DETECÇÃO DE ANTICORPOS IgG ANTI-Toxoplasma gondii EM CÃES DO BAIRRO JARDIM AMÉRICA, MUNICÍPIO DO CAPÃO DO LEÃO-RS.

CADEMARTORI, Beatris González1; RECUERO, Rebeca da Cunha2; JORGE, Sérgio2; DIAS, Denise Gamio1; FERNANDES, Cláudia Pinho Hartleben3; RECUERO, Ana Lúcia Coelho1; PILTCHER, Maira Guedes3; BROD, Claudiomar Soares3.
1Pós Graduação em Parasitologia UFPel; 2Acadêmicos de Veterinária UFPel; 3 Faculdade de Veterinária Centro de Controle de Zoonoses UFPel. 
biacademartori@yahoo.com.br

1. INTRODUÇÃO

A toxoplasmose é uma zoonose de distribuição mundial, causada por um protozoário, o Toxoplasma gondii [2]. O parasito reproduz-se de forma assexuada e sexuada nos felinos, seus hospedeiros definitivos, e apenas de forma assexuada nos hospedeiros intermediários, mamíferos e aves. Suas principais formas de transmissão ocorrem pela ingestão de carnes cruas ou mal cozidas contendo cistos do protozoário, ingestão de oocistos esporulados presentes no solo contaminado, em verduras ou legumes contaminados, ingestão de taquizoítos presentes no leite cru ou saliva, acidentes de laboratório, transplacentária, transfusões de sangue e transplante de órgãos [1].
Geralmente, a doença é de curso benigno em imunocompetentes, mas pode causar lesões graves em imunossuprimidos e fetos [5].
O diagnóstico laboratorial da doença em fase aguda é realizado através da dosagem de imunoglobulinas do tipo IgA, IgM e IgE, que são de aparecimento rápido e, posteriormente o aparecimento de IgG, que permanece detectável por toda a vida [2].
Na espécie canina foi descrito pela primeira vez em 1910, na Itália por Mello e no Brasil por Carini, em 1911, apresentando uma elevada suscetibilidade à infecção pelo Toxoplasma gondii [5].
Estudos realizados no Brasil mostraram uma variada e significativa taxa de prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii na população canina [1,3].
Devido à espécie canina dividir o mesmo habitat com o homem, a significativa prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii encontrada na população canina é considerada um indicativo de contaminação ambiental [1] e um potencial fator de risco de infecção também para a espécie humana. O objetivo deste estudo foi verificar a soropositividade de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii na espécie canina domiciliada em residências localizadas na área do Sangão, bairro Jardim América, do município do Capão do Leão (RS).

