TOXICIDADE DE INSETICIDAS UTILIZADOS NA CULTURA DO MILHO À Trichogramma pretiosum RILEY, 1879 (HYMENOPTERA TRICHOGRAMMATIDAE)

PASCHOAL, Murilo Damé Fonseca*1; GRÜTZMACHER, Anderson Dionei1; GRÜTZMACHER, Douglas Daniel1; STEFANELLO JÚNIOR, Getulio Jorge1; LIMA, Crislaine Alves Barcellos de1; CASTILHOS, Rodolfo Vargas1.

1Departamento de Fitossanidade, FAEM/UFPel
Campus Universitário - Caixa Postal 354, CEP 96010-900. *murilodame@yahoo.com.br 

1. INTRODUÇÃO

A cultura do milho é hospedeira de várias espécies de insetos-praga, tanto na fase vegetativa quanto reprodutiva, destacando-se especialmente a lagarta-do-cartucho Spodoptera frugiperda (Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae). Entretanto, a utilização de inseticidas de amplo espectro para o controle de S. frugiperda favorece o surgimento de pragas de final de ciclo na cultura do milho como Helicoverpa zea (Boddie, 1850) (Lepidoptera: Noctuidae) (Borba et al., 2003).
Dentre os inimigos naturais de S. frugiperda e H. zea, destacam-se os parasitóides de ovos da família Trichogrammatidae, em especial o gênero Trichogramma, que controlam as pragas já na fase de ovo, antes destas causarem qualquer dano à cultura.
Além disso, o gênero Trichogramma apresenta distribuição mundial e está associado a diversas espécies de insetos-praga em diferentes culturas. Em função disso, o grupo de trabalho da “International Organization for Biological and Integrated Control of Noxious Animals and Plants (IOBC), West Palaearctic Regional Section (WPRS)”, escolheu como espécie padrão para a realização de testes de seletividade para registro de novos pesticidas. 
Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo a avaliação dos efeitos de inseticidas Organofosforados e Reguladores de Crescimento de Insetos (RCI) utilizados na cultura do milho a adultos do parasitóide Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae).

