POTENCIAL MUTAGÊNICO DAS ÁGUAS DO CANAL SÃO GONÇALO, PELOTAS, RS

SÁ; Michele Ullrich de1; BENDER, Ana Elisa Nunes1; MARTINO-ROTH, Maria da Graça1; GARCIAS, Gilberto de Lima1.

1 Laboratório de Genética - Escola de Medicina - UCPel
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1.	INTRODUÇÃO

	Os ecossistemas aquáticos são para o homem, primordialmente recursos a serem utilizados com a finalidade de permitir a dessedentação, a higiene, a irrigação pastoril, a industrialização e o descarte de esgotos. Deve-se destacar que, para muitos desses usos, o homem, tem tomado medidas para obter água apropriada, especialmente para o seu consumo, fato que propiciou o estabelecimento de critérios e padrões que garantem, efetivamente, a qualidade da água apenas para os usos de interesse antrópicos [2].
A ação antropológica tem aumentado as oscilações dos ambientes aquáticos, permitindo a liberação indiscriminada de agentes poluidores, como agrotóxicos, efluentes industriais e municipais, substâncias eutrofizantes, etc.[1].
 	Muitos tipos de organismos são utilizados como sentinelas para se avaliar possíveis efeitos de riscos naturais ou de origem antropológica. Em ambientes aquáticos, moluscos, vermes bênticos, esponjas, anfíbios e peixes, têm sido utilizados como biomonitores de toxicidade de poluentes. Plantas particularmente a Allium cepa e Vicia faba, têm sido utilizadas para avaliação da poluição presente tanto na água quanto na atmosfera [6].
	Sabendo-se da grande importância dos recursos hídricos, não apenas sob o aspecto econômico, mas principalmente para manutenção da qualidade de vida biológica é que se torna indispensável o monitoramento desses recursos, avaliando-se os impactos gerados nesses ambientes. Diante disso, este estudo objetivou avaliar o nível genotóxico presente nas águas superficiais do Canal São Gonçalo, através da utilização do teste de Allium cepa.

2. MATERIAL E MÉTODOS

  A avaliação foi realizada nas estações do verão, outono e inverno, no curso do Canal São Gonçalo. As coletas das águas foram efetuadas em quatro locais ao longo do decurso, sendo eles: a Barragem Eclusa (Po1), o Canal Santa Bárbara (Po3), o Arroio Pelotas (Po5) e por fim a praia do Laranjal (Po7), tendo sido realizado um controle com água tratada (Po8). Através dessas amostras foi realizado o teste com Allium cepa, para verificação da mutagenicidade presente nessas águas, que consiste na colocação de bulbos de cebolas para germinação em contato com essa água em análise. Para cada ponto foram realizadas quatro repetições. As pontas das raízes obtidas (células meristemáticas), foram fixadas em Carnoy. Após a fixação os meristemas foram lavados em água destilada, hidrolisados com HCl 5N por 10 minutos à temperatura ambiente, posteriormente lavados em água destilada e corados com orceína acética.
A análise das células foi realizada em microscópio óptico comum, binocular, com objetiva de 100X e oculares de 10X. Foi avaliado o índice mitótico , as anomalias no ciclo mitótico: mitoses C (problemas no fuso), pontes anafásicas e telofásicas (cromossomos dicêntricos ou intertrocas, cromossomos ou fragmentos livres), assim como células com micronúcleos, binucleadas e com núcleos ligados (em 1.000 células). 
Os resultados obtidos foram armazenados em um banco de dados do programa SPSS “for windows”, versão 10.0 e analisados através do teste de Mann-Whitney U.

3.	RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados obtidos quanto ao número de anomalias mitóticas, interfásicas, gerais e índice mitótico analisados podem ser observados na Tabela 1:

Tabela 1- Média e desvio padrão do número de células em divisão, índice mitótico, anomalias do ciclo mitótico, anomalias interfásicas e total de anomalias, encontrados nos quatro pontos amostrados.
Pto	Céls. em divisão (X/DP)	Índice                          Mitótico	Anomalias Mitóticas (X/DP)	Anomalias Interfásicas (X/DP)	Total de Anomalias (X/DP)	
Po 1	125,6250± 58,4611	8,37	1,8750± 1,642a	29,00± 31,5685 b	30,8750± 32,6428 c	
Po 3	144,8750± 61,8303	9,66	1,2500± 1,035a d	10,3750± 7,909 b	11,6250± 8,3484 c	
Po 5	160,2500± 54,1183	10,68	2,3750± 1,407a d e	8,1250± 4,2908b	10,500± 5,3452 c	
Po 7	182,8750± 113,2083	12,19	1,5000± 1,069a e	12,3750± 8,9113 b	13,8750± 9,2804 c	
Po 8	157,2500± 25,8995	10,48	0,1250± 0,353 a	2,7500± 2,3755 b	2,8750± 2,2321c	
Dados analisados pelo teste de Mann-Whitney U.
a, b, c - p< 0,05  relação entre as anomalias dos pontos em comparação ao controle
d, e - p< 0,05 comparação entre os pontos

