cULTIVARES DE AMORA- PRETA: FENÓIS TOTAIS E CAPACIDADE ANTIOXIDANTE
CHIM, Josiane Freitas1; ZAMBIAZI, Rui Carlos1; PILECCO, Juliana Lima2.
1Deptº de Ciência e Tecnologia Agroindustrial – Programa de Pós-graduação/FAEM/UFPel
2Deptº de Ciência dos Alimentos – Curso de Química de Alimentos/UFPel
Campus Universitário  – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900. josianechim@gmail.com

1.	INTRODUÇÃO

Pequenas frutas constituem importantes fontes de compostos fitoquímicos, os quais são considerados potentes agentes promotores da saúde. A amora-preta é uma fonte rica de compostos fenólicos como ácidos fenólicos, antocianinas, proantocianinas e outros flavanóides. Estes compostos fenólicos são metabólitos secundários naturalmente presente nas plantas e sua importância está relacionada à promoção da saúde e na prevenção de doenças, recentemente estudadas em investigações científicas (Sellapan et al., 2002). A funcionalidade destes compostos baseia-se em sua ação como inibidor de radicais livres e como seqüestraste de enzimas e metais, os quais estariam envolvidos em condições patológicas como aterosclerose, câncer e inflamações crônicas (Sellapan et al., 2002; Siriwoharn et al. 2004; Zadernowski et al., 2005). 
A capacidade seqüestraste de radicais livres é primariamente atribuída a alta reatividade dos substituintes hidroxi (-OH) ligados ao anel benzo-pireno presente na estrutura dos flavanóides, que participam segundo a reação:  F-OH +  R∙   →   F - O∙  +  RH, sendo F-OH  o flavonóide e R∙ o radical livre. Assim, o grupamento hidroxi doa um átomo de hidrogênio e um elétron para o radical livre, tornando-o estável. Devido a capacidade do grupo aromático de suportar o desapareamento de elétrons, a estrutura do flavanóide fica estabilizada (Kuskoski et al., 2004).
A concentração dos compostos fitoquímicos presentes na amora-preta é influenciada por fatores como o tipo de cultivar, das condições ambientais e climáticas na pré-colheita, das doenças da planta, dos procedimento de colheita, do ponto de maturação na colheita, da localização geográfica, da exposição à luz solar, das condições de estocagem pós-colheita e do tipo de processamento a que é submetido o fruto (Sellapan et al., 2002; Zadernowski et al., 2005). 
Dentre os compostos fenólicos presentes na amora-preta, destacam-se as antocianinas: cianidina-3-glicosídio e cianidina-3-rutinosídio, que são as mais representativas; os flavanois: quercetina e kaempferol; os ácidos hidroxicinâmicos: ácido p-coumárico, ácido cafeico, ácido ferúlico, e o ácido elágico que encontra-se presente em quantidade mais significativa na forma de seu precursor, o ácido gálico (Määta- Riihinen et al., 2004; Siriwoharn et al., 2004).
Uma grande variedade de métodos in vitro para determinar o potencial antioxidante destes compostos tem sido usada atualmente, variando basicamente no tipo de reativo, pH e comprimento de onda mensurado. O método DPPH (1,1´-diphenyl-2-picrylhydrazyl) vem sendo aplicado comumente na determinação da capacidade antioxidante de compostos fenólicos em óleos de oliva, frutas, sucos e vinhos (Villaño et al., 2006).
O presente trabalho teve por objetivo analisar a quantidade de fenóis totais de três cultivares de amora-preta mais comuns na região sul do estado do Rio Grande do Sul e compara-las com seu potencial antioxidante.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