2. MATERIAL E MÉTODOS

Os experimentos consistiram na aplicação das metodologias laboratoriais padronizadas pela IOBC/WPRS conforme Hassan et al. (2000) e Hassan & Abdelgader (2001) e foram conduzidos nos Laboratórios de Biologia de Insetos e de Pesticidas e Drogas do Departamento de Fitossanidade da FAEM-UFPel, Pelotas, RS.
Os parasitóides T. pretiosum utilizados nos experimentos foram obtidos da criação em laboratório (temperatura 25±1ºC, umidade relativa 70±10% e fotofase 14 horas) sob ovos do hospedeiro alternativo Anagasta kuehniella (Zeller, 1879) (Lepidoptera: Pyralidae). 
Foram conduzidos testes de toxicidade inicial em laboratório expondo-se adultos (estágio de vida mais sensível) de T. pretiosum a pesticidas. Os pesticidas-teste [produto comercial (ingrediente ativo) dosagem do produto comercial em L ha-1] foram: inseticidas organofosforados [Dipterex® 500 (triclorfom) 2], [Malathion® 500 CE Sultox (malatiom) 2,5],  [Sumithion® 500 CE (fenitrotiom) 1,5] e [Vexter® (clorpirifós) 1] e inseticidas reguladores de crescimento de insetos [Dimilin® (diflubenzurom) 0,1], [Gallaxy® 100 EC (novalurom) 0,15], [Mimic® 240 SC (tebufenozida) 0,3] e [Intrepid® 240 SC (metoxifenozida) 0,18],  utilizando-se a dosagem máxima indicada para a cultura do milho. Foram realizados dois experimentos (I e II), devido à capacidade operacional do sistema instalado no laboratório, que permite a realização de seis tratamentos por experimento. Dessa maneira, para cada experimento, os tratamentos foram pesticidas em teste (4 tratamentos), água destilada (testemunha negativa) e outro pesticida reconhecidamente nocivo, classe 4, pela IOBC (Lorsban® 480 BR testemunha positiva). 
Os produtos foram pulverizados sobre placas de vidro de 2 mm de espessura (13 cm x 13 cm) utilizando-se pulverizadores manuais de 580 mL que proporcionaram uma deposição de calda variando de 1,5 a 2,0 mg cm-2, aferido mediante balança eletrônica com precisão de miligramas. Após pulverização as placas de vidro permaneceram à sombra por cerca de 3 horas, para secagem da calda, formando uma película do pesticida. Posteriormente, estas placas foram utilizadas para confecção das gaiolas de exposição. 
Cada gaiola de exposição consistiu de duas placas de vidro que serviram de fundo e cobertura, as quais foram colocadas em uma armação de alumínio composta por quatro laterais de 13 cm de comprimento x 1,5 cm de altura x 1 cm de largura, sendo fixadas através de presilhas. Três lados da armação continham seis orifícios para ventilação (1 cm de diâmetro), sendo cobertos com tecido preto firmemente aderido à lateral interna da gaiola. Bombas de vácuo foram conectadas às gaiolas, para realizar a ventilação do sistema e evitar a concentração de gases tóxicos no seu interior. O quarto lado da armação de alumínio continha um orifício com 1 cm de diâmetro utilizado para introdução dos parasitóides  e outro com 3,5 cm de comprimento x 1 cm de altura para introdução dos cartões com ovos do hospedeiro e alimento. Ambos orifícios foram fechados com fita adesiva preta e protegidos internamente com fita anti-aderente, evitando assim a adesão e imobilidade dos insetos. 
Tubos de emergência, contendo adultos de T. pretiosum com 24 horas de idade, foram conectados às gaiolas permitindo a entrada dos mesmos. As gaiolas de contato foram mantidas em sala climatizada nas condições de temperatura 25±1oC, umidade relativa 70±10% e fotofase 14 horas. 
Ao longo dos experimentos foram ofertados ovos do hospedeiro A. kuehniella para serem parasitados: no segundo dia (dia seguinte à pulverização das placas) três cartões de papel contendo três círculos por cartão (350±50 ovos em cada círculo); no terceiro dia foram oferecidos dois cartões de papel e no quinto dia apenas um cartão. Sete dias após a aplicação, as gaiolas foram desmontadas. O número médio de ovos parasitados foi avaliado três dias após o término dos experimentos.
O número de ovos parasitados por fêmea de T. pretiosum de cada tratamento foi utilizado para calcular a capacidade de parasitismo. As reduções no parasitismo ocasionadas pelos pesticidas-teste foram comparadas com a testemunha negativa (água destilada). Com base nas reduções no parasitismo os pesticidas-teste foram classificados da seguinte maneira: classe 1=inócuo (< 30%), classe 2=levemente nocivo (30-79%), classe 3=moderadamente nocivo (80-99%) ou classe 4=nocivo (>99%).
 3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados dos experimentos encontram-se expressos na Tabela 1, onde demonstram o percentual de redução na capacidade de parasitismo e as classes, na qual os produtos testados foram enquadrados. Os inseticidas (% ingrediente ativo) Dipterex® 500 (0,5), Malathion® 500 CE Sultox (0,625), Sumithion® 500 CE (0,375) e Vexter® (0,24) foram considerados nocivos (classe 4) a adultos de T. pretiosum, reduzindo o parasitismo em 100%. Grützmacher et al. (2004) também classificaram os inseticidas [ingrediente ativo (% ingrediente ativo)] Dipterex® 500 [triclorfom (0,15)], Malathion® 1000 CE [malatiom (0,2)] e Sumithion® 500 CE [fenitrotiom (0,075)] como nocivos a adultos de T. pretiosum. Estes inseticidas, mesmo nas menores concentrações testadas pelos autores, demonstraram seus altos níveis de toxicidade ao parasitóide.
Os inseticidas (% ingrediente ativo) Dimilin® (0,0125), Mimic® 240 SC (0,036), Intrepid® 240 SC (0,0216) e Gallaxy® 100 EC (0,0075) foram considerados inócuos a espécie (classe 1), reduzindo o parasitismo em valores inferiores a 30%. Resultados semelhantes para metoxifenozida (Intrepid® 240 SC) também foram obtidos por Nörnberg et al. (2004) com T. pretiosum. Lima et al. (2006) obtiveram resultado similar para tebufenozida (Mimic® 240 SC), enquadrando o inseticida na classe 1 (inócuo). Os inseticidas Dimilin®, Mimic® 240 SC, Intrepid® 240 SC e Gallaxy® 100 EC, pertencentes ao grupo dos RCI, são alternativas viáveis para programas de Manejo Integrado de Pragas (MIP) na cultura do milho, pois se mostram eficientes para o controle de lepidópteros-praga e inócuos a adultos do inimigo natural T. pretiosum.