Os resultados analisados permitiram observar que todos os pontos mostraram um significativo aumento das anomalias mitóticas, interfásicas e gerais em comparação ao controle. Na comparação realizada entre os pontos foi possível observar que houve uma diferença significativa quanto às anomalias mitóticas encontradas entre os pontos 3 (Canal Santa Bárbara) e 5 (Arroio Pelotas)  e entre os pontos 5 e 7 (Barra do Laranjal), onde o ponto 5 mostrou uma maior incidência dessas anomalias em relação a todos os outros pontos. 
 Também foi possível observar que o ponto 1 (Barragem Eclusa) foi o que apresentou maior incidência de anomalias gerais, bem como uma redução do índice mitótico, o que demostra ser este o local de maior concentração de agentes genotóxicos, fato bastante grave, uma vez que é deste ponto que a cidade de Rio Grande faz captação suplementar de água para o abastecimento da cidade, e é este o local que futuramente suprirá o abastecimento de água para a cidade de Pelotas. 
	Sabe-se que a poluição da água é resultante principalmente pela introdução de materiais químicos, físicos e biológicos que diminuem a qualidade da água afetando os organismos que vivem nesse ambiente. O processo de monitoramento deve direcionar-se para avaliação de poluentes perigosos, como pesticidas, metais pesados e detergentes [4].
Estudos já comprovaram a eficiência do teste de Allium cepa para detecção de mutagênicos poluentes de água, devido a sua sensibilidade a danos clastogênicos [3]. Alguns estudos usando outros testes, como o de Ames, também são utilizados para detecção de agentes genotóxicos presentes em águas de rios [5]. Ainda como biomonitores muitos trabalhos tem utilizado os peixes como sentinelas para avaliação de prováveis substâncias tóxicas presentes no meio aquático [7]. 
Os resultados obtidos no presente estudo mostram a sensibilidade do teste de Allium cepa frente a agentes mutagênicos presentes nas águas do Canal Gonçalo, onde os pontos amostrados mostraram possuir um certo grau desses agentes em sua constituição.

4.	CONCLUSÕES

Foi possível verificar que embora o Canal São Gonçalo possua grande porte como recurso natural, devido à ação antropológica, já é detectável relevante presença de agentes genotóxicos em sua constituição, nos quatro pontos amostrados. O que permite inferir que esse ambiente aquático passa por um processo de degradação decorrente da elevada carga de efluentes despejados em seu leito. Demostrando que é preciso algumas iniciativas para manutenção deste recurso evitando assim seu comprometimento.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] ARAÚJO, E. J.A.; MORAIS, J. O. R.; SOUZA, P. R.; SABÓIA-MORAIS, S. M. T.; Efeito de poluentes químicos acumulativos e mutagênicos durante o desenvolvimento ontogenético de Poecilia vivípara, Acta Scientiarum, 2001, 23(2), p. 391-399.
[2] BERTOLETTI, E.; Ecotoxicologia aquática; Indicadores Ambientais: Conceitos e aplicações 2001, p.219-228.
[3] EL-SHAHABY, O. A.; MIGID, H. M. A.; SOLIMAN, M. I.; MASHALY, I. A.; Genotoxicity Screening of Industrial Wastewater Using the Allium cepa Chromossome Aberration Assay, Parkistan Journal of Biological Sciences, 2003, 6 (1), p.23-28.
[4] MORAIS, L. A.; Poluição dos Rios. Capturado em 18 de abril de 2005.  On line. Disponível na Internet: http://gold.br.inter.net/luisinfo/polution.html, 2002.
[5] NOBUKAWA, T.; SATOSHI, S.; Contributions of genotoxic precursors from tributary rivers and sewage effluents to the Yodo River in Japan, Water Research, 2002, 36, p. 989-995.
[6] SILVA, J.; HEUSER, V.; ANDRADE, V.; Biomonitoramento Ambiental, In: SILVA, J.; ERDTMANN, B.; HENRIQUES, J.A.P. (org) Genética Toxicológica, 2003, p. 166-180.
[7 VIGANO, L.; CAMOIRANO, A.; IZZOTI, A.; AGOSTINI, F. D.; POLESELLO, S.; FRANCISCI, C.; DE FLORA, S.; Mutagenicity of sediments along the Po River and genotoxicity biomarkes in fish from polluted areas, Mutation Research, 2002, 515, p. 125-134.