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ANÁLISE DE TÉTRADES E GRÃOS DE PÓLEN EM TRITICALE HEXAPLÓIDE

ROSA, Patrícia Santos^1, CORRÊA, Maria Goreti Senna^1, NASCIMENTO Jr, Alfredo^2, BRAMMER, Sandra Patussi^2 e VIÉGAS, Judith^1

^1Laboratório de Biologia Celular, Departamento de Zoologia e Genética, Instituto de Biologia, UFPel, Cx. Postal 354, CEP 96010-900, Pelotas, Brasil
^2Centro Nacional de Pesquisa de Trigo, Embrapa Trigo, Cx. Postal 451, CEP 99001-970, Passo Fundo, Brasil

1. INTRODUÇÃO

O triticale foi o primeiro cereal sintetizado pelo homem, que tinha como objetivo combinar as melhores características de seus parentais: o trigo (Triticum aestivum L.) e o centeio (Secale cereale L.), visando produzir um híbrido que possuísse as melhores qualidades de seus parentais, como: elevado potencial de rendimento, grãos bem formados e de alto valor energético, elevado índice de colheita, maior capacidade de afilhamento, baixa estatura, resistência à germinação na espiga e qualidade panificadora do trigo. Embora não tenha sido possível colocar todas as características desejadas, o triticale possui espiga grande e com muitos grãos, alta produção de biomassa, melhor crescimento e desenvolvimento em baixas temperaturas, tolerância à seca, melhor resistência a doenças, grãos com maior teor de lisina e com alto valor protéico (Gupta & Priyadarshan, 1982; Nascimento Jr., 2003a). O triticale foi considerado como uma das culturas com maior potencial agronômico para ocupar parte da área não aproveitada durante o inverno no sul do Brasil, principalmente pelo elevado rendimento e resistência a doenças (Rosinha et al., 1983). Apesar dos cultivares do triticale serem mais competitivos em relação aos outros cereais, ainda possuem deficiências em algumas características agronômicas tais como a suscetibilidade a algumas doenças (giberela, brusone, manchas foliares e viroses), germinação em pré-colheita e formação deficiente do grão; deficiências estas que podem ser corrigidas e melhoradas através de novos ciclos de melhoramento (Nascimento Jr., 2003a).
 A planta é rústica, resistente ao acamamento e tolerante à acidez nociva do solo; possui grande capacidade de crescimento, em locais onde outras espécies de cereais não se desenvolveriam ou teriam crescimento reduzido; condições que lhe conferem rentabilidade econômica e ambiental, por apresentar, mesmo em condições adversas a outras culturas, uma produção elevada de matéria seca e de grãos, garantindo a sustentabilidade do sistema agrícola, principalmente em pequenas propriedades carentes de recursos para investimentos na condução de cultivos (Gupta & Priyadarshan, 1982; Nascimento Jr., 2003b). As cultivares brasileiras são aristadas, com pilosidade nas glumas e no ráquis. As espigas possuem 20 a 30 espiguetas com 3 a 5 grãos mais longos que os do trigo e com diâmetro maior que os do centeio (Nascimento Jr., 2003a).
O principal uso desta espécie em todos os países, principalmente no Brasil, é para a alimentação animal, principalmente de suínos e aves, podendo substituir, em até 75%, o milho utilizado em rações, obtendo o mesmo ganho de peso e conversão alimentar, comprovados em diversos trabalhos publicados. Paralelamente, vários mercados foram abertos no país para o uso da farinha de triticale diretamente na alimentação humana, como em massa para pizzas e em misturas (mesclas) com farinha de trigo para a fabricação de biscoitos e macarrão (Nascimento Jr. et al, 2003a).
Por ser um híbrido intergenérico pode ocorrer elevada instabilidade meiótica, que associada a anormalidades genéticas e/ou aberrações cromossômicas resulta na formação de plantas atípicas, macho-estéreis ou incapazes de produzir grãos. Isto impede o alcance dos padrões exigidos para a produção de sementes. É necessário que somente linhagens que possuam a devida estabilidade de produção de plantas típicas sejam avançadas no processo de melhoramento.
A seleção de genótipos estáveis pode vir a auxiliar o melhoramento dessa espécie, utilizando-os como parentais em cruzamentos ou gerando novas cultivares melhor adequadas aos padrões vigentes na legislação brasileira de sementes.
Tendo em vista a instabilidade meiótica verificada em cultivares de triticale, objetivou-se analisar o  número de micrósporos formados nas células mãe de pólen em fase de tétrade e o tamanho e a viabilidade dos grãos de pólen.

