INFLUÊNCIA DO HERBICIDA GLADIUM SOBRE A PRODUÇÃO E CRESCIMENTO DA Azolla caroliniana.
	
DODE, Juliana1 e Lopes, Nei1
1Deptº de Fisiologia Vegetal – IB/UFPel
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1.	INTRODUÇÃO

A Azolla é um gênero de pteridófita aquática flutuante com sete espécies existentes, distribuída em regiões temperadas e tropicais em toda parte do mundo (Watanabe et al., 1992). A distribuição geográfica da Azolla indica grande adaptabilidade a condições ambientais extremamente variadas. A Azolla é encontrada em todos os continentes, flutuando em lâminas de água de 50 a 100 mm. Tem ciclo médio de 15 a 30 dias e se reproduz por fragmentação.
A Azolla contém uma cianobactéria fixadora de nitrogênio, a qual se aloja nas cavidades foliares, proporcionando a associação todo o N necessário. A cianobactéria, Anabaena azollae Strasburguer é a única espécie conhecida em associação simbiótica com a Azolla spp.
A associação Azolla-Anabaena é caracterizada pelo fornecimento de carboidratos, nutrientes minerais e proteção a Anabaena pela samambaia, recebendo em troca o nitrogênio fixado necessário ao seu crescimento.  Ambos associados são fotossinteticamente ativos, mas só a pteridófita fornece fotoassimilados (Arora & Shing, 2003).
O complexo Azolla-Anabaena se compara bem com a associação simbiótica Bradyrhizobium-soja, um exemplo da utilização da técnica de fixação biológica do dinitrogênio, representando atualmente, no Brasil, uma economia de mais de 10 milhões de barris de petróleo por ano, que seriam empregados para produzir adubo nitrogenado aplicado na cultura da soja.
O uso da associação Azolla-Anabaena na agricultura é notável, por estar acoplado a uma alta produtividade com uma elevada taxa de fixação de nitrogênio. E por habitar ambientes aquáticos se adapta à cultura do arroz irrigado por inundação, servindo assim como N-biofertilizante para esta cultura. Também pode ser usado como adubo verde fornecendo além do N, outros elementos como fósforo e potássio (Lumpkin & Plucknett, 1980; Wagner, 1997).               
O objetivo deste trabalho foi identificar a ação do herbicida gladium sobre o crescimento de plantas de Azolla caroliniana, por meio da análise da produção de matéria seca e crescimento de área foliar. 

2. MATERIAL E MÉTODOS 

As plantas de Azolla carolinana foram pré-cultivadas em solução nutritiva sem nitrogênio, em bandejas plásticas (0,5 X 0,4 X 0,08 m), cobertas com sombrite para diminuir a radiação dentro da casa de vegetação, para obtenção de inoculo.
	Após a multiplicação, as plantas de Azolla foram distribuídas, na quantidade de cinco gramas de matéria fresca por bandeja. Antes da distribuição da Azolla nas bandejas, o excesso de água foi drenado, deixando-as em repouso por trinta minutos sobre peneiras de tela de arame.
A unidade experimental foi formada por uma bandeja plástica (0,44 X 0,28 X 0,08 m) com quatro litros de solução nutritiva. A solução nutritiva de macro e micronutrientes utilizada foi a de Hoagland a 40% sem nitrogênio (Hoagland & Arnon, 1950), renovada semanalmente.
	O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, em esquema fatorial (7 X 6), constituído por sete coletas, efetuadas a intervalos regulares de quatro dias durante o crescimento da Azolla, totalizando 28 dias,  sendo a primeira coleta realizada quatro dias após a inoculação, e seis doses do herbicida gladium (controle, 9, 12, 18, 36, 72 mg i. a. mֿ²), com três repetições.		
A área foliar (Af) da Azolla foi determinada medindo-se, com uma régua milimetrada, a superfície da bandeja coberta com Azolla. 
Em cada coleta, as plantas de Azolla foram retiradas das bandejas e colocadas sobre uma armação de madeira com tela de arame por trinta minutos, para drenar o excesso de água aderido às plantas. Imediatamente, foi determinada a massa da matéria fresca (MF).
A matéria seca total (Wt) da Azolla foi obtida em estufa à temperatura de 70º ± 1º C, até massa constante.
	 Os dados primários de Wt e Af  foram ajustados em relação ao tempo pela equação logística: Wt = Wm / (1 + Ae-Bt ), sendo Wm o valor assintótico do crescimento máximo em função do tempo (t) e A e B coeficientes de ajustamento e por polinômios ortogonais, respectivamente (Richards, 1969).  

