Title: AÇÃO LARVICIDA DE DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE ESTRATO DE Amanita muscaria SOBRE Musca domestica
Author: FAMILIA CORREA CARCAMO
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aÇÃO LARVICIDA DE DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE ExTRATO DE Amanita muscaria SOBRE Musca domestica
CÁRCAMO, Marcial Corrêa^1,3; COSTA, Elton Luiz Guimarães da^2, NASCIMENTO, José Soares^2; RIBEIRO, Paulo Bretanha^1.

1. Laboratório de Biologia de Insetos – DEMP – IB/UFPel
2. Laboratório de Micologia – DEMP – IB/UFPel
3. Bolsista de Iniciação científica da FAPERGS
Campus Universitário  – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900. marcial.carcamo@gmail.com

1.	INTRODUÇÃO

As moscas caracterizam sérios problemas em granjas de aves e suínos, instalando-se em matéria orgânica animal em decomposição (Lomônaco e Prado, 1994), além de ocorrerem, em baixa freqüência, sobre cadáveres de mamíferos (Moura et al., 1997).
Musca domestica Linnaeus, 1758 (Diptera: Muscidae) é uma mosca altamente sinantrópica e tão onívora quanto o homem, o que possibilita sua distribuição cosmopolita (Skidmore, 1985), tornando-a uma praga potencial em diversos agroecossistemas. Desenvolve-se em quase todos os tipos de matéria orgânica em fermentação como os estrumes de eqüinos, bovinos e suínos. Estábulos, pocilgas e aviários estão entre os locais mais visitados por moscas domésticas.
 Para o controle destes insetos, várias alternativas têm sido utilizadas. Embora o controle químico ainda seja o método mais aplicado, alguns métodos alternativos têm sido estudados, na tentativa de desenvolver inseticidas naturais com baixo custo, sustentáveis e preferencialmente com ação seletiva, diminuindo, assim, os danos causados ao ambiente. Algumas plantas e fungos vêm se destacando nesses estudos, a partir da aplicação de extratos aquosos.
O gênero Amanita possui uma distribuição global (Oda, 2004), sendo que neste grupo constam várias espécies consideradas tóxicas. Estes Agaricales, com ação inseticida, já vêm sendo usados no controle de insetos há muito tempo. Entre eles se encontra Amanita muscaria, também conhecido como “cogumelo mata-moscas” (Cordier, 1876). A. muscaria é uma espécie exótica no Brasil, sendo original da Eurásia (Oda, 2004) e foi provavelmente introduzida no Rio Grande do Sul com o plantio comercial de Pinus ellioti Engelm. Alguns compostos inseticidas já foram isolados destes fungos como o ácido ibotêmico e as amatoxinas (Wang, 2002).
Apesar deste fungo ser utilizado já há muito tempo, existem poucos estudos que testam este cogumelo no controle de imaturos de moscas. Levando-se em consideração a importância da M. domestica (na saúde humana e animal), a ocorrência deste cogumelo no Rio Grande do sul e seu potencial tóxico, o presente trabalho buscou avaliar a influência de diferentes concentrações do extrato de A. muscaria na viabilidade das larvas de M. domestica.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

A colônia de M. domestica foi mantida durante todo o período de experimentação em câmara climatizada com temperatura variando de 26º C ± 2º C, umidade relativa do ar acima de 75% e com fotofase de ± 12h, mantidas no Laboratório de Biologia de Insetos no Instituto de Biologia, da Universidade Federal de Pelotas (DEMP/IB/UFPel). Os adultos foram mantidos em gaiolas teladas (30 x 30 x 30 cm) e alimentados com açúcar refinado e farinha de carne, em uma proporção de 2:1, respectivamente, sendo oferecida água em becker com espuma de poliestireno cobrindo a superfície do líquido. As larvas foram alimentadas com uma dieta composta de 66% de farinha de carne, 34% de serragem e água até tornar o meio pastoso.
A coleta dos espécimes de A. muscaria foi realizada no mês de Julho em uma pequena mata de Pinus ellioti, próximo a uma área alagada. Os basidiomas foram coletados com o véu parcial aberto e levados para o laboratório onde foram identificados e prontamente utilizados. 
Para testar a ação larvicida de A. muscaria foram preparadas cinco diferentes concentrações do basidioma fresco (50, 40, 30, 20 e 10%) triturado com água. Este material liquefeito foi utilizado para umedecer o meio, composto de 66% de farinha de carne e 34% de serragem. Sendo que para cada concentração do cogumelo foram realizadas 3 réplicas com 200 larvas, de primeiro ínstar, em 200g de meio. Foram feitas ainda 3 réplicas com 200 larvas, com o meio contendo apenas água, que serviu como controle. 
Para avaliar a mortalidade das larvas de M. domestica contabilizou-se as larvas que conseguiram abandonar o substrato e constatou-se também a viabilidade pupal das mesmas. Estes cálculos foram feitos levando em consideração a Correção de Abbott.       