2. MATERIAL E MÉTODOS

	O presente trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biologia Celular do Departamento de Zoologia e Genética,Instituto de Biologia, UFPel, Pelotas, RS. Foram estudados nove genótipos de triticale hexaplóides provenientes da Embrapa Trigo de Passo Fundo, RS, conforme Tabela 1. As células em fase de tétrade e os grãos de pólen foram analisados utilizando-se técnicas convencionais de citogenética. As panículas foram fixadas, por 24 horas, em álcool acético (3:1) e estocadas em álcool 70%, em geladeira. As anteras foram esmagadas em uma gota de carmim acético 2%, esta preparação era brevemente aquecida sobre chama de lamparina, prensada manualmente a lamínula era vedada com cola de borracha.
As tétrades foram avaliadas quanto ao número de micrósporos como tétrades normais, aquelas com 4 micrósporos, e tétrades anormais, as que apresentaram menos de 4 micrósporos (díades e tríades), as com mais de 4 micrósporos (políades) e/ou com a presença de micronúcleos. 
Os grãos de pólen foram considerados normais quando ficaram corados com o carmim acético e anormais, quando não coraram. Os grãos de pólen menores do que 45 µm foram considerados pequenos, os com 45 a 48 µm, médios e grãos grandes, aqueles maiores do que 48 µm. 
O delineamento estatístico foi inteiramente casualizado, foram analisadas 100 tétrades/grãos de pólen por lâmina, com 5 repetições por genótipo.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

	A análise da variação mostrou haver diferenças significativas para tétrades normais/anormais entre os genótipos. Destacaram-se os genótipos PFT 401/2 e PFT 419 por apresentarem as maiores freqüências de tétrades anormais, não diferindo dos genótipos PFT 401/1, PFT 407 e PFT 924. As duas cultivares recentemente registradas pela Embrapa Trigo: BRS Minotauro, a primeira cultivar de triticale desenvolvida com trigo e centeio brasileiros e de ampla adaptação de cultivo, e BRS Ulisses, introduzida do México, do Centro Internacional de Melhoramento de Milho e Trigo (CIMMYT), testada, registrada e com lançamento previsto para 2007, foram aquelas que apresentaram menor número de células anormais, conforme Tabela 1.
Observando a Tabela 2, pode-se verificar que todos os genótipos produziram uma freqüência elevada de grãos de pólen viáveis, com um valor mínimo de 98,4% para BRS Ulisses e máximo de 100% para BRS Minotauro.
	Apesar das irregularidades nas tétrades, observadas entre os genótipos analisados, todos produziram grãos de pólen em quantidade suficiente para boa fecundação, o que permitiria utilizá-los como parentais masculinos. Entretanto, a freqüência de grãos de pólen irregulares entre eles, evidencia que esses podem variar entre si nessa e em outras características. Assim sendo, inferências podem ser realizadas em relação ao comportamento desses genótipos.

