SOROPREVALÊNCIA DO VÍRUS HERPES SIMPLEX TIPO-2 EM POPULAÇÃO DE JOVENS DO GÊNERO MASCULINO COM IDADE SEXUALMENTE ATIVA EM PELOTAS/RS
Entiauspe, L. G.1*; Soares, C. L.1; Redies, C. R.1; Post, P. R1.
1Laboratório de Virologia – DMP – IB/UFPEL
Campus Universitário – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900
* luddy21@terra.com.br

1.	INTRODUÇÃO

O vírus Herpes Simplex (HSV) é um patógeno humano comum encontrado em todo o mundo o qual produz uma variedade de doenças. O HSV infecta recém nascidos, crianças e adultos, e pela quarta década, mais de 90% da população adulta demonstrou anticorpos para HSV [1].  A transmissão do HSV pode ser resultado do contato direto com secreções infectadas de um hospedeiro sintomático ou assintomático.
O vírus Herpes Simplex foi caracterizado dentro de dois sorotipos distintos: HSV Tipo 1 (HSV-1) e HSV Tipo 2 (HSV-2). HSV-1 é primariamente associado à infecção na língua, boca, lábios, faringe e olhos, enquanto que o HSV-2 está associado com infecções genitais e neonatais.
Infecções primárias de HSV-2, geralmente adquiridas através de contato sexual, são raramente encontradas antes do inicio da atividade sexual. Quando a infecção primária por HSV-2 é clínica, a apresentação clássica é a herpes genital, uma infecção caracterizada por lesões distribuídas bilateralmente na área genital, muitas vezes acompanhada por febre, linfoadenopatia inguinal e disúria. Infecções por HSV-2 causam aproximadamente 85% dos casos sintomáticos de HSV genital primária, com infecções por HSV-1 causando o restante [5].
Uma das conseqüências mais sérias da herpes genital é a herpes em recém nascidos [5]. Sem terapia, a mortalidade para crianças não tratadas que desenvolvem a infecção disseminada excede 70% [5-3], com metade dos sobreviventes desenvolvendo danos neurológicos [3]. Quase todas as infecções por HSV-2 nos recém nascidos são adquiridas durante a passagem por um canal de parto infectado [2]. A maioria das mães (70%) que transmitem HSV para seus filhos são assintomáticas no momento do parto [6].
Um estudo realizado nos Estados Unidos mostrou que a maioria dos jovens sexualmente ativos com úlceras genitais são soropositivos para HSV [2]. Muitos casos de herpes genital são causados por indivíduos que não sabem que estão infectados ou não reconhecem sintomas sutis e atípicos. O Centro de Controle e Prevenção de Doenças (CDC) declara que o aconselhamento é um aspecto importante no controle de pacientes que tenham herpes genital [2].
Diante do exposto, objetivou-se analisar a soroprevalência de anticorpos para o vírus Herpes Simplex tipo 2 (HSV- 2) de 91 amostras sorológicas de indivíduos do gênero masculino entre 18 e 19 anos de idade na cidade de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

Foram utilizadas 91 amostras sorológicas de indivíduos do gênero masculino entre 18 e 19 anos de idade, na cidade de Pelotas-RS. As amostras coletadas foram encaminhadas ao Laboratório de Virologia, estando estas acondicionadas em caixas isotérmicas contendo gelo, até o momento da análise.
Para a detecção dos anticorpos IgG para o HSV-2 foi realizado o ensaio imunoenzimático (ELISA), utilizando-se antígenos recombinantes purificados gG2 tipo-específico imobilizados em microcavidades de poliestireno. Para que a metodologia de análise fosse empregada, era necessário que todos os reagentes atingissem a temperatura ambiente antes do uso. Foi feito o preenchimento das cavidades utilizando para isto o Tampão de lavagem 1X, e deixado em repouso durante 5 minutos. Decorrido este tempo, o líquido contido nas cavidades foi aspirado e o excesso retirado. Foi dispendido 100mL de Diluente de amostra no branco e 100mL de cada amostra diluída. As amostras tiveram suas localizações respectivamente registradas em um mapa da reação, assim como o branco e o controle. A placas foram então seladas e incubadas durante 60 minutos à temperatura ambiente (20 a 25ºC). Após este período, o conteúdo foi descartado. As cavidades foram novamente preenchidas com o Tampão de lavagem 1X e depois esvaziadas em um descarte adequado, repetindo este processo por mais duas vezes. A partir desta lavagem, foi adicionado 100mL de Conjugado em todas as cavidades, utilizando uma pipeta multicanal de 12 canais. A placa foi então incubada por 30 minutos, passando novamente pelo processo de lavagem, repetido por 3 vezes. Após, foi adicionado 100mL de Substrato em todas as cavidades da placa, e incubado por 10 minutos, tempo este contado a partir da adição na primeira cavidade. A reação foi cessada com a adição de 100mL de Solução de Bloqueio em todas as cavidades, utilizando a mesma seqüência em que foi adicionado o substrato. O fundo externo da placa foi limpo com o auxílio de papel toalha, com a finalidade de evitar a interferência na leitura. Uma hora após a adição do ácido, a placa foi encaminhada ao espectrofotômetro, onde a absorbância foi lida em um comprimento de onda de 450nm, tendo o aparelho sido zerado com o branco. Após a leitura de absorbância no espectrofotômetro, foi realizada a interpretação dos resultados, onde o resultado das amostras é relatado como Valor índice (VI), no qual a densidade óptica das amostras é dividida pela média de absorbância dos calibradores cut-off. 

