EFEITO DO HERBICIDA CLOMAZONE NOS PARÂMETROS HEMATOLÓGICOS (SÉRIE ERITROCITÁRIA) DE ALEVINOS DE JUNDIÁ (Rhamdia sp.)
 
Hunhoff, A.”1”; Timm, G.* “1”; Pouey, J. L. “2”; Camargo, S. “3”; Vaz, B. S.”4”; 
1 Bolsista de Iniciação Científica. Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel (FAEM), Departamento de Zootecnia.
2 Médico Veterinário, Prof. Adjunto. Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel (FAEM), Departamento de Zootecnia
3 Médica Veterinária. Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel (FAEM), Departamento de Zootecnia
4 Doutorando em Zootecnia. Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel (FAEM), Departamento de Zootecnia.

Introdução
Cerca de 95% dos produtos químicos utilizados no cultivo de arroz irrigado são herbicidas, sendo o clomazone largamente utilizado na região sul do Rio Grande do Sul. Através dos canais de drenagem das lavouras, os resíduos de herbicidas podem vir a contaminar afluentes vizinhos, comprometendo o ecossistema aquático, bem como expondo os organismos à possíveis alterações morfológicas, histológicas,  bioquímicas e hematológicas.
O estudo das células sangüíneas é de fundamental importância na avaliação da condição fisiológica dos peixes, pois pode haver uma variação morfológica e quantitativa dos elementos sangüíneos frente a condições endógenas, como: peso e comprimento [8], estado nutricional [9] e doenças [6]; ou frente a condições exógenas, como: ciclo sazonal [5], estresse [2] e habitat [11]. 
Torres et al. (1986) estudando o estresse em peixes, observaram que ocorre uma variação na estrutura, no número e nas características dos elementos sangüíneos: capacidade de mudança de morfologia dos eritrócitos, percentual do hematócrito e concentração de hemoglobina, dependendo do tipo de estresse sofrido, sendo que os dois últimos são indicadores clássicos de estresse [4].
Dentre as espécies locais de água doce e de interesse comercial destaca-se o jundiá (Rhamdia sp.), devido a sua rusticidade e facilidade de manejo. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações do herbicida clomazone nos parâmetros hematológicos (série eritrocitária) do jundiá (Rhamdia sp.).

Material e Métodos
O trabalho foi realizado no laboratório de Ictiologia da UFPel. Foram utilizados 60 alevinos de jundiá, com peso médio de 8,69g e comprimento padrão médio de 8,19cm. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 12 aquários contendo 45l de água, adicionada de 3g de NaCl/l. Cada aquário recebeu as seguintes concentrações do herbicida clomazone: 0; 0,1; 1 e 10% da concentração letal média (CL50= 500mg/l).
Os animais foram alimentados com ração comercial (36% PB) ad libidum e os parâmetros de qualidade de água (temperatura, pH, oxigênio dissolvido e condutividade) foram monitorados diariamente. A renovação de 50% da água foi feita diariamente, mantendo-se as diferentes concentrações do herbicida. O experimento teve duração de 53 dias, tendo amostragens aos 5, 10, 40 e 53 dias.
Para a realização da coleta de sangue, os animais foram anestesiados (benzocaína 3g/ 20ml álcool/ 20l de água) e animais de cada tratamento foram amostrados. Os principais dados biométricos (peso total, comprimento total e padrão) foram anotados e a coleta de sangue foi realizada através da punção  caudal, com auxílio de seringas (3ml) e agulhas (250,7mm) descartáveis, contendo EDTA 10 %. Para determinação do número total de eritrócitos (RBC 106/l3), do hematócrito (HCT %), da taxa de hemoglobina (HGB g/dl) e dos índices eritrocitários absolutos: volume corpuscular médio (VCM fl), hemoglobina corpuscular média (HCM pg) e concentração de hemoglobina corpuscular (CHCM g/dl) foi utilizado contador automatizado (Cobas micros). O delineamento experimental utilizado foi completamente casualizado, com quatro tratamentos e três repetições para cada tratamento. Os resultados obtidos foram estudados estatisticamente pela análise de variância e as médias (p 0,05) comparadas pelo teste de Tukey e a relação entre as concentrações do herbicida clomazone e os parâmetros sangüíneos foram descritos pela análise de regressão, através do programa Statistica [10].

Resultados e Discussão
Os parâmetros físicos e químicos da água monitorados durante o experimento não apresentaram diferença entre os tratamentos e mantiveram-se em padrões aceitáveis para a espécie [1 e 7].
A hemoglobina corpuscular média (HCM) apresentou incremento significativo (p0,05) de acordo com o tempo de exposição, de 0 a 53 dias, sendo que o tratamento com 10% da CL50 passou de 37,1 para 42,8pg e de 34,9 para 38,3pg para o tratamento com 1% da CL50 do clomazone. 
O volume corpuscular médio (VCM) apresentou diferença entre os tratamentos aos 53 dias de exposição, sendo que a concentração de 10% CL50 foi significativamente superior às concentrações de 0% e 0,1% da CL50 (Tabela 1 e Figura 1).

