SENSIBILIDADE AO ÁCIDO NALIDÍXICO DE CEPAS DE Escherichia coli PRODUTORAS DE TOXINA SHIGA (STEC) 

TIMM, Cláudio Dias1; CONCEIÇÃO, Rita de Cássia dos Santos1; DIAS, Priscila Alves1; TEJADA, Talita Schneid1; ALEIXO, José Antônio Guimarães2

1 Inspeção de Leite e Derivados, Faculdade de Veterinária, UFPel. E-mail: inspleit@ufpel.tche.br  
Campus universitário, prédio 34, Pelotas, RS, CEP 96010-900
2 Laboratório de Imunologia Aplicada, Centro de Biotecnologia, UFPel 

1. INTRODUÇÃO

Escherichia coli produtoras de toxina shiga (STEC) estão associadas a diversas enfermidades em humanos, como diarréia, colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica (SHU) (Paton & Paton, 1998). O principal fator de virulência de STEC é uma potente citotoxina denominada toxina shiga (Nataro & Kaper, 1998). STEC sorotipo O157:H7 é importante patógeno emergente em países desenvolvidos, onde têm causado surtos de infecção alimentar (Neill, 1997). No Brasil, casos esporádicos de diarréia e SHU têm sido associados com STEC O157:H7 e não O157:H7 (Cantarelli et al., 2000; Irino et al., 2002; Guth et al., 2002; Vaz et al., 2004; Nishimura et al., 2005).
Os bovinos são considerados o principal reservatório de STEC (Kaper et al., 2004). Produtos de origem bovina, especialmente carne mal cozida e leite cru, estão entre os alimentos mais comumente implicados em surtos (Neill, 1997; Blanco et al., 2004a). Alta ocorrência de STEC tem sido identificada em fezes de bovinos no Brasil e sua ocorrência em carne bovina tem sido registrada (Cerqueira et al., 1997; Cerqueira et al., 1999; Guth et al., 2003; Leomil et al., 2003; Irino et al., 2005). No Rio Grande do Sul, Moreira et al. (2003) encontraram prevalência de 49% de STEC em fezes de bovinos de leite sadios. Entretanto, a ocorrência de SHU no Brasil é extremamente baixa e os estudos realizados têm identificado principalmente STEC não O157:H7, embora seja freqüente a ocorrência de sorotipos relacionados com enfermidades graves em humanos. Diferentemente, a vizinha Argentina, onde STEC também tem sido isolada de fezes de bovinos (Parma et al., 2000; Blanco et al., 2004b; Meichtri et al., 2004), apresenta uma das maiores incidências mundiais de SHU (López et al., 1997).
Ácido nalidíxico é uma quinolona utilizada no tratamento de infecções por E. coli. O surgimento de cepas multirresistentes devido ao desenvolvimento de resistência cruzada entre quinolonas e outras drogas é bem conhecido (George & Levy, 1983; Barry & Levy, 1984).
Como estudo preliminar de sensibilidade a fatores adversos de cepas de STEC de sorotipos associados com SHU albergadas por bovinos no sul do Brasil, foi avaliada a resistência ao ácido nalidíxico de uma cepa de referência de STEC O157:H7 e de 12 cepas de STEC de seis diferentes sorotipos já relatados como associados com SHU isoladas de fezes de bovinos na região.

2. MATERIAL E MÉTODOS

	Foram utilizadas uma cepa de E. coli O157:H7 da coleção da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) e 12 cepas de STEC do banco de cepas do Laboratório de Inspeção de Produtos de Origem Animal (LIPOA) da Universidade Federal de Pelotas isoladas de fezes de bovinos de corte e de leite no Rio Grande do Sul (Tabela 1). Todas as cepas estudadas pertencem a sorotipos previamente associados à SHU (http://www.lugo.usc/ecoli).

Tabela 1: Cepas de STEC utilizadas no estudo, sorotipos e fonte do isolado.
Identificação	Sorotipo	Fonte	
LIPOA 1035	O22:H8	Bovino de corte	
LIPOA 1039	O22:H8	Bovino de corte	
LIPOA 1064	O22:H8	Bovino de corte	
LIPOA 1141	O22:H8	Bovino de leite	
LIPOA 1164	O22:H8	Bovino de leite	
LIPOA 1132	O91:H21	Bovino de leite	
LIPOA 1170	O91:H21	Bovino de leite	
LIPOA 1155	O112:H2	Bovino de leite	
LIPOA 1100	O113:H21	Bovino de corte	
LIPOA 1103	O113:H21	Bovino de corte	
LIPOA 1124	O163:H19	Bovino de leite	
LIPOA 1003	O174:H21	Bovino de corte	
LIPOA 1001	O157:H7	Fiocruz	

As cepas, após recuperação em Infusão de Cérebro e Coração (BHI, Oxoid, Basingstoke, Hampshire, England) a 37ºC por 24 h, foram semeadas por esgotamento em superfície de ágar para Contagem Padrão em Placas (PCA, Acumedia, Baltimore, Maryland, USA) com adição de ácido nalidíxico nas concentrações 0,1; 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 e 10,0 g/mL. As placas foram incubadas por 24-48 h a 37ºC para verificação de crescimento.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Todas as cepas não apresentaram crescimento em concentrações superiores a 0,5 g de ácido nalidíxico por mL de meio, com exceção da E. coli O157:H7, que cresceu em meio com até 5 g de ácido nalidíxico/mL.
Segundo Wagner et al. (1983), a concentração inibitória mínima (MIC) de ácido nalidíxico para E. coli é 4 g/mL. No presente estudo, E. coli O157:H7 apresentou resistência a concentração de 5 g/mL, superior ao valor da MIC, enquanto que todas as cepas isoladas de fezes de bovinos no sul do Brasil foram sensíveis a concentrações bastante inferiores à MIC.
Embora a sensibilidade in vitro ao ácido nalidíxico seja uma particularidade na caracterização de STEC albergadas por bovinos no sul do Brasil, o fato de serem sensíveis a concentrações 10 vezes menores de ácido nalidíxico do que E. coli O157:H7 pode ser um indício da menor resistência destes isolados frente a fatores ambientais adversos. O uso indiscriminado de antibióticos de largo espectro no Brasil poderia contribuir para a baixa sobrevivência das cepas locais fora de seu hospedeiro principal, colaborando para a baixa ocorrência de enfermidades graves causadas por STEC em humanos no país.
Porque a ocorrência de HUS no Brasil é tão baixa permanece desconhecido. Outros estudos relativos a fatores de resistência das cepas locais em comparação com cepas implicadas com SHU em outros países, especialmente Argentina, devem ser realizados para ampliar o conhecimento relativo a essa questão.

4. CONCLUSÃO

	As cepas de STEC isoladas de bovinos de corte e de leite no sul do Brasil estudadas neste trabalho apresentaram sensibilidade ao ácido nalidíxico oito vezes maior que a MIC desse antimicrobiano para E. coli e 10 vezes maior do que uma cepa de referência de STEC O157:H7.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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