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A Tabela 1 apresenta os resultados do exame de soroprevalência para HSV-2 obtidos através do teste de ensaio imunoenzimático.

Tabela 1. Resultados do exame de soroprevalência para HSV-2 obtidos através do ensaio imunoenzimático.

HSV-2	Número de amostras	Percentagem (%)	
Não reagente	88	96,7	
Reagente	2	2,2	
Indeterminado	1	1,1	
Total	91	100,0	

Das 91 amostras sorológicas examinadas, 96,7% obtiveram resultado não reagente para o vírus Herpes Simplex Tipo 2, 2,2% obtiveram resultado reagente e 1,1 apresentou resultado indeterminado, o qual ocorre quando o VI ≥ 0,80 mas ≤ 1,20. É necessário que se faça a coleta de uma nova amostra após algumas semanas com a finalidade de identificar um aumento dos níveis de IgG. Se na segunda amostra os resultados permanecerem como indeterminados ou negativos, deve-se relatar o resultado como negativo.
Resultados negativos não descartam o diagnóstico da doença por herpes simples. O tempo necessário para a soroconversão após a infecção primária varia de acordo com o indivíduo, as amostras podem ter sido colhidas antes do aparecimento de anticorpos detectáveis. Resultados negativos em pacientes com suspeita de doença recente por herpes simples devem ser repetidos de 4 a 6 semanas.
Os resultados positivos somente indicam uma exposição prévia, pois os níveis da resposta ou a classe de anticorpo não devem ser usados para determinar a infecção ativa ou fase da doença.
Podem ocorrer falso-negativo, geralmente quando o vírus infectante é deficiente da proteína gG ou porque não se sabe se o antígeno do ensaio foi glicosilado da mesma maneira que as células mamíferas. Um estudo relatou que 0,2% dos HSV-2 isolados eram deficientes da proteína gG [4].

4. CONCLUSÕES

Foram constatadas em 2 amostras a presença de HSV-2 das 91 amostras analisadas, verificando-se que a presença de HSV-2 é de 2-3% em grupo idêntico.

5.	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] AURELIAN, L. G. Herpes Simplex Viruses. Clinical Virology Manual. Second ed. Elviser, New York, 1992, p. 473-497.
[2] CONTROL OF DISEASES CENTER. Guidelines for Treatment of Sexually Transmitted Diseases. 40, 1998.
[3] FIELDS, B.; KNIPE, D.; HOWLEY, P. Herpes Simplex Viruses. Fields Virology. Philadelphia. 1996.
[4] LILJEQVIST. Typing of Clinical Herpes Simplex Virus Type 1 and Type 2 Isolates with Monoclonal Antibodies. Journal of Clinical Microbiology. 37, p. 2718-2727, 1999.
[5] MURRAY, P.; BARON, E.; PFALLER, M.; TENOVER, F.; YOLKNET, R. Herpes Simplex Viruses. Manual of Clinical Microbiology. Washington, D.C. 1995, p. 876-883.
[6] WHITNEY, R.; NAHMIAS, A.; VISTINE, A.; FLEMING, C.; ALFORD, C. Natural History of Herpes Simplex Virus Infection of Mother and Newborn. Pediatrics, 1980, 66, p. 489-494.