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A Azolla geralmente apresenta três fases distintas: inicialmente, uma fase de crescimento lento, até o quarto dia após a inoculação, provavelmente em conseqüência da pequena quantidade de inoculo, com diminuta superfície de interceptação de energia solar. A segunda fase apresenta um crescimento acelerado, após cinco dias e continua além dos doze dias até preencher todo o espaço disponível. A terceira fase se caracteriza por crescimento lento e pequeno declínio, com tendência a um patamar, devido ao aparecimento de um fator limitante, a superfície disponível da bandeja (Holst & Yopp, 1979). 
A fase exponencial de crescimento da Azolla é caracterizada pelo tempo requerido para a duplicação de sua fitomassa. O tempo pode ser constante durante toda a fase exponencial, dependendo das condições de cultivo. Em condições adequadas, o tempo de duplicação é inferior a 48 horas. Entretanto, em condições de campo, é mais freqüente um período de 10 dias. A duração total da fase de crescimento exponencial depende da relação entre quantidade de inóculo inicial e superfície de crescimento disponível. Essa fase termina quando a densidade populacional corresponde a uma superfície de cobertura pouco superior a 100% (Lumpkin & Pluckneet, 1982; van Hove et al., 1983).
Nas plantas controle, a fase lenta ocorreu até o quarto dia, após este período ocorreu um crescimento exponencial, porém não chegando a ocorrer a terceira fase de crescimento lento, certamente por não ter preenchido todo o espaço disponível da bandeja (Figura 1). No entanto, as plantas tratadas com o herbicida gladium na solução nutritiva, apresentaram durante o período experimental um crescimento lento e contínuo, sem apresentar três fases distintas não chegando a cobrir a superfície da bandeja (Figura 1). A produção de matéria seca foi drasticamente reduzida pelo gladium, sendo esse efeito deletério acentuado com o incremento na dose do herbicida.

Figura 1 – Acúmulo de matéria seca durante a ontogenia de plantas de Azolla caroliniana crescidas em diferentes doses de gladium, sendo o controle (♦), 9 mg i.a. m-2 (■), 12 mg i.a. m-2 (▲), 18 mg i.a. m-2 (○), 36 mg i.a. m-2 () e      72 mg i.a. m-2 ().   

Na maioria dos tratamentos as plantas de Azolla apresentaram semelhanças no período onde Af foi máximo, ou seja, os valores Af foram máximos aos 28 DAI. No entanto, o tratamento com dose de 18 mg i.a. m-2, foi o único que diferiu apresentando o valor de Af máximo aos 12 DAÍ (Figura 2).

Figura 2 – Área foliar durante a ontogenia de plantas de Azolla caroliniana crescidas em diferentes doses de gladium, sendo o controle (♦), 9 mg i.a. m-2 (■), 12 mg i.a. m-2 (▲), 18 mg i.a. m-2 (○), 36 mg i.a. m-2 () e 72 mg i.a. m-2 ().   

Normalmente, as plantas sombreadas mostram tendência em expandir a superfície foliar mais rapidamente, para maximizar a interceptação e a absorção da luz disponível.Pode ser que a Af não tenha sido muito afetada, devido ao modo de ação do herbicida. O gladium pertence ao grupo de herbicidas inibidores de ALS, bloqueando a síntese dos aminoácidos valina, leucina e isoleucina nas plantas suscetíveis (Shaner et al., 1984), assim não interferindo diretamente na expansão foliar.
4. CONCLUSÕES

Em condições de casa de vegetação em solução nutritiva, todas as doses do herbicida gladium testadas influenciaram negativamente de forma moderada a severa o acúmulo de matéria seca e a área  foliar da Azolla caroliniana. 

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

ARORA, A. & SINGH, P. K. Comparison of biomass productivity and nitrogen fixing potencial of Azolla ssp. Biomass and Bioenergy, 24: 175-178,  2003.
HOAGLAND, D. R.; ARNON, D. I. The culture method for growing plants without soil, Berkeley, California Agriculture Experimental Station, 1950, 32p. (Boletim 347).
HOLST, R. W. & YOPP, J. H. Studies of the Azolla-Anabaena symbiosis using  A. mexicana I. Growth in nature and laboratory. Amer. Fern J., 69:17-25, 1979. 
LUMPKIN, T. A. & PLUCKNEET, D. L. Azolla: botany, physiology and use as green manure. Econ. Bot., 34: 111-113, 1980.
LUMPKIN, T. A. & PLUCKNEET, D. L. Azolla as green manure: use and management in crop production. Boulder, West view Press, 1982. 229p.  
RICHARDS, F. J. The quantitative analysis of growth. In: STEWARD, F. C. (ed) Plant Physiology. A treatise. New York: Academic press, 1969. p. 3-76.
SHANER, D. L.; ANDERSON, P. C.; REIDER, M.; STIDHAM, M. A.; ORWICK, P. L. Physiological responses of corn to Arsenal. Proceeding Southern Weed Science Society, 37: 364, 1984.
van HOVE, C.; DIARA, H. F.; GOARD, P. Azolla en afrique de L’ouest.. Louvain-La-Neuve, 1983, 52p.
WAGNER, G. M. Azolla: a review of its biology and utilization. Bot. Rev. 63, 1-26, 1997.
WATANABE, I.; ROGER, P. A., LADHA, J. K., Van HOVE, C., Biofertilizer germplasm collections at IRRI. International Rice Research Institute, Los Baños, Laguna, Philippines, 1992.