CRESCIMENTO MICELIAL DE RAÇAS DE Colletotrichum lindemuthianum EM DIFERENTES MEIOS DE CULTURA
1REY,  Maristela dos Santos; 2MARRONI, Igor, 1FARIAS, Cândida R. Jacobsen ; 
3 PIEROBOM, Carlos Roberto 
1,2 Doutoranda em Fitossanidade, Departamento de Fitossanidade, FAEM-UFPEL (maris_rey@yahoo.com.br)
2 Mestrando em Fitossanidade, FAEM-UFPEL
3 Professor PhD Titular Departamento de Fitossanidade

1. INTRODUÇÃO
Fungos do gênero Colletotrichum são importantes agentes fitopatogênicos que causam antracnose em diversas culturas. O fungo C. lindemuthianum (Sacc. & Magn.) Briosi e Cavara é o agente causador da antracnose do feijoeiro, uma das mais importantes doenças desta cultura no Brasil. Desta forma, estudos relacionados com a fisiologia destes fungos se tornam relevantes, visando o combate à doença ou a obtenção de cultivares resistentes.
As raças ou patótipos de C. lindemuthianum são determinados pela infecção ou não de um grupo diferencial de variedades de feijão comum. A adoção de um grupo padrão de cultivares e nomenclatura, como o proposto por Pastor-Corrales (1991) tem permitido uma comparação consistente entre raças obtidas por diferentes pesquisadores. Mais de cem raças de C. lindemuthianum já foram identificadas em todo o mundo. 
Os meios de cultura podem influenciar de maneira positiva ou negativa no desenvolvimento de espécies de Colletotrichum sp.  Barbosa (2005), estudando meios de cultura, verificou que o meio de Aveia proporcionou o melhor desenvolvimento micelial de Colletotrichum lagenarium, demonstrando um crescimento de 0,7 a 1,57 cm por dia. Estes resultados concordam com Assis (2001), que mostra que o amido, também fonte de carbono, proporciona o melhor crescimento micelial do fungo Colletotrichum gloesporioides. E, Couto & Menezes (2004) demonstraram que o crescimento micelial de isolados de C. musea com combinações das fontes de carbono (dextrose, sacarose, sorbitol) e peptona, sobressaíram-se das demais, sendo significativamente superiores. Já, testando a eficiência de fungicidas, Kossoski et al. (2001) demonstraram que o crescimento micelial do fungo Colletotrichum acutatum foi reduzido na presença dos fungicidas prochloraz e tebocunazole.  
Frente a isso, o objetivo do experimento é verificar o efeito de diferentes meios de cultura no crescimento micelial das raças 65, 73 e 81 do fungo Colletotrichum lindemuthianum.

2.MATERIAL E MÉTODOS
O experimento foi realizado no laboratório de Patologia de Sementes da FAEM-UFPEL.  Foram utilizadas culturas das raças de 65, 73 e 81 de C. lindemuthianum, identificadas pelo sistema binário proposto por PASTOR-CORRALES (1991) e pelas plantas diferenciadoras propostas pelo Centro Internacional de Agricultura Tropical (Tabela 1). A multiplicação do inóculo foi feita por repicagem de fragmentos de micélio que se encontravam em tubos de ensaio contendo meio BDA (batata-dextrose-ágar) para placas de Petri de plástico com 9 cm de diâmetro, contendo meio Mathur, constituído por peptona (2,0g/l), dextrose (2,8g/l), MgSO4 (1,73g/l), KH2PO4 (2,72g/l) e ágar (20g/l). O meio de cultura verificado no crescimento micelial das raças de C. lindemuthianum foi o meio Ágar de Sacc, constituído principalmente de CaCO3. Os tratamentos e a testemunha (meio Mathur ) foram acondicionados em câmara de incubação sob temperatura de 21 ± 2°C com fotoperíodo de 12 horas. Os meios de cultura foram esterilizados em autoclave com 121 ºC por 20 min. O experimento foi constituído de 8 tratamentos com cinco repetições, sendo utilizadas três raças, um meio de cultura e, uma testemunha contendo somente o meio Mathur. Para estudo dos resultados foi feito um teste de médias, com o Programa Plotit 3.2. A avaliação do crescimento das colônias iniciou no quarto dia de crescimento, sendo realizadas as medições a cada 72 horas, num total de seis avaliações. O diâmetro das colônias foi verificado utilizando-se uma régua comum transparente. 
O índice de crescimento micelial foi verificado a partir da fórmula proposta por OLIVEIRA (1991):
	ICM = C1 + C2 + ....Cn
	              N1+ N2+....Nn
onde: ICM= crescimento micelial; C1, C2, .Cn = crescimento das colônias na primeira, segunda e última avaliação; N1, N2  e   Nn número de dias. 