Tabela 1: Células anormais em fase de tétrades de genótipos de triticale	
Genótipo | Células Anormais (%)
PFT 401/2 | 54,06  a
PFT 419 | 51,88  a
PFT 401/1 | 47,56  ab
PFT 407 | 45,57  ab
PFT 924 | 42,09  abc
PFT 417 | 33,43    bcd
PFT 418 | 30,58     cd
BRS Minotauro | 17,58       de
BRS Ulisses | 17,46         e
 Medias seguidas pela mesma letra não diferem entre si ao nível de 5%, pelo teste de Duncan

Tabela 2: Freqüência de grãos de pólen de genótipos de triticale hexaplóides de acordo com o tamanho e  viabilidade 
Genótipos triticale hexaplóide | Grãos de pólen
| Tamanho (%) | | Viabilidade (%)
| Pequeno | Médio | Grande | |
PFT 401/2 | 18,75 | 39,52 | 41,73 | | 99,20
BRS Ulisses | 9,76 | 48,37 | 41,87 | | 98,40
BRS Minotauro | 46,00 | 28,60 | 27,20 | | 100,00
PFT 407 | 56,07 | 23,28 | 20,65 | | 99,20
PFT 419 | 46,20 | 20,80 | 36,20 | | 100,00
PFT 401/1 | 6,82 | 17,93 | 75,25 | | 99,60
PFT 418 | 41,00 | 32,50 | 26,50 | | 99,60
PFT 924 | 8,28 | 63,77 | 27,95 | | 99,40

	Pieritz, citado por Oettler (2005), verificou que, diferentemente da oosfera,  o pólen somente transmitia conjuntos cromossômicos euplóides ou, no máximo, com desvio de ± 1 cromossomo. Segundo Oettler (2005), resultados semelhantes foram descritos para triticales hexaplóides  e, mesmo, resultados mostrando a falta de correlação entre distúrbios meióticos e fertilidade normal.
	A menor freqüência de  tétrades irregulares nas duas cultivares de triticale recentemente registradas e propostas para cultivo no Brasil, evidencia que o melhoramento genético, mesmo não se utilizando de todas as ferramentas adequadas para a seleção daqueles tipos melhor adaptados e com estabilidade de produção, tende a selecionar aqueles que agregam o menor número de características indesejáveis. A seleção assistida, através de técnicas citológicas e de marcadores genéticos e moleculares pode ser uma excelente ferramenta de auxilio ao melhoramento convencional de plantas, tanto na eliminação de genótipos indesejáveis e/ou instáveis, como na seleção daqueles com elevadas características superiores.
“É obvio que a instabilidade meiótica e as desordens reprodutivas do triticale são o resultado de um fenômeno muito complexo que envolve muitos fatores. Apesar de décadas de pesquisa, nenhuma das várias teorias desenvolvidas pôde explicar os eventos citogenéticos. O papel dos diferentes fatores, sua importância e interações permanecem contraditórios (Oettler,2005).”

4. CONCLUSÕES

	Existem diferenças entre genótipos de triticale quanto à freqüência de tétrades irregulares.
	Genótipos que apresentam irregularidades meióticas podem produzir pólen viável e em quantidade elevada.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

GUPTA, P.K.; PRIYADARSHAN, P.M. Triticale: present status and future prospects. Advances in Genetics, 1982, 21: 255-345

NASCIMENTO JR., A Triticale: presente, passado e perspectivas. Palestra ministrada em 21/10/2003, na Embrapa Trigo, Passo Fundo, RS, Brazil., 43 slides no sistema Microsoft Power Point,  2003a.

NASCIMENTO JR., A. Melhoramento genético de triticale e de centeio para a maior competitividade e sustentabilidade dos sistemas sulbrasileiros de exploração agropecuária. Projeto de Pesquisa aprovado pela Embrapa – Empresa Brasileira de Pesquisa, como parte do Macroprograma 2: Competitividade e Sustentabilidade, 2003b , 51 p.

OETLLER, G. The fortune of a botanical curiosity – Triticale:past, present and future. Journal of Agricultural Science, 2005. 143: 329-346

ROSINHA, R.C.; BAIER, A.C.; CRÓCOMO, D.H.G.; GARCIA, J.C.; VIEIRA, L.F.; ROSINHA, R.C.; BORGONOVI, R.A.; TOMASINI, R.G.A.; Proposta de uma política de governo para o trigo, o milho, o sorgo e o triticale: Aspectos de substituição de importações e substituição de parte da farinha de trigo na produção de pães, massas e biscoitos. Brasília: EMBRAPA, (EMBRAPA. Documentos, 1). 1983. 35p.