Viabilidade do pólen de espécies silvestres de Rubus ocorrentes no Rio Grande do Sul 
 
Maia, M.B.1*; Barbieri, R. L.2; Raseira, M.C.B.2 e Heiden, G.3

1Estudante de mestrado PPGA-UFPel, Bolsista CNPq, Endereço: Embrapa Clima Temperado BR 392 km 78, Caixa Postal 403, Pelotas, RS, mel@ufpel.tche.br; 2Pesquisadora da Embrapa Clima Temperado, RS; 3 Acadêmico de Ciências Biológicas-UFPel, Bolsista PIBIC-CNPq Embrapa Clima Temperado 

INTRODUÇÃO
O gênero Rubus é cosmopolita e taxonomicamente complexo, apresentando 12 subgêneros. Os dois maiores subgêneros e os mais importantes economicamente são Eubatus (amoras / blackberries) e Idaeobatus (framboesas / raspberries). Existem mais de 1000 espécies de Eubatus [2], porém alguns autores chegam a admitir cerca de 3000 [4]. A maioria das espécies é nativa de regiões frias e regiões temperadas do Hemisfério Norte, porém algumas são encontradas nos trópicos e no Hemisfério Sul. Existem algumas espécies dióicas, mas a  maioria das espécies de Rubus é monóica. A polinização por insetos é comum e os polinizadores têm sido identificados em algumas espécies. As flores de Rubus produzem alta quantidade de néctar, atrativo aos insetos [2]. 
A fertilização ocorre um dia após a polinização e o pólen pode ser coletado e estocado para ser usado posteriormente. A manutenção da viabilidade do pólen durante a estocagem varia de acordo com a temperatura e umidade do local onde o mesmo será armazenado[3].
É freqüente a ocorrência de espécies silvestres de amora, nas regiões brasileiras de clima temperado, com características muito diversas entre si, desde a coloração do fruto até o seu tamanho e sabor (figura 1) [1]. Geralmente são arbustos robustos com ramos secundários apoiantes, de porte ereto a rasteiro, com hastes recobertas por espinhos, folhas grandes e florescimento em quase todos os meses do ano.  Reitz [4], relata que no Brasil ocorrem cinco espécies nativas de Rubus: R. urticaefolius (amora preta), R. erythroclados (amora rosa), R. sellowii (amora vermelha), R.imperialis (amora branca) e R. brasiliensis (amora branca) que apresentam larga e expressiva dispersão pelo sul do Brasil.
A framboesa-silvestre (R. rosaefolius J. E. Smith), também ocorrente no sul do Brasil, é um arbusto exótico originário da Ásia, armado, ereto, com ramos secundários apoiantes ou prostrados, cobertos de acúleos e com folhas compostas pinadas, que floresce e frutifica em todas as estações do ano, com grande produtividade de frutos de sabor doce e levemente ácidos, ocasionalmente comercializados e utilizados para a produção de sobremesas, caldas, doces em compotas, geléias, vinhos e licores [4]. É uma planta ruderal (espécie cuja existência depende da presença humana próxima), de distribuição cosmopolita. Embora seja uma espécie exótica e de ocorrência espontânea, pode representar um recurso genético importante em programas de melhoramento de framboesa cultivada, principalmente como fonte de genes para tolerância a estresses bióticos e abióticos. 
As espécies de Rubus apresentam grande versatilidade na forma de reprodução, sendo o grau de esterilidade relacionado ao nível de ploidia. As informações referentes a citogenética destas espécies são poucas. Germoplasma das espécies nativas é mantido no Banco Ativo de Germoplasma (BAG) de Fruteira Nativas da Embrapa Clima Temperado (Pelotas/RS). 
Tendo em vista o uso em programas de melhoramento genético e a necessidade de conhecer melhor as características citogenéticas e a viabilidade do pólen,  este trabalho teve por objetivo determinar a fertilidade do pólen das seguintes espécies: R. brasiliensis, R. imperialis, R. urticaefolius e R. rosaefolius. 

MATERIAL E MÉTODOS
O uso de corantes é o método mais rápido e geralmente usado para verificar a viabilidade do pólen [5]. Para a análise da viabilidade do pólen destas espécies, foram utilizadas plantas coletadas no município de Farroupilha/RS e mantidas no BAG da Embrapa Clima Temperado. Foram usadas as técnicas para observação da viabilidade de pólen em botões florais (Figura 2) com as devidas alterações e adaptações às espécies em estudo. 
Os botões florais das quatro espécies foram coletados e fixados em solução de álcool acético 3:1 (álcool etílico: ácido acético) por 24 horas. As lâminas foram preparadas pela técnica de esmagamento de anteras em carmim propiônico 1%. Foram avaliados 500 grãos-de-pólen por lâmina em três repetições, totalizando 1500 grãos-de-pólen por espécie.

RESULTADOS E DISCUSSÃO
Para a realização de cruzamentos interespecíficos nos programas de melhoramento genético vegetal é importante que o pólen a ser utilizado tenha alta viabilidade. A freqüência de grãos de pólen foi avaliada em R. imperialis, R. brasiliensis, R.urticaefolius e R. rosaefolius, sendo que as quatro espécies apresentaram reduzida esterilidade. Sob coloração de carmim propiônico a média de grãos-de-pólen viáveis para as três repetições em cada espécie foi  75,6% para R. imperialis, 83,4% para R. brasiliensis, 78,2% para R. urticaefolius e 80,7% para R. rosaefolius (Figura 3). Apesar deste método superestimar esta viabilidade, pois, muitas vezes, grãos de pólen inviáveis podem ainda corar, por possuir quantidades suficientes de enzimas, amido ou outras substâncias [5], estas médias podem ser consideradas elevadas.

CONCLUSÃO
As espécies R. imperialis, R. brasiliensis, R.urticaefolius e R. rosaefolius apresentaram elevada fertilidade do pólen, superior a 75%. 

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] Embrapa. Centro Nacional de pesquisa Uva e Vinho. Disponível em http:// www.canais peqfrutos.pdf /cnpuv / 2003 acessado em 17/07/2003.

[2] Jennings, D.L. Raspberries and blackberries: their breeding, diseases and growth. New York: Academic Press. 299p., 1988.

[3] Nybom, H. Pollen viability assessments in blackberries (Rubus). Plant Systematics and evolution, volume 50 p. 281 – 290,1985.

[4] Reitz, R. & Klein, R.M. Flora Ilustrada Catarinense – Rosáceas. Herbário Barbosa Rodrigues: Itajaí, 1996. 135 p.

[5] Galletta, G.J. Pollen and seed management. In: Moore, J.N. e Janick, J. (Ed). Methods in Fruit Breeding. Indiana: Purdue University Press, 1983. p.23 - 47.