 Tabela 1 – Reação da série diferenciadora para as raças de C. lindemuthianum  inoculadas sobre os cultivares de P. vulgaris. Pelotas, 2006.

Série Diferenciadora	Patótipos	

Cultivares	65	81	73	
Michelite	S*	S	S	
MDRK*	R	   R**	S	
Perry Marron	R	R	S	
Cornell 49242	R	R	S	
Widusa	R	S	S	
Kaboon	R	R	S	
México 222	S	S	S	
PI 207262	R	R	S	
TO	R	R	S	
TU	R	R	S	
AB136	R	R	S	
G 2333	R	R	R	

              * S= suscetível;**R= resistente

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados obtidos permitem afirmar que o meio de cultura que mais favoreceu o crescimento micelial das raças 65, 73 e 81 de Colletotrichum lindemuthianum, foi o meio Mathur, usado como testemunha, com relação ao meio Ágar de Sacc. Conforme a tabela 2, ocorre diferença estatística no crescimento micelial das três raças do fungo em relação aos dois meios testados, porém esta diferença não ocorre entre os patótipos, no que diz respeito ao crescimento no meio que mostrou melhor desenvolvimento das raças, demonstrando os patótipos não diferiram com relação a sua velocidade de crescimento. As taxas de Crescimento micelial (TCA) das raças 65, 73 e 81 foram de 42,8; 45,1 e 46,4% respectivamente (Tabela 2).

Tabela 2 - Média do Crescimento micelial (cm) e Taxa de Crescimento Micelial (TCM) das raças 65, 73 e 81 nos meios de cultura Mathur (testemunha) e Ágar de Sacc. Pelotas, 2006.

 	        Crescimento Micelial	 	
 	           Meios de cultura	 	
Patótipos	Mathur	Ágar de Sacc	TCM (%)	
65	7,4 a	4,5 b	42,8	
73	7,5 a	5,33 b	45,1	
81	7,4 a	6,13 b	46,4	
                           *Médias seguidas pelas mesmas letras, numa mesma coluna, não diferem entre si,                      pelo teste de Tukey, a  5% de probabilidade. 

Os resultados do experimento discordam dos dados obtidos por Souza et al. (2006), na qual demonstra que o crescimento micelial do fungo Colletotrichum gloesporioides foi maior nos meios de cultura de Aveia e BDA e menor no meio Mathur. 
 O meio Ágar de Sacc, constituído basicamente de CaCO3, mostrou-se prejudicial ao crescimento radial do fungo C. lindemuthianumum neste estudo, entretanto em trabalho realizado por Queiroz et al. (2004) o crescimento micelial de Alternaria brasiliensis foi maior em V8 + CaCO3. 
Os dados deste trabalho evidenciam que alguns meios de cultura podem afetar negativamente o desenvolvimento de fungos fitopatogênicos, no que diz respeito ao seu crescimento vegetativo. 

CONCLUSÕES
Meios de cultura constituídos de CaCO3, podem ser prejudiciais á algumas raças de Colletotrichum lindemuthianum. E, o meio Mathur favorece o crescimento micelial do patógeno.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

ASSIS, T. C.; MENEZES, M.; ANDRADE, D. E.; COELHO, R. S. B.; OLIVEIRA, M. Estudo comparativo de isolado de Colletotrichum gloesporioides a respeito do efeito da nutrição do hidrato de carbono no crescimento, esporulação e na patogenicidade em três variedades de morango. Summa Phytopatologica, n.27, vol. 2. pág. 202-212, 2001.
Barbosa, A. A. Caracterização de isolados de Colletotrichum lagenarum agente causal da Antracnose das cucurbitáceas. ESALQ, Piracicaba (Dissertação de Mestrado). 68 pag., 2005.
COUTO, E.F. & MENEZES, M. Caracterização fisiomorfológica de isolados de Colletotrichum musae. Fitopatologia Brasileira, n. 29, pág. 406-412. 2004.
KOSOSKI, R.M., FURLANETTO, C., TOMITA, C.K. & CAFÉ FILHO, A.C. Efeito de fungicidas em Colletotrichum acutatum e controle da antracnose do morangueiro. Fitopatologia Brasileira, n. 26, pág. 662-666, 2001.
OLIVEIRA, J. A. Efeito do tratamento fungicida em sementes e no controle de tombamento de plântulas de pepino (Cucumis sativus L.). Lavras: Universidade Federal de Lavras, (Dissertação de mestrado). 111p. 1991.
PASTOR-CORRALES, M.A. Estandarización de variedades diferenciales y designación de razas de Colletotrichum lindemuthianum. Phytopathology, v. 81, p. 694, 1991.
QUEIROZ, F.M., BATISTA, U.G. & BROMMONSCHENKEL, S.H. Avaliação de meios de cultura no crescimento micelial e esporulação de Alternaria brasiliensis. Fitopatologia Brasileira, n. 29, pág. 541-543, 2004.