AVALIAÇÃO DE Lucilia eximia QUANTO AO SEU POTENCIAL COMO VETOR DE Escherichia coli

Armas, R. D.1*; Azevedo, R. R.2; Marini, P. 1; Camacho, N. N. 1; Krüger, R. 2; Ribeiro, G. A. 1

1 Laboratório de Microbiologia – DEMP – IB/UFPEL
2 Laboratório de Biologia de Insetos - DEMP – IB/UFPEL
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1. INTRODUÇÃO
 
As características ecológicas das moscas dão-lhes possibilidade para adquirir patógenos, durante as várias fases de sua vida. As larvas se desenvolvem nas carcaças em putrefação e em estrume, além de muitas espécies utilizarem bactérias como fonte protéica na sua alimentação, enquanto que os adultos se alimentam nos produtos em decomposição e participam da mesa do homem. Tais hábitos têm contribuído para a eficácia das moscas como vetores de doenças, transportando bactérias, externamente, na superfície do corpo, ou internamente, no aparelho digestivo. Desde o início do século, muitos trabalhos têm sido publicados acerca do papel das moscas como veiculadores de doenças entéricas, quer natural ou experimentalmente, bem como dos mecanismos envolvidos nessa transmissão, seja pela contaminação direta, seja pela infecção do inseto. Muitos pesquisadores têm demonstrado que o número e variedade de microrganismos transportados pela mosca na sua superfície ou conteúdo interno variam de acordo com as condições sanitárias dos locais em que estes insetos tenham sido capturados e também com as estações do ano [6]. Quanto ao local de captura, quanto maior for a diversidade de nichos que estas moscas visitam, maiores serão as possibilidades de contaminação deste inseto, bem como maior será a probabilidade de se infectar com mais variados tipos de bactérias. Lucilia eximia, um Calliphoridae, pertencente à subfamília Calliphorinae, se destaca, assim como os demais membros desta família, por depositarem seus ovos em carcaças em decomposição e suas larvas encontrarem-se inicialmente consumindo a proteína em decomposição de seu hospedeiro, de onde ingerem também os microrganismos. Esta mosca adaptou-se muito bem ao ambiente urbano, sendo freqüentemente encontrada em residências [1].  Estudos da microbiota externa e interna de moscas destacam a importância sanitária destes insetos como veiculadores de doenças, já que foi constatado o isolamento de Escherichia coli, tanto da superfície como do intestino de moscas coletadas em locais de manipulação de alimentos. Desta forma cabe salientar que o simples contato desses insetos com a superfície de locais onde serão preparados os alimentos, bem como com a própria matéria-prima já seriam suficientes para a transmissão do patógeno, não sendo necessária a regurgitação ou eliminação de seu material intestinal para que ocorra a contaminação [7]. 
Freqüentemente vem se buscando, cada vez mais, aumentar os níveis de segurança alimentar, tomando-se maiores cuidados com os possíveis focos de contaminação de alimentos, dentre estes, a matéria-prima, utensílios, manipuladores de alimentos, locais de armazenamento, dentre outros. Porém, os insetos podem ser considerados importantes membros desta cadeia de controle, visto que são vetores em potencial de microrganismos de importância em alimentos, sendo mais um foco a ser considerado e devidamente controlado.
Sendo assim, o objetivo deste trabalho é comprovar o potencial de             Lucilia eximia como vetor de Escherichia coli.

2. MATERIAL E MÉTODOS

Foram analisadas 50 amostras de mosca da espécie Lucilia eximia, destas         42 fêmeas e 8 machos, no período de setembro de 2003 a fevereiro de 2004, sendo que a cada mês foram capturadas e analisadas 10 amostras. As moscas foram capturas no Campus da Universidade Federal de Pelotas, sendo as iscas das armadilhas colocadas apenas uma vez por mês, no dia da coleta dos insetos. No laboratório de Biologia de Insetos era feita a triagem das espécies capturadas, separados os exemplares de L. eximia, realizada a sexagem e encaminhados para o Laboratório de Microbiologia para posterior análise microbiológica. Esta etapa consistiu basicamente de um pré-enriquecimento em Caldo Lactosado (CL) (figura 01), seguida da semeadura em Ágar MacConkey e posterior realização de provas bioquímicas para confirmação de Escherichia coli [8].  

                                                                     

B

A

D

C

Figura 01 – A)  a esquerda o tubo com a amostra e a direita tubo contendo Caldo Lactosado;           B) transferência da amostra para o tubo com meio de cultura; C) tubo de CL com a amostra já no seu interior; D) tubo controle, a esquerda, e a direita um tubo de CL após 48 horas de incubação a 36°C.

3 – RESULTADOS E DISCUSSÃO

Das 50 amostras analisadas 12 apresentaram Escherichia coli, o que totaliza uma freqüência de 24%. Pode-se observar uma freqüência variável de isolamento nos diferentes meses, pois apenas em novembro obteve-se 7 isolados e em janeiro 5 isolados de E. coli. Estas variações podem ter relação com as oscilações de temperatura destes períodos, o que poderia vir a favorecer o desenvolvimento de outros microrganismos, criando-se um ambiente de maior competição, o que dificultaria o crescimento de E. coli. A variação de temperatura e o crescimento bacteriano podem ser melhor observados no gráfico 01.

