LEVANTAMENTO MICROBIOLÓGICO DO “LAGO DOS ÔNIBUS” DO CAMPUS DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTAS

Lima, M. C. 1 *; Cattelan, L. V. 1; Gameiro, P. H. 1; Ribeiro, G. A. 1 & Alt, C. C. 2

1 Laboratório de Microbiologia – DMP – IB / UFPEL
2 Laboratório de Ecologia – DZG -  IB / UFPEL
Campus Universitário  – Caixa Postal 354 – Pelotas / RS - CEP 96010-900
* milenelima@universiabrasil.net

1.	INTRODUÇÃO
A determinação de presença de coliformes totais e termotolerantes em água é importante para o conhecimento das condições higiênico-sanitárias, caracterizando-a como viável ou não ao consumo humano [2, 13]. Considerando que os custos do controle de poluição podem ser melhor adequados quando os níveis de qualidade exigidos, para determinados corpos de água, estão de acordo com os usos que se pretende dar aos mesmos, a classificação das águas passa a ser essencial à defesa de seus níveis de qualidade [7]. Muitas vezes a presença de microrganismos patogênicos na água é decorrente da poluição por fezes humanas e de animais, provenientes de águas residuárias urbanas e rurais [3]. Desse modo, a presença desses microrganismos na água constitui um indicador de poluição fecal, principalmente os originários do homem e de animais de sangue quente [3]. A contagem dos chamados coliformes totais corresponde ao total de microrganismos "gram negativos" encontrados em uma amostra [5]. Este grupo de coliformes é constituído por bactérias pertencentes à família Enterobacteriaceae, caracterizadas como bacilos gram negativos, mesófilos, não esporulados e com alta capacidade de degradar a lactose [1, 4, 6]. Os coliformes totais são constituídos por Escherichia coli, Enterobacter spp., Citrobacter spp. e Klebsiela spp.  [1, 9]. A primeira espécie descrita anteriormente é habitante exclusiva do trato intestinal de animais de sangue quente, enquanto os demais gêneros podem sobreviver tanto no trato intestinal como no meio ambiente [9]. Baseado nesta característica é que atualmente a Vigilância Sanitária não considera confiável a identificação de coliformes totais (Enterobacter spp., Citrobacter spp. e Klebsiela spp) em alimentos, visto que a presença destes microrganismos não pode ser caracterizada como uma contaminação provinda unicamente de fezes de animais de sangue quente [9]. Já os coliformes termotolerantes indicam os microrganismos oriundos de excretas humanos ou animais e são capazes de se desenvolver e fermentar a lactose em 24 horas a 44-45°C, pois a Escherichia coli, microrganismo encontrado neste grupo, é um coliforme termotolerante (sobrevive a temperaturas altas entre 40°C-60°C) [4, 5, 8, 10]. Quando presentes em alimentos, indicam contaminação proveniente de fezes dos animais que os hospedam, sendo este indicativo de contaminação recente, pois a E. coli não sobrevive por muito tempo fora do trato intestinal de animais [11, 12]. O objetivo deste trabalho é realizar um levantamento microbiológico do “lago dos ônibus” do campus da Universidade Federal de Pelotas / UFPEL.	
2. MATERIAL E MÉTODOS

As amostras coletadas foram encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia do Departamento de Microbiologia e Parasitologia, do Instituto de Biologia da Universidade Federal de Pelotas / UFPEL. A coleta de água foi feita à cerca de (20 cm) da superfície do lago em três pontos determinados (Figura 01), utilizando-se 3 vidros estéreis, um por ponto, sendo coletada 100 ml de água aproximadamente por vidro. Após, foram feitas 5 diluições decimais (10 0, 10 -1, 10 -2, 10 -3 e 10 -4) em água peptonada 0,1%. Após, transferiu-se 1 ml de cada diluição para a primeira série de três tubos contendo 9 ml de caldo lactosado (teste presuntivo) e incubou-se a 36°C por 48 horas. A seguir, dos tubos positivos (observação de turbidez e presença de gás) transferiu-se duas alçadas para o meio caldo lactosado bile verde brilhante - CLBVB (utilizado para o diagnóstico de coliformes totais) e duas alçadas para o caldo EC (utilizado para o diagnóstico de coliformes termotolerantes) e estes foram incubados a 360C e 44,50C, respectivamente, por 48 horas. Dos tubos positivos para CLBVB fez-se à leitura de coliformes totais e para caldo EC fez-se à leitura de coliformes termotolerantes, com base na tabela do NMP (Número Mais Provável) [10, 11].

Figura 01 – Pontos determinados no “lago dos ônibus” do campus da Universidade Federal de Pelotas.

                

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3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A Tabela 01 apresenta os resultados do NMP de coliformes totais e termotolerantes realizados através da água do lago.

Tabela 01. Contagem de Coliformes Totais e Termotolerantes (NMP/100ml)
Ponto 	Coliformes Totais
 (NMP/100ml)*	Coliformes Termotolerantes (NMP/100ml)*	
01	1,5	< 0,3	
02	7,5	0,4	
03	0,9	0,9	
* NMP / 100 ml: Número Mais Provável em cem mililitros de água.

