ATIVIDADE DA α-AMILASE em SEMENTES e plântulas DE SOJA CONVENCIONAL E TRANSGÊNICA SUBMETIDAS AO GLIFOSATO
BERVALD, Clauber Mateus Priebe1; MENDES, Cristina Rodrigues2; TIMM, Fabiana Carret2; LIMA, Maria da Graça de Souza2; MORAES, Dario Munt de2; BARROS, Antônio Carlos Albuquerque1
1Departamento de Fitotecnia – FAEM – UFPel;
2Laboratório de Fisiologia de Sementes – DB – IB/UFPel
Campus Universitário  – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900. clauberagro@pop.com.br

1.	INTRODUÇÃO

O glifosato é um herbicida pós-emergente, pertencente ao grupo químico das glicinas substituídas, classificado como não-seletivo e de ação sistêmica. Apresenta largo espectro de ação, o que possibilita um excelente controle de plantas daninhas anuais ou perenes, tanto de folhas largas como estreitas. Ele atua como um potente inibidor da atividade da 5-enolpiruvilshiquimato-3-fosfato sintase (EPSPS), que é catalisadora de uma das reações de síntese dos aminoácidos aromáticos fenilalanina, tirosina e triptofano. Influencia também outros processos, como a inibição da síntese de clorofila, estimula a produção de etileno, reduz a síntese de proteínas e eleva a concentração do ácido indol-acético (IAA) [ 1, 2]. 
Durante o processo de germinação das sementes, após embebição, são mobilizadas as reservas endospermáticas com a finalidade de desenvolvimento do eixo embrionário. Dentre essas reservas estão os açúcares solúveis e o amido, que são metabolizados pelas enzimas α-amilase e fosfatase ácida. A enzima α-amilase é hidrolítica, e é produzida pela camada de aleurona em resposta à ação das giberelinas, sendo liberada dentro do endosperma onde causa a conversão do amido em açúcares, utilizados no crescimento do embrião [3], e sua atividade é máxima com cerca de dez dias após o início da germinação [4, 5, 6].
Diante disto, o trabalho teve por objetivo determinar a atividade da enzima α-amilase de sementes e plântulas de soja convencional CD 216 e transgênica CD 212RR submetidas a diferentes doses do herbicida glifosato.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi realizado no Laboratório de Fisiologia de Sementes do Departamento de Botânica, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas (RS), de maio a julho de 2005. 
Sementes de soja convencional da cultivar CD 216 e transgênica CD 212RR, foram submetidas a um tratamento controle (zero) e diferentes doses do herbicida glifosato (1,8; 3,6; 5,2; 7,0 g L-1 do e.a.) por meia hora, sendo logo após semeadas em papel germitest conforme RAS [7].
Sementes no tempo zero dias e plântulas com cinco e oito dias após a germinação foram secas em estufa a 70 + 1°C, sendo depois moídas para a obtenção da farinha. Utilizou-se três repetições de 0,5g de farinha das sementes e plântulas, e determinou-se a atividade enzimática, espectrofotometricamente, no comprimento de onda de 620nm, conforme CHING [8], e os resultados expressos em μg de amido hidrolisado g-1 semente.
O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial (2 X 5), sendo duas cultivares, cinco doses de herbicida, com três repetições estatísticas. As médias dos tratamentos foram comparadas pelo teste Tukey a 5% de probabilidade. 

3.	RESULTADOS E DISCUSSÃO

Nas sementes, a atividade da enzima α-amilase não apresentou diferença entre as cultivares, exceto na dose 3,6gL-1 da cv. CD 216 e na dose zero na cv. 212RR, que foram afetadas pelo herbicida (Tabela 1).
Aos cinco dias, a atividade da enzima α-amilase na cultivar CD 216 foi mais afetada nas doses (zero, 1,8 e 5,2gL-1 de e.a.), enquanto que na cv. CD 212RR, a atividade da α-amilase foi menor na dose mais alta (7,0gL-1 de e.a.). Aos oito dias, ocorreu diferença acentuada na atividade da enzima α-amilase entre as cultivares, sendo que a atividade enzimática da cv. CD 216 foi afetada por todas as doses, enquanto que a cv. CD 212RR não sofreu com a ação do herbicida (Tabela 1).

Tabela 1. Atividade da enzima α-amilase em sementes de soja convencional CD 216 e transgênica CD 212RR, após meia hora de embebição nas diferentes doses de glifosato.

Doses
(gL-1 e.a.)	α-amilase (µg g-1 semente)	
	TEMPO (dias)	
	Semente (zero dias)	Plântula (5 dias)	Plântula (8 dias)	
	CD 216	CD 212RR	CD 216	CD 212RR	CD 216	CD 212RR	
Zero	0,14a*	0,13b	0,12b	0,14a	0,12b	0,13a	
1,8	0,14a	0,14a	0,11b	0,12a	0,09b	0,12a	
3,6	0,14b	0,15a	0,13a	0,13a	0,08b	0,12a	
5,2	0,13a	0,14a	0,12b	0,13a	0,09b	0,13a	
7,0	0,14a	0,14a	0,12a	0,11b	0,10b	0,12a	
CV (%)	2,31	4,43	7,44	

*Médias seguidas da mesma letra na linha (cultivares) não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5% de significância.

Observou-se que a atividade da enzima α-amilase na cv. CD 216 foi maior na semente em todas as doses do herbicida (Tabela 1), seguindo uma tendência de diminuição com o passar do tempo nos estágios de plântula, em virtude da redução das reservas de amido, tendência não seguida pela atividade da enzima α-amilase da cv. CD 212RR, que se manteve praticamente constante nas plântulas de cinco e oito dias. A diminuição da atividade da enzima α-amilase provavelmente ocorreu pela influência do herbicida glifosato. 

4.	CONCLUSÕES

A atividade da enzima α-amilase das cultivares de soja testadas diminuiu em função do tempo, sendo que a soja convencional teve a atividade enzimática mais afetada pelo glifosato.

5.	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] COLE, D. J. Mode of action of glyphosate – a literature analysis. In: GROSSBARD, E.; ATKINSON, D. (Ed.). The herbicide glyphosate, pp. 49-54. Londres: Butterworths, 1985.
[2] RODRIGUES, J. D. Absorção, translocação e modo de ação de defensivos (glifosato e alachlor). Botucatu: Unesp, 1994. 10 p. Apostila.
[3] ARTECA, R. N. Plant growth substances: principles and applications. Pennsylvania State University: Chapman & Hall, 1995. 332p.
[4] BEWLEY, J. D. e BLACK, M., Seeds, physiology of development and germinaton. New York: Plenum Press. 1994.445p.
[5] MAYER, A. M. e POLJAKOFF-MAYBER, A. The germination of seeds. Oxford: Pergamon Press. 2.ed. 1975. 192p.
[6] MAIA, F. C.; MORAES, D. M. e MORAES, R. C. P. Atividade total da fosfatase ácida e da a-amilase por ácido jasmônico em sementes de soja. Revista Brasileira de Sementes. Londrina, 22(1): 259-263, 2000.
[7] BRASIL. Ministério da Agricultura e Reforma Agrária. Regras para análise de sementes. Brasília: SNDA/DNDV/CLAV, 1992. 365p. 
[8] CHING, T.M. Biochemical aspects of seed vigour. Seed Science & Technology, Zürich, v.1, n.1, p.73-88, 1973.