PERFIL DE RESISTÊNCIA DE SALMONELAS A SEIS AGENTES ANTIMICROBIANOS
CONCEIÇÃO Rita de Cássia dos Santos da¹, MOREIRA Ângela Nunes², VASCONCELLOS, Flávia Aleixo²*, RAMOS Roberta Juliano², CARVALHAL José Beiro¹, ALEIXO, José Antônio Guimarães².

1Faculdade Nutrição–UFPel;
²Laboratório de Imunologia Aplicada  Centro de Biotecnologia - UFPel
Campus Universitário  CEP 96010-900  *flavia@santamelia.agr.br 

1.	INTRODUÇÃO
Bactérias do gênero Salmonella estão entre as principais causas de enfermidades transmitidas por alimentos. A transmissão desta bactéria a humanos ocorre pela ingestão de carnes mal-cozidas, leite, ovos e outros alimentos, como vegetais, que são ingeridos crus após sofrerem contaminação cruzada [4]. Os produtos e alimentos de origem animal são os maiores responsáveis pela distribuição mundial de salmonelose e seus problemas subseqüentes [6]. 
O perfil de sensibilidade e resistência de cepas de Salmonella a antimicrobianos, além de ser um marcador epidemiológico, serve para orientar procedimentos terapêuticos em medicina humana e veterinária. Entre os sorotipos de Salmonella, Salmonella Typhimurium tem se mostrado como o sorotipo que apresenta uma maior prevalência de resistência a antimicrobianos, em particular a cepa definida como DT 104. 
O presente trabalho teve por objetivo realizar um estudo do perfil de suscetibilidade de vinte e quatro cepas de Salmonella a seis agentes antimicrobianos. 

2.	MATERIAL E MÉTODOS
2.1.	Bactérias:
Vinte e quatro cepas de Salmonella isoladas de alimentos foram utilizadas neste experimento. Os alimentos envolvidos (carne e salsichão de frango) foram adquiridos no comércio local, no período de março de 2002 à fevereiro de 2004.

2.2. Isolamento de Salmonella
A metodologia utilizada para o isolamento de Salmonella foi realizada de acordo com a descrita no Bacteriological Analytical Manual, 8a edição [2].

2.3. Teste de Sensibilidade a antimicrobianos
O teste de sensibilidade a antimicrobianos foi realizado pelo método de Kirby-Bauer [3]. Discos de papel filtro, contendo agentes antimicrobianos, foram colocados em placas contendo meio de Mueller-Hinton (Merck, Darmstadt, Germany) inoculado com culturas das cepas isoladas em uma densidade equivalente ao padrão 1,0 de McFarland. As placas foram incubadas à 35oC por 24h. Os antimicrobianos estudados foram: ampicilina (10 mcg), cloranfenicol (30 mcg), norfloxacin (10 mcg), ceftriaxona (30 mcg), perfloxacina (5 mcg) e cotrimoxazol (25 mcg). Após a incubação, foi feita a leitura dos halos de inibição de crescimento formados ao redor dos discos e a interpretação dos resultados foi realizada com o auxílio de uma tabela de padrões. 

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados de sensibilidade aos antimicrobianos testados encontram-se demonstrados na Tabela 1. O aparecimento de cepas multi-resistentes tem sido relatado entre os diversos sorotipos de Salmonella. Neste experimento, das 24 cepas analisadas, foram encontradas três de Salmonella multi-resistente, sendo que uma das cepas foi resistente a todos e duas a cinco dos antimicrobianos testados. Um total de 45,8% (11) das cepas isoladas foi resistente a um ou a mais de um dos antimicrobianos testados e 8,3% (2) foi sensível a todos os antimicrobianos testados. A grande maioria das cepas testadas foi sensível ao cloranfenicol, resultado também encontrado por outros autores [1,7]. O cloranfenicol tem sido utilizado como droga de escolha no tratamento de salmonelose sistêmica em humanos e, desde a década de 70, tem tido seu uso diminuído na terapia de animais utilizados para produção de alimentos [8]. O presente trabalho demonstrou que 54,2% (13) das cepas apresentaram um perfil de resistência intermediário ao antimicrobiano ceftriaxona. O aparecimento de cepas resistentes a este antimicrobiano tem sido relatado e é um fato preocupante, visto que tal droga tem sido recomendada para o tratamento de formas invasivas de salmonelose [5].

Tabela 1: Perfil de resistência e sensibilidade a antimicrobianos encontrado nas cepas de Salmonella analisadas.  
Antimicrobianostestados	Número (%) de
Isolados resistentes	Número (%) de Isolados Intermediários	Número (%) de
 Isolados sensíveis	
Ampicilina	5 (20,8)	7 (29,2)	12 (50)	
Ceftriaxona	1 (4,2)	13 (54,2)	10 (41,7)	
Cloranfenicol	4 (16,7)	0 (0)	20 (83,3)	
Cotrimoxazol	4 (16,7)	1 (4,2)	19 (79,2)	
Perfloxacina	10 (41,7)	5 (20,8)	9 (37,5)	
Norfloxacin	4 (16,7)	0 (0)	20 (83,3)	

4. CONCLUSÃO
Os níveis de resistência antimicrobiana encontrados enfatizam a necessidade de um controle no uso indiscriminado dos antimicrobianos testados.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] ANTUNES, P., RÉU, C., SOUSA, J.C., PEIXE, L., PESTANA, N. Incidence of Salmonella from poultry products and their susceptibility to antimicrobial agents, International Journal of Food Microbiology, v.82, p.97-103, 2003;
[2] BAM/FDA. Bacteriological Analytical Manual/ Food and Drug Administration, 8th, Arlington: Association of Official Analytical Chemists,1998;
[3] BAUER, A.W.,KIRBY, M.M., SHERRIS, J.C., ET AL. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disc method. American Journal Clinical Pathology, v.45, p.493-496, 1966;
[4] FAVRIN, S.J., JASSIM, S.A., GRIFFITHS, M.W. Development and Optimization of a novel immunomagnetic separation – bacteriophage assay for detection of Salmonella enterica serovar Enteritidis in broth. Applied and Environmental Microbiology, v.67, n.7, p.217-224, 2001;
[5] GORDON, D. Ceftriaxone-resistant Salmonella infection from antibiotic-treated cattle. Gastroenterology, 2000; 
[6] JAY, J.M. Microbiologia moderna de los alimentos. 3ed., Zaragoza: Editorial Acribia, 1992. 804p.
[7] MAYRHOFER, S. PAULSEN, P., SMULDERS, F.J.M., HILBERT, F. Antimicrobial resistance profile of five major food-borne pathogens isolated from beef, pork and poultry, International Journal of Food Microbiology, v.97, p.23-29, 2004.

[8] OLIVEIRA, S.D., FLORES, F.S., SANTOS, L.R., BRANDELL, A. Antimicrobial resistence in Salmonella enteritidis strains isolated from broiler carcasses, food, human and poutry-related samples, International Journal of Food Microbiology, v.97, p.297-305, 2005.