No ponto 01 foi obtida uma baixa contagem de coliformes totais e termotolerantes (1,5 NMP/100ml e < 0,3 NMP/100ml, respectivamente) em relação à contagem de coliformes dos outros pontos, acreditando-se não haver grande acúmulo de microrganismos devido a pouca circulação de água neste ponto.
No ponto 02 foi obtida a mais alta contagem de coliformes totais (7,5 NMP/100ml) neste levantamento. Este resultado é explicado pela possível movimentação da água deste ambiente límnico levando os microrganismos para este ponto, o qual encontra-se próximo ao local de escoamento do lago. 
No ponto 03 foi obtida uma contagem de coliformes termotolerantes de 0,9 NMP/100ml, o mesmo que coliformes totais, indicando possivelmente que os coliformes totais estão representados pelos termotolerantes. Este resultado foi observado devido a possível presença de coliformes trazidos pela água rica em matéria orgânica oriunda dos esgotos pluviais provenientes do Instituto de Física e Matemática – IFM, localizado próximo deste ponto.

4. CONCLUSÕES

     Considerando a Resolução n° 20 de 18 de junho de 1986, o índice de coliformes termotolerantes e totais nas três amostras analisadas do lago encontra-se enquadrado na Classe 1, abrangendo o abastecimento doméstico após o tratamento simplificado, a proteção das comunidades aquáticas, a recreação de contato primário (natação, esqui aquático e mergulho), a irrigação de hortaliças e a criação natural e/ou intensiva (aqüicultura) de espécies destinadas à alimentação humana. Segundo a balneabilidade, em relação à Resolução n° 274 de 29 de novembro de 2000, a recreação de contato primário encontra-se classificada na categoria excelente, apresentando no máximo 250 coliformes termotolerantes ou 400 E. coli ou 50 enterococos por 100 mililitros. Portanto, se for utilizado de acordo com a sua classificação, não oferece risco à saúde humana e aos animais presentes neste local. 
5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] ALVES, N. C., ODORIZZI, A. C. & GOULART, F. C. Análise microbiológica de águas minerais e de água potável de abastecimento, Marília, SP. Rev. Saúde Pública, dez. 2002, vol.36, n°. 6, p.749-751. ISSN 0034-8910.
[2] AMARAL, L. A.; NADER FILHO, A, ISA, H et al. Qualidade Higiênico-Sanitária e Demanda de Cloro da Água de Dessedentação de Galinhas de Postura Coletadas em Bebedouros Tipo Nipple e Taça. Rev. Bras. Cienc. Avic., set./dez. 2001, vol.3, n°.3, p.249-255. ISSN 1516-635X.
[3] AMARAL, L. A.; ROSSI, J., OSWALDO D., NADER F. et al. Avaliação da qualidade higiênico-sanitária da água de poços rasos localizados em uma área urbana: utilização de colifagos em comparação com indicadores bacterianos de poluição fecal. Rev. Saúde Pública, out. 1994, vol.28, n°. 5, p.345-348. ISSN 0034-8910.
[4] OLIVEIRA, A. C. S. & TERRA, A. P. S. Avaliação microbiológica das águas dos bebedouros do Campus I da Faculdade de Medicina do Triângulo Mineiro, em relação à presença de coliformes totais e fecais. Rev. Soc. Bras. Med. Trop., maio/jun. 2004, vol.37, n°.3, p.285-286. ISSN 0037-8682.
[5] PÁDUA, H. B.   Coliformes Totais e Fecais na Aqüicultura. Disponível em: <http://www.setorpesqueiro.com.br/aquicultura/helcias/coliformes.asp>. Acesso: 07 de Agosto de 2004.
[6] PELCZAR Jr., M. J.; CHAN, E. C. S. & KRIEG, N. R. Microbiologia: Conceitos e Aplicações. São Paulo: Editora MAKROM Books Ltda., 1996. Vol. 2. 2ª ed. pg. 374 a 459. 
[7] Resolução CONAMA Nº 20, de 18 de junho de 1986. Disponível em: <http://www.mma.gov.br/port/conama/res/res86/res2086.html>. Acesso em: 09 de agosto de 2004.
[8]  Resolução    CONAMA   Nº 274,  de   29   de novembro de  2000.  Disponível em:
<http://www.mma.gov.br/port/conama/res/res00/res27400.html>. Acesso em: 15 de agosto de 2004.
[9] ROITMAN, I.; AZEVEDO, J. L. & TRAVASSOS, L. R. Tratado de Microbiologia. São Paulo: Editora Manole Ltda., 1987. Vol. 1. pg. 15 a 52 - 172 a 175.
[10] SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A. & SILVEIRA, N. F. A. Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos. São Paulo: Editora Livraria Varela, 1997. Pg. 21 a 29.
[11] SIQUEIRA, R. S. Manual de Microbiologia de Alimentos. Brasília: Editora ACQA - CTAA, 1995. Pg. 53 a 55.
[12] SOUZA, L. C., LARIA, S. T. & PAIM, G. V. Salmonelas e coliformes fecais em águas de bebida para animais. Rev. Saúde Pública, out. 1992, vol.26, n°. 5, p.321-327. ISSN 0034-8910.
[13] VALIAS, P. G. S. & SILVA, E. N. Estudo Comparativo de Sistemas de Bebedouros na Qualidade Microbiológica da Água Consumida por Frangos de Corte. Rev. Bras. Cienc. Avic, jan./abr. 2001, vol.3, n°.1, p.83-89. ISSN 1516-635X.