Correção de Abbott = teste de mortalidade – mortalidade do controle (%) × 100 
100 – mortalidade do controle (%) 

3.	RESULTADOS E DISCUSSÃO

	A mortalidade constatada nas larvas de M. domestica causada pelas diferentes concentrações de A. muscaria variou de 0,00 a 89,30% (Tabela – 1) mostrando uma clara diminuição diretamente proporcional à concentração de cogumelo nos diferentes extratos. Sendo que as larvas sobreviventes do tratamento com A. muscaria continuaram seu desenvolvimento e apresentaram mortalidade considerada natural na sua fase pupal, menos na concentração de 20% que foi de 12,89%, está mortalidade atribuída provavelmente a outro fator que não a intoxicação da larva.

Tabela 1 – Bioatividade do extrato aquoso de Amanita muscaria, sobre larvas de Musca domestica em diferentes concentrações.

Mortalidade (%)
Concentrações (%) | Larvas | Pupas
50 | 89,30 | 4,94
40 | 67,88 | 0,00
30 | 45,26 | 1,00
20 | 27,98 | 12,89
10 | 0,00 | 0,59
0% (controle) | 31,5 | 9,15

Conforme Mier et al. (1996) A. muscaria não causou mortalidade para as larvas de Drosophila melanogaster (Diptera: Drosophilidae), para esta mosca foram consideradas tóxicas três outras espécies do gênero Amanita (A. phalloides, A. citrina e A. rubenses). No gênero Drosophila existem espécies que apresentam relações de co-evolução com plantas tóxicas, utilizando-se deste nicho para seu desenvolvimento, como no caso de Drosophila pachea que é a única mosca que explora o cactus Senita sp. produtor de um alcalóide fatal para outras moscas (Ehrlich & Raven, 1964).
 	Em trabalhos anteriores Besl et al (1987) citaram as espécies A. muscaria e A. pantherina como fungos com atividade tóxica sobre insetos, sendo que H. aurantiaca não foi considerado tóxico, contradizendo o estudo de Mier et al. (1996) que traz H. aurantiaca como espécie mais tóxica para D. melanogaster. Essas diferenças podem ter vários motivos dentre eles podemos citar as diferentes dosagens, estado fisiológico de maturação do basidioma (Bruns, 1984), respostas aos ataques de insetos (Rhoades, 1982). 
	Os compostos tóxicos encontrados no gênero Amanita são principalmente as amatoxinas e as phallotoxinas (Wieland, 1968). Estas são inibidoras da RNA polimerase (Cochet-Meilhac & Chambon, 1974), conseqüentemente tóxicas para a maioria dos eucariotos (Jaenike et al, 1983). Isto deve ser considerado ao usar o A. muscaria para o controle de larvas de moscas em agroecossistemas, já que o efeito do cogumelo pode afetar patógenos, predadores e parasitóides, que são responsáveis por alta mortalidade deste díptero.

4. CONCLUSÕES

	Extrato aquoso de A. muscaria apresenta ação larvicida sobre M. domestica, e esta ação varia conforme a concentração.

5.	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BESL H.; KRUMP C. H.; SCHEFCSIK M. Die wirkung von pilzfruchtkorpern auf Drosophila. Maden Zeitschrift Mykologie, 1987, v.53, n.2, p.273-278.
BRUNS, T. D. Fungus-insect relationship. Columbia University Press, New York, p.514, 1984.
COCHET-MEILHAC, M.; CHAMBON, P. Biochim. Biophys, Acta 353, 1974, p.160.
CORDIER, F. S. Les champignons, histore, description, culture, usage des espeses comestibles, vénéneuses, suspectes employèes dans i’ art, i’ industrie, i’ économie domestique et la médecine. Roth-child, Paris. 1876.
JAENIKE, J.; GRIMALDI, D. A.; SLUDER, A. E.; GREENLEAF, A. L. α-Amanitin tolerance in mycophagous Drosophila. Science, 1983, v.221, n.165-166.
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MIER, N.; CANETE, S.; KLAEBE, A.; CHAVANT, L.; FOURNIER, D. Insecticidal properties of mushroom and toadstool carpophores. Phytochemistry, 1996, v.41, n.5, p.1293-1299.
MOURA, M. O.; CARVALHO, C. J. B. DE; MONTEIRO-FILHO, E. L. A. A preliminary analysis of insects of medico-legal importance in Curitiba, state of Paraná. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, 1997, v.92, n.2, p.269-274.
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RHOADES, D. F. Plant resistance to insects. American Chemical Society Symposium  Series-208, Las Vegas, p.55, 1982.
SKIDMORE, P. The biology of the Muscidae of the world. Dordrecht, Dordrecht Kunk Publishers. p.550, 1985.
WANG, M., TRIGUÉROS, V., PAQUEREAU, L., CHAVANT, L.; FOURNIER, D. Proteins as active compounds involved in insecticidal activity of mushroom fruitbodies. Journal Economical Entomology, 2002, v.95, p. 603-607. 
WIELAND, T. Poisonous principles of mushrooms of the genus Amanita: four-carbon amines acting on the central nervous system and cell-destroying cyclic peptides are produced. Science, 1968, v.159, p.946-952.