Tabela 1- Média dos parâmetros da série eritrocitária de alevinos de jundiá (Rhamdia sp.), submetidos a diferentes concentrações do herbicida clomazone, ao 53º dia de exposição

                                                                    Clomazone CL50
Parâmetro		0%			0,1%			1%			 10%

  RBC	(106/l3)	2,24			2,21		          2,18		  	1,88
  HGB	(g/dl)		8,10			7,75			8,35			8,00
  HCT	(%)		26,95			26,25			27,05			25,55
  VCM	(fl)		120,00b		119,00b		124,00ab		136,00a  
  HCM (pg)		35,95			35,05			38,3			42,85
  CHCM (g/dl)	29,95			29,55			30,85			31,55                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                           

Letras distintas na linha diferem pelo teste de Tukey (95%);
RBC- eritrócitos totais;
HGB- hemoglobina;
HCT- hematócrito;
VCM- volume corpuscular médio;
HCM- hemoglobina corpuscular média;
CHCM- concentração de hemoglobina corpuscular média.

Figura 1- Efeito das diferentes concentrações de clomazone sobre o volume corpuscular médio.
Este índice eritrocitário indica o volume médio dos eritrócitos, sendo que a concentração de 10% da CL50 provocou uma macrocitose (aumento do tamanho dos eritrócitos), que pode ser devido a lesões nos órgãos hematopoiéticos causados por alguns agentes físicos e químicos, fazendo com que eritrócitos imaturos (apresentam maior volume) sejam liberados na circulação ou causando anemia aplástica, que é a redução intensa da quantidade de tecido hematopoiético, que tem com resultado uma formação deficiente de células sangüíneas [3].

Conclusões
	O clomazone influencia os parâmetros hematológicos de alevinos de jundiá.	
A concentração de 10% da CL50 do clomazone aumenta significativamente o volume corpuscular médio (VCM) de alevinos de jundiá aos 53 dias de exposição.
	 O tempo de exposição dos alevinos de jundiá à concentração de 1 e 10% da CL50 do clomazone incrementam a hemoglobina corpuscular média (HCM).

Referências Bibliográficas
1BALDISSEROTO, B. The culture of silver catfish (Jundiá)  (Rhamdia quelen). In: World Aquaculture, 2003. Anais...Salvador, Bahia. 2003. P. 73.
2BOGÉ, G. & PÉRÈS, G. Utilisation de la mesure de l’activité de la phosphatase alcaline dans l’intestin, le foie et le plasma des poissons comme indicateur de la pollution des eaux. Rapport de Contrat du Ministère Francais de l’Environnement (Commissuion: Méthodologie en écotoxicologie des produits chimiques), n. 87, 336, 1990.
3HENRY, J. B. Doença dos Eritrócitos. In: Diagnósticos Clínicos e Conduta Terapêutica por Exames Laboratoriais. 16 ed. São Paulo: Manole LTDA, 1989. p.1070 
4KUMSCHNABEL, G. & LACKNER, R. Stress responses in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) alevins. Comp. Bionhem. Physiol., 104 A(4), 777-784, 1993.
5MAHAJAN, C. L. & DHEER, J. S. Seasonal variations in the blood constituents of na air-breathing fish, Channa punctatus. J. Fish Biol., 14(4): 413-7, 1979.
6MARTINS, J. M. & PITOMBEIRA, M. S. High leukocyte count in fishes. Rev. Bras. Pesq. Méd. Biol., 1(2):89-92, 1968.
7MELO, J. F. B.; RADUNZ NETO, J.; DA SILVA, J. H.; TROMBETTA, C. G. Desenvolvimento e composição corporal de alevinos de jundiá (Rhamdia quelen). Ciência Rural, Santa Maria, v. 32, n. 3, p.323-327, 2002.
8SIDDIQUI, A. Q. & NASEEM, S. M. The hematology of rohu, Labeo rohita, J. Fish Biol., 14(1): 67-72, 1979.
9SILVEIRA, R. & RIGORES, C. Características hematológicas normais de Orechromis aureus em cultivo. Ver. Lat. Acui, 39:54-56, 1989.	
10STATISTICA for Windows Computer program manual. StatSoft, Version 1998, e-mail: info@statsoft.com, WEB: http://www.statsoft.com. 
11VAL, A. L.; SCHWANTES, A. R.; ALMEIDA-VAL, V. M. F.; SCHWANTES, M. L. B. Hemoglobin, hematology, intraerythrocytic phosphates and whole blood effect from lotic and lentic Hypostomus regani populations (São Paulo, Brasil). Comp. Bionhem. Physiol. 80B, p. 737-741, 1985.