	Foram utilizadas frutas in natura de amora-preta, cultivares Brazos, Tupi e Guarani, cultivadas na região de Pelotas-RS e colhidas no período de novembro a dezembro de 2005, em campos experimentais da Embrapa Clima Temperado (Pelotas-RS), e mantidas sob congelamento, em embalagens de polietileno de baixa densidade até a chegada ao laboratório de análises físico-químicas (DCA – UFPel). Antes da realização das análises estas frutas passaram por um descongelamento lento, a fim de provocar o menor dado celular possível. 
	Foram realizadas análises de fenóis totais, segundo a metodologia de Ough & Amerine (1996) e determinação da capacidade antioxidante, realizada pelo método DPPH, utilizando-se o reativo 1,1´-diphenil-2-picrilhidrazil, usado como radical livre para reagir com os compostos antioxidantes presentes nas frutas em estudo, através da metodologia adaptada de Miliauskas et al. (2004), fazendo-se a leitura da absorbância em espectrofotômetro analytikjenaAG a 515nm, realizada antes da adição da amostra e após 45 minutos de reação com o reativo DPPH. Todas as determinações foram realizadas nas três cultivares de amora-preta e realizadas em triplicata.
	 Os resultados obtidos no estudo foram avaliados por análise de variância ANOVA, sendo aplicado posteriormente o teste de Tukey para comparar as médias de cada determinação, ao nível de 5% de probabilidade através do software Statistica 6.0.

3. 	RESULTADOS E DISCUSSÃO

A figura 1 demonstra o conteúdo de fenóis totais presentes nas cultivares de amora-preta em estudo.

Legenda: A quantificação de fenóis totais é expressa em mg de ácido gálico por litro de solução.
Figura 1. Conteúdo de fenóis totais em cultivares de amora-preta in natura.

	A quantificação de fenóis totais representa o conteúdo de substâncias fenólicas presentes em pequenas frutas, englobando, dentre outros, o kampferol, quercetina, miricetina, ácido gálico e ácido elágico (Häkkinen et al.,1998). A determinação destes compostos torna-se importante por estarem intimamente relacionados com a atividade antioxidante das frutas (Shahrzad & Bitsch, 1996). Nas cultivares de amora-preta estudadas não observou-se diferença significativa no conteúdo de fenóis totais, resultado semelhante ao encontrado por Sellappan et al.(2002) em estudos com outras cultivares de amora-preta.
	A figura 2 apresenta os dados da medida da capacidade antioxidante das cultivares de amora-preta em estudo obtida pelo método DPPH.

Figura 2. Dados da medida da capacidade antioxidante obtida pelo método DPPH.

	O método de medida da capacidade antioxidante DPPH vem sendo aplicado para avaliar a atividade anti-radical livre de inúmeras substâncias, e baseia-se na propriedade que os compostos antioxidantes presentes em uma amostra tem de capturar o radical de DPPH∙ livre no meio e promover com isso uma atenuação da cor do meio reagente. A leitura da cor é realizada em absorbância, usando espectrofotômetro e aplicando a expressão (Miliauskas et al., 2004; Villaño et al., 2006): % inibição do radical livre = [(ABS do branco – ABS da amostra) / ABS do branco] x 100, sendo ABS a absorbância lida no espectrofotômetro.
	Frutas e vegetais contém diferentes compostos que são classificados como antioxidantes, como a vitamina C, a vitamina E, os carotenóides e os compostos fenólicos, aos quais recentemente tem sido atribuído como os principais responsáveis por este processo (García-Alonso et al., 2004). 
	As cultivares de amora-preta não apresentaram diferença significativa na porcentagem de inibição de radicais livres pelo método DPPH, semelhantemente com os resultados de fenóis totais, o que nos leva a crer que são os fenóis totais os principais responsáveis pelo poder antioxidantes destas frutas. O potencial antioxidante de frutas esta intimamente relacionado com à composição específica dos diferentes tipos de compostos fenólicos presentes, uma vez que a atividade antioxidante ótima de um composto depende de sua configuração espacial e do número e da posição dos grupos hidroxila presentes em sua estrutura (Kuskoski et al., 2004).

4. CONCLUSÕES

	As cultivares de amora-preta Brazos, Guarani e Tupi mostraram ser boa fonte de anti-radicais livres, demonstrando que há, possivelmente, uma relação direta entre conteúdo total de fenóis e capacidade antioxidante, sendo estes os principais compostos que respondem pela captação de radicais livres.

5.	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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