e eficiência biológica.
O experimento constou de um fatorial AxB (A=linhagem, B=fluxos de produção). O delineamento experimental constou de cinco repetições/tratamento, sendo cada saco a unidade experimental. Os resultados obtidos foram submetidos à análise da variação e ao teste de Tukey para comparação das médias, utilizando-se o programa estatístico SANEST (Zonta & Machado, 1984).

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

	Todos os tratamentos utilizados no experimento não apresentaram indícios de contaminações, demonstrando que a qualidade do substrato, bem como apenas a pasteurização deste foi suficiente para eliminar os possíveis contaminantes. A formação dos basidiomas ocorreram aos 25 dias de incubação, sendo os cogumelos coletados antes da total expansão do píleo.
Todas as linhagens utilizadas apresentaram maior frutificação no primeiro fluxo, com decréscimo de massa produzida no decorrer do cultivo, sendo que POR01/06 apresentou médias de massa fresca superiores as demais durante o primeiro e segundo fluxos, sendo que apenas no terceiro fluxo a linhagem BF24 foi superior. Para massa seca a linhagem BF24 foi superior as outras em relação a todos os fluxos de produção. A linhagem PAM01/06 apresentou as menores médias de massa tanto fresca como seca. Esta espécie, durante o período do terceiro fluxo apresentou contaminação e não desenvolveu corpos de frutificação, por isso os baixos resultados mostrados na Tabela 1. 

Tabela 1. Média de massa fresca e seca de basidiomas de diferentes linhagens de Pleurotus sp. cultivadas em capim-elefante (Pennisetum purpureum)

Variável | Linhagem | Fluxos | Total
| | 1 | 2 | 3 |
Massa fresca (g) | POR01/06 | 215,20a A | 85,00a B | 31,40b C | 331,60a
| BF24 | 133,20b A | 65,60c B | 56,80a C | 225,60b
| DF33 | 110,60c A | 66,60b B | 11,20c C | 188,40c
| PAM01/06 | 93,40d A | 53,00d B | 0,00d C | 146,40d

Massa seca
 (g)

POR01/06

13,28b A

8,98b B

4,00b C

26,26b

| BF24 | 15,26a A | 9,80a B | 6,60a C | 31,16a
| DF33 | 12,50c A | 8,18c B | 1,60c C | 22,28c
| PAM01/06 | 9,60d A | 6,26d B | 0,00d C | 15,86d
Médias seguidas de mesma letra minúscula, nas colunas, e maiúsculas, nas linhas, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.

A Tabela 2 apresenta os resultados obtidos para a produtividade (%) e eficiência biológica (%), das linhagens utilizadas durante este experimento, onde se verifica a diminuição dos valores de ambas as variáveis no decorrer dos fluxos. A linhagem POR01/06 foi superior as demais, exceto durante o terceiro fluxo onde a linhagem BF24 apresentou maiores médias para as variáveis analisadas. Já a linhagem PAM01/06 demonstrou os menores valores, pois no terceiro fluxo desenvolveu contaminações, afetando a frutificação. 
Maior frutificação ocorreu no primeiro fluxo e diminuiu significativamente nos fluxos sucessivos, tendo decréscimo na produtividade e eficiência biológica de 85% para POR01/06, 57% para BF24, 90% e 100% para DF33 e PAM01/06, respectivamente, quando comparados os valores obtidos durante o primeiro e terceiro fluxos.
Avaliando a produtividade e eficiência biológica total, verifica-se que POR01/06 apresentou-se superior as demais, sendo 23% maior que BF24, 43% e 56% superior a DF33 e PAM01/06, respectivamente, para ambas variáveis citadas.  
 
Tabela 2. Média da produtividade (%) e eficiência biológica (%) de diferentes linhagens de Pleurotus spp. cultivadas em capim-elefante (Pennisetum purpureum)
Variável | Linhagem | Fluxos | Total
| | 1 | 2 | 3 |
Produtividade (%) | POR01/06 | 21,52a A | 8,50a B | 3,14b C | 33,16a
| BF24 | 13,32b A | 6,56c B | 5,68a C | 25,56b
| DF33 | 10,89c A | 6,66b B | 1,12c C | 18,84c
| PAM01/06 | 9,34d A | 5,30d B | 0,00d C | 14,62d

Eficiência biológica
 (%)

POR01/06

86,32a A

34,00a B

12,56b C

132,64a

| BF24 | 53,28b A | 26,24c B | 22,72a C | 102,24b
| DF33 | 44,24c A | 26,64b B | 4,48c C | 75,36c
| PAM01/06 | 37,36d A | 21,20d B | 0,00d C | 58,64d
Médias seguidas de mesma letra minúscula, nas colunas, e maiúsculas, nas linhas, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.

Observando os resultados obtidos durante este trabalho e os confrontados com resultados de outros pesquisadores foi possível verificar a possibilidade de produzir cogumelos a partir de vários tipos de substratos ou resíduos, porém a produtividade e eficiência biológica vão ser diferenciadas de acordo com as linhagens e os substratos utilizados. Portanto, é importante a avaliação das linhagens e substratos para a produção dos fungos, deste modo selecionando os de melhores resultados para otimização do processo de bioconversão de resíduos em proteínas que possam ser utilizadas, principalmente, na alimentação humana.

4. CONCLUSÕES

	Pleurotus ostreatoroseus (POR01/06) apresenta maior produtividade, eficiência biológica e massa fresca de cogumelos, quando comparado as demais espécies cultivadas em capim-elefante (Pennisetum purpureum Schum).
	Pleurotus ostreatus (BF24) apresenta maior massa seca quando cultivada em capim-elefante. 
	O cultivo das três espécies de Pleurotus pode ser realizado em substrato apenas pasteurizado a 100ºC/30minutos.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

DONINI, L.P.; BERNARDI, E.; MINOTTO, E.; NASCIMENTO, J.S. Desenvolvimento in vitro de Pleurotus spp. sob a influência de diferentes substratos e dextrose. Arquivos do Instituto Biológico, v.72, n.3, p.331-338, 2005.
MANZI, P.; AGOZZI, A.; PIZZOFERRATO, L. Nutritional value of mushrooms widely consumed in Italy. Food Chemistry, n.73, p.321-325, 2001.
SAVÓN, R.C.B.; FERNÁNDEZ, C.D.; MANRIQUE, C.E.M.; SEVILLA, E.I.R.; QUEVEDO, H.J.M. Efecto de la luz em la concentración de micoesteroles de Pleurotus ostreatus Var. Florida. Revista Cubana Alimentación Nutrición, v.16, n.1, p.13-18, 2002.
SILVA, S.M. Formulação de meios de crescimento para o cultivo sólido de Pleurotus sajor-caju, à base de serragem de Pinus spp. 2004. 95 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Instituto de Biotecnologia, Universidade de Caxias do Sul, 2004.
ZHANG, R.; LI, X.; FADEL, J.G. Oyster mushroom cultivation with rice and wheat straw. Bioresource Technology, v.82, p.277-284, 2002.
ZONTA, E.P.;MACHADO, A.A. SANEST - Sistema de Análise Estatística para Microcomputadores. Registrado na Secretaria Especial de Informática sob nº 066060 - categoria A. Pelotas, RS: Universidade Federal de Pelotas, 1984.