2. MATERIAL E MÉTODOS

Foram avaliadas amostras sangüíneas de 50 cães, oriundos da área do entorno do Sangão no Município do Capão do Leão, Rio Grande do Sul, no laboratório do Centro de Controle de Zoonoses da UFPel, durante o mês de agosto de 2005.
Utilizou-se para análise o método de Inibição da Hemaglutinação (® Ebran, São Paulo), o qual possibilita a dosagem qualitativa e semiquantitativa de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii. Para eliminar reações cruzadas com os anticorpos IgM, as amostras foram inativadas com 2-Mercaptoetanol a 0,1 M durante trinta minutos a 37ºC, conforme as orientações do fabricante do kit. Esta técnica delimita a dosagem qualitativa dos anticorpos a partir de uma diluição 1:32 com tampão fosfato pH 7,2. O reagente utilizado é constituído de hemácias de aves sensibilizadas com antígeno de Toxoplasma gondii em tampão fosfato, pH 7,2.
Paralelamente com as dosagens das amostras, foram realizados os controles positivo e negativo do kit, a fim de verificar a eficácia dos reagentes utilizados.
Foram consideradas amostras reagentes quando ocorreu a formação de um manto homogêneo no interior do retículo da placa e, não-reagentes quando houve a sedimentação das hemácias no interior do retículo da placa, em forma de botão.
Nas amostras reagentes foram realizados os testes semiquantitativos com tampão fosfato, pH 7,2.
Foi aplicado um questionário epidemiológico aos moradores das residências, onde havia cães domiciliados, referentes aos fatores de risco à infecção por Toxoplasma gondii. Os fatores de risco relacionaram-se aos hábitos alimentares da espécie canina, existência de hortas, presença de roedores e felinos, entrada de animais estranhos, condições de saneamento básico e o uso, ou não, de calçamento peridomiciliar nas residências habitadas por estes animais.
A análise das variáveis foi processada no programa Epinfo 6.04.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Das 50 amostras analisadas, 10 apresentaram anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii com títulos superiores a 1:2048, e 40 amostras foram não-reagentes, ou seja, títulos inferiores a 1:32. Determinando um percentual de 20% de soropositividade.
O resultado encontrado é superior ao estudo realizado na Califórnia (EUA) aonde analisaram 804 amostras sangüíneas de cães hospitalizados e 342 amostras de cães não domiciliados, pela técnica de Inibição da Hemaglutinação, encontrando um percentual de soropositividade para anticorpos IgG de 14,00 % para os cães hospitalizados e 6,00 % dos cães de rua, respectivamente [3].
Em um estudo realizado, com a análise de 40 amostras sangüíneas de cães, no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia (MG), pelas técnicas de Inibição da Hemaglutinação, Imunofluorescência Indireta e ELISA, encontrou-se uma prevalência de 22,5 %, 35,0 % e 30,0 % de reatividade para anticorpos IgG, respectivamente, o que se aproxima dos resultados do presente estudo [4].
Em inquérito sorológico utilizando o método de Imunofluorescência Indireta com 1256 amostras séricas de cães oriundos do Centro de Controle de Zoonoses de São Paulo, foi constatada uma prevalência de 63,80 % de positividade para anticorpos IgG, sendo considerado o ponto de corte de 1:16[1], o que difere do resultado encontrado neste trabalho, porém deve-se  salientar  que dependendo das condições do habitat da espécie canina obter-se á  uma variabilidade na prevalência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii. 
Também utilizando a técnica de Imunofluorescência Indireta [2], foram analisadas 312 amostras séricas de cães provenientes do Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina (PR), encontrando uma prevalência de 23,40 % de animais sororeagentes, semelhante à  freqüência encontrada nesta pesquisa, entretanto com técnica diferente.
Não foram encontradas diferenças estatísticas significativas quanto ao sexo e idade dos animais analisados, constatando semelhança na suscetibilidade à infecção toxoplásmica em machos e fêmeas caninos. Do mesmo modo, pelo fato da área em estudo constituir-se em um foco de contaminação homogêneo, e de alto risco não só para toxoplasmose como também para outras zoonoses, não foram evidenciados fatores de risco com significância estatística entre os cães, porque todos estavam expostos ao mesmo tipo de contaminação.

4. CONCLUSÕES

A variabilidade da freqüência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, nas regiões brasileiras, referenciada em estudos publicados pode ser fortemente influenciada pelas condições de vida da espécie canina referentes aos hábitos alimentares, moradia, saneamento básico, contato com felinos, condições climáticas e educação preventiva de seus donos.
A técnica utilizada neste trabalho, embora eficiente, pode ser menos eficaz na detecção de anticorpos IgG anti-Toxoplasma quando comparada a pesquisas literárias utilizando o método de Imunofluorescência Indireta. Isso pode ser comprovado devido à pesquisa qualitativa para anticorpos IgG anti-Toxoplasma utilizada, ser padronizada pelo fabricante a partir da titulação 1:32 (reagente) enquanto que, no método de Imunofluorescência Indireta o ponto de corte é de 1:16 (reagente), indicando uma maior sensibilidade. Portanto, conclui-se que um maior número de animais estudados podem ser sororeagentes para Toxoplasma gondii e não terem sido detectados.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] ISHIZUKA, M. M; YASUDA, P. H. Incidência de infecção por Toxoplasma gondii em cães do município de São Paulo. Rev. Fac. Méd. Vet. Univ. S. Paulo, v. 10, n. 2, p. 161-165, 1981.
[2] NAVARRO, I. T. et al. Estudo Comparativo entre soro e plasma na pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pela técnica de imunofluorescência indireta em cães atendidos no hospital veterinário da Universidade Estadual de Londrina – PR, Sem. de Ciên. Agr., V. 18, n. 1, p. 15-21, 1997.
[3] RIEMANN, H. P. et al. The prevalence of antibodies against Toxoplasma gondii among hospitalized animals and stray dogs. Can. J. Comp. Med, v 42, p. 407-413, 1978.
[4] SILVA, D. AO. Detection of Toxoplasma gondii – specific Antibodies in Dogs. A Comparative Study of Immunoenzymatic, Immunofluorescent and Haemagglutination Titers. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, v 92(6), p. 785-789, 1997.
[5] VIDOTTO, O. Toxoplasmose: Epidemiologia e Importância da Doença na Saúde Animal. Sem. Ciênc. Agr. Londrina, v. 13, n. 1, p.69-75, 1992.