Gráfico 01 – Relação entre a temperatura e o crescimento de        E. coli.

Outro aspecto que cabe salientar é a prevalência de fêmeas com contaminação bacteriana, enquanto os machos não apresentaram nenhum resultado positivo. Este fato pode ser explicado pelo hábito de vida destes insetos, visto que as fêmeas percorrem áreas maiores do que os machos na busca de alimento, são consideradas mais ativas, o que aumenta a possibilidade de contaminação das mesmas, ou mesmo pelos machos produzirem, em maior quantidade, alguma substância bactericida, pois, conforme estudos realizados no intestino de larvas e pupas de moscas ficou evidenciada a produção de uma substância com esta atividade [4].
A incidência de E. coli (24%), está intimamente relacionada ao fato destas moscas entrarem em contato com material fecal, durante seu desenvolvimento, na transição das fases de ovo para pupa, por terem se estabelecido em material fecal, bem como durante a busca por alimento terem entrado em contato com material de origem fecal. Foi encontrada E. coli em 38,15% dos lotes de moscas analisadas em Curitiba, em locais com diferentes condições de saneamento, com variações, por local, entre 21,21% e 53,85%, sendo obtida uma maior porcentagem em locais onde havia menores condições de saneamento básico [6].
Estudando a incidência de enterobactérias em Musca domestica coletadas em abatedouros em Curitiba – PR, foi isolado E. coli em 100% das amostras [5] e em moscas do gênero Chrysomya coletadas de bancas de pescado, este microrganismo foi encontrado em 13 das 16 amostras analisadas [4]. Também foram coletadas amostras em mercados de frutas e vegetais onde em 80% dos exemplares coletados encontrou-se E. coli [2]. Como se pode observar pelos trabalhos descritos acima, uma vez que a mosca possua este patógeno na sua microbiota, seu potencial para transmissão é muito elevado.
Quanto às variações de temperatura, pode-se observar que E. coli, uma bactéria mesófila, obteve seu melhor nível de desenvolvimento em temperatura que oscilava entre 20 e 24ºC, sendo que em temperaturas inferiores a 20ºC e superiores a 25ºC não obteve-se crescimento desta bactéria, porém favoreceu o crescimento de outros microrganismos, limitando o desenvolvimento de E. coli, possivelmente por antibiose microbiana.

4. CONCLUSÕES

A partir das análises realizadas durante este experimento, foi possível concluir que insetos podem veicular bactérias e assim contaminar alimentos em estabelecimentos que produzem ou comercializam os mesmos. Desta forma, não apenas a matéria-prima, as condições higiênico-sanitárias dos utensílios e do manipulador podem ser considerados pontos críticos quanto a possíveis contaminações dos alimentos, porém insetos e neste caso específico, Lucilia eximia, podem ser considerados vetores em potencial de bactérias patogênicas. Da mesma forma que esta espécie de mosca apresentou este potencial, outros insetos também podem possuir esta característica, o que determina a importância da realização de novos trabalhos nesta área, visando buscar formas de controle para uma maior segurança alimentar.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] CARVALHO, C. J. B. & RIBEIRO, P. B. Chave de Identificação das espécies de Callphoridae (Díptera) do sul do Brasil. Rev. Bras. Parasitol., Vet., 2000, 9, 2,       169-173. 
[2] CHOW, C. Y. The common blue-bottle fly, Chrysomya megacephala, as a carrier of pathogenic bacteria in Peiping, China. Chin. Med. Jour., 1940, 57:145–153.
[3] DUNCAN, J. T. On a bactercidal principle present in the alimentary canal of the insects and arachnids. Parasitology, 1926, 18: 238-252.
[4] FURLANETTO, S. M. P.; CAMPOS, M. L. C.; HÁRSI, C. M. Microrganismos enteropatogênicos em moscas africanas pertencentes ao gênero Chrysomya (Díptera, Calliphoridae), no Brasil. Rev Microbiol., 1984, 15 (3): 170–174.
[5] IMBIRA, A. Incidência de enterobactérias encontradas em ,lotes de moscas, em abatedouros de Curitiba – Paraná e arredores. Arq. Biol. Tecnol. (Curitiba), 1979, 22 (2):197–205.
[6] LIMA, M. L. P. S. Espécies Exóticas de Chrysomya, Robineau-Desvoidy, I830 (Díptera Calliphoridae) como Veiculadoras de Enterobactérias Patogênicas, em Curitiba, Paraná, Brasil. Tese para obtenção do título de Mestre em Ciências Biológicas na Universidade Federal do Paraná, 1989, 95 p.
[7] PAZ, G. C. de la. The bacterial flora of flies caught in foodstores in the city of Manila. Monthly. Bull. Bureau Health., 1938, nº 18, p. 1-20.
[8] SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A.; SILVEIRA, N. F. A. Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos. São Paulo, Livraria Varela, 1997, 295 p.