Tabela 1. Seletividade de inseticidas à Trichogramma pretiosum no teste de toxicidade inicial sobre adultos (estágio mais sensível), utilizando dosagem máxima indicada a campo do produto comercial para a cultura do milho. Temperatura: 25±1ºC; Umidade Relativa: 70±10%; Fotofase: 14 horas.
Ingrediente ativo/Produto comercial	DC1	C.i.a. (%)2 	RP3	Classes4	
Experimento I	
Organofosforados	
Triclorfom/Dipterex® 500	2,00	0,5000	100,00	4	
Malatiom/Malathion® 500 CE Sultox	2,50	0,6250	100,00	4	
Fenitrotiom/Sumithion® 500 CE	1,50	0,3750	100,00	4	
Clorpirifós/Vexter®	1,00	0,2400	100,00	4	
Experimento II	
Reguladores de crescimento de insetos	
Diflubenzurom/Dimilin®	0,10	0,0125	9,23	1	
Novalurom/Gallaxy® 100 EC	0,15	0,0075	28,99	1	
Tebufenozida/Mimic® 240 SC	0,30	0,0360	12,37	1	
Metoxifenozida/Intrepid® 240 SC	0,18	0,0216	20,08	1	
1DC = Dosagem de campo (L produto comercial hectare-1); 
2C.i.a.= Concentração testada do ingrediente ativo na calda; 
3RP = Redução (%) na taxa de parasitismo comparado com a testemunha do experimento;
4Classes da IOBC para teste de toxicidade inicial sobre adultos: 1=inócuo (<30% RP), 2=levemente nocivo (30-79% RP), 3=moderadamente nocivo (80-99% RP), 4=nocivo (>99% RP).
Testes de toxicidade inicial, em laboratório, para adultos de parasitóides representam uma condição extrema e objetivam selecionar os pesticidas a serem avaliados em testes posteriores de persistência (casa-de-vegetação). 
Dessa forma, as próximas etapas a serem conduzidas utilizarão os pesticidas classes 3 e 4 em testes de persistência biológica, que ajudarão na estimativa do risco de uso dos agrotóxicos a T. pretiosum nas lavouras de milho.

4. CONCLUSÕES

Os inseticidas (% ingrediente ativo) Dipterex® 500 (0,5), Malathion® 500 CE Sultox (0,625), Sumithion® 500 CE (0,375) e Vexter® (0,24) são nocivos a adultos de T. pretiosum no teste de toxicidade inicial em laboratório.
Os inseticidas (% ingrediente ativo) Dimilin® (0,0125), Mimic® 240 SC (0,036), Intrepid® 240 SC (0,0216) e Gallaxy® 100 EC (0,0075), são inócuos a adultos de T. pretiosum no teste de toxicidade inicial de laboratório.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BORBA, R. DA S. et al. Avaliação de espécies ou linhagens de Trichogramma para o parasitismo de Spodoptera frugiperda em condições de laboratório. In: REUNIÃO TÉCNICA ANUAL DO MILHO, SORGO E FEIJÃO, 47, 30 e 35., 2002, Porto Alegre, RS. Anais... Porto Alegre: EMATER/RS, FEPAGRO, 2003. Cd-rom.
GRÜTZMACHER, A. D. et al. Efeito de inseticidas e de tecnologias de aplicação no controle da lagarta-do-cartucho na cultura do milho no agroecossistema de várzea. In: REUNIÃO TÉCNICA ANUAL DO MILHO E SORGO, 45 e 28 (Documentos, 70)., 2000, Pelotas, RS. Anais... Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2000. p. 567-573.
GRÜTZMACHER, A. D. et al. The side-effects of plant protection products used in integrated production of peaches on adults of Trichogramma pretiosum Riley (Hym., Trichogrammatidae). Egg Parasitoid News, Darmstadt, v. 16, p. 28, 2004.
HASSAN, S. A.; ABDELGADER, H. A sequential testing program to assess the effects of pesticides on Trichogramma cacoeciae Marchal (Hym., Trichogrammatidae). IOBC/WPRS Bulletin, v. 24, p. 71-81, 2001.
HASSAN, S. A. et al. A laboratory method to evaluate the side effects of plant protection products on Trichogramma cacoeciae Marchal (Hym., Trichogrammatidae). In: CANDOLFI, M. P. et al. (Eds.). Guidelines to evaluate side-effects of plant protection products to non-target arthropods. Reinheim: IOBC/ WPRS, 2000. p. 107-119.
LIMA, C. A. B. et al. Seletividade de inseticidas reguladores de crescimento usados na produção integrada de maçã à adultos de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae). In: CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 14., 2006, Pelotas, RS. Resumos... Pelotas: UFPel, 2006. Cd-rom.
Nörnberg, S. D. et al. Seletividade de inseticidas e acaricidas utilizados na cultura do pessegueiro à Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae). In: CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 13., 2004, Pelotas, RS. Resumos... Pelotas: UFPel, 2004. Cd-rom.