AVALIAÇÃO DE INSETICIDA À BASE DE Bacillus thuringiensis BERLINER NA MORTALIDADE DE Spodoptera frugiperda (J.E. SMITH, 1797)  E SUA ASSOCIAÇÃO COM INIBIDOR DA SÍNTESE DE QUITÍNA (LUFENURON).

Pinto, J.R.¹ *; Menezes, A.M.D.¹; Louzada, R.S.¹;  Zotti, M.J.¹; Gonçalves, R.S.; Loek, A.E.¹; Grützmacher, A.D.¹

¹Departamento de Fitossanidade- FAEM/UFPel
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1.	INTRODUÇÃO

A lagarta de Spodoptera frugiperda é uma das mais importantes pragas do Brasil, em decorrência da importância das culturas que ataca e da severidade dos danos produzidos. Existe uma série de inseticidas químicos recomendados para o seu controle, no entanto, esses produtos trazem uma série de inconvenientes de ordem toxicológica e ambiental. A alternativa de controle com inseticidas microbianos faz parte da recomendação, por meio de inseticidas à base da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), que possui todas as vantagens decorrentes do controle biológico. Os inseticidas inibidores da síntese de quitina também são uma alternativa apropriada, devido a sua especificidade e seletividade.
	Desta maneira, o presente trabalho objetivou analisar o potencial de uso de Bt na mortalidade de lagartas de S. frugiperda, estreme e em associação com lufenuron, visando-se proporcionar uma recomendação de uso para o controle desta praga nas culturas do arroz e milho.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

Nesse experimento utilizou-se o método de imersão de cubos de dieta em suspensão, utilizado por PINTO [3] na avaliação de formulados à base de Bt para lagartas de Anticarsia gemmatalis. Preparou-se as suspensões a partir da concentração mais alta (625 ppm), diluindo-se os inseticidas DIPEL PM (B.t. kurstaki, linhagem HD-1, 16.000 Unidades Internacionais/mg) e MATCH CE (Lufenuron) e a mistura de ambos em água destilada, e após, diluiu-se sucessivamente essas suspensões/soluções para formar os demais tratamentos (125, 25 e 5 ppm). O tratamento testemunha foi constituído somente de água destilada.  A dieta artificial [1] previamente preparada e acondicionada em caixas Gerbox, foi cortada em pequenos cubos de 1cm³. Cada cubo de dieta foi imerso na respectiva suspensão/solução, ou em água destilada no caso da testemunha e então, colocado em copos plásticos de 100 mL de capacidade com tampa. Em cada copo foi colocada uma lagarta de 3° ínstar de S. frugiperda. Cada tratamento constou de 12 copos (12 lagartas). 
O acondicionamento foi realizado em sala climatizada nas mesmas condições descritas por POLANCZYC et al. [4] e POLANCZYC et al. [5], quando realizaram bioensaios de Bt com S. frugiperda, usando-se temperatura de 25±2°C, umidade relativa de 65±5%, e fotofase de 12 horas. As avaliações foram realizadas diariamente até o 7° dia após o tratamento (DAT), anotando-se o número de lagartas mortas.
	
3. 	RESULTADOS E DISCUSSÃO

	As avaliações realizadas demonstraram não haver mortalidade no tratamento testemunha em nenhum DAT, indicando que o procedimento de instalação do experimento e sua condução foram livres de contaminantes e de interferências negativas aos tratamentos.
	O produto formulado à base de B. thuringiensis subsp. kurstaki linhagem HD-1, não mostrou patogenicidade às larvas de S. frugiperda de 3º instar, pois  nenhuma larva morreu em decorrência do tratamento, mesmo na  maior concentração até o último dia de avaliação (7º DAT). Em decorrência disto, a análise de Próbites não pode ser efetuada para o produto biológico.
Esse dado comprova o resultado de outros trabalhos, que indicam que o Bt, subsp. kurstaki, não possui eficácia no controle de S. frugiperda, o que é muito preocupante, pois o principal produto comercial atualmente disponível no Brasil  é desta subespécie. Avaliando a eficácia de diversas subespécie de Bt para S. frugiperda, em laboratório, POLANCZYC et al. [4] encontraram mortalidade satisfatória apenas para as subespécies aizawai HD68 (100%) e thuringiensis HD146 (80,4%). A subespécie mais comum nos inseticidas formulados, kurstaki, não alcançou 20% de mortalidade, sendo utilizada a kurstaki HD73. Em outro trabalho POLANCZYC et al. (2003) detectaram resultados positivos, entre as subespécies testadas, apenas para a morrisoni, que provocou 80% de mortalidade em lagartas de 2° instar de S. frugiperda, no bioensaio.
	Em bioensaios com Bt, SILVA-WERNECK et al. [6] encontraram um isolado da subsp. Kurstaki, designado S93, mais ativo contra S. frugiperda de 3º ínstar, que o DIPEL (HD-1).
	As CL50 do produto inibidor da síntese de quitina e da mistura de Bt com lufenuron encontram-se na Tabela 1. Observa-se que a concentração necessária para matar 50% das larvas aos 7 DAT é aproximadamente a metade da concentração aos 5 DAT, tanto para o lufenuron estreme, quanto em mistura com o Bt. A mistura apresentou uma CL50 aproximadamente duas vezes superior ao lufenuron estreme, aparentando ser duas vezes menos eficiente. No entanto, observando-se que a mistura foi composta com a metade da concentração dos produtos estremes, e considerando-se que o Bt não provocou nenhuma mortalidade, denota-se que o resultado refere-se somente a ação do lufenuron, que por estar duas vezes menos concentrado, apresentou a CL50  aproximadamente duas vezes superior, tanto aos 5 quanto aos 7 DAT. 

Tabela 1. Concentração Letal Mediana obtida através do método de imersão 		      de cubos de dieta em suspensão/solução para larvas de S. 			      frugiperda (3º instar).

Produto	5 DAT¹	7 DAT	
DIPEL PM	____²	____	
MATCH CE	 26,34³
(2,08-333,35)4	11,86
(0,69-208,63)	
MISTURA 
(DIPEL + MATCH) 	47,32
(2,59-863,24)	23,91
(9,62-59,37)	
¹Dias após o tratamento.
²Sem determinação, pela mortalidade ser zero.
³Concentração Letal Mediana (CL50).
4Intervalo de confiança (95%).
	Na Tabela 2, apresenta-se o TL50 do lufenuron estreme e em mistura com o Bt nas concentrações de 125 e 625 ppm. Observa-se que o produto comercial de lufenuron na concentração de 125 ppm leva praticamente um dia a mais para matar 50% das larvas, em relação à concentração de 625 ppm. A mistura apresentou aproximadamente o mesmo TL50 nas duas concentrações, e teve valores superiores ao lufenuron estreme, indicando que a mistura demora mais para provocar a mortalidade de metade da população testada.

Tabela 2. Tempo Letal Mediano obtido através do método de imersão de cubos 	       de dieta em suspensão/solução para larvas de S. frugiperda 
	      (3º instar).

Produto	125 ppm¹	625 ppm	
DIPEL PM	____²	____	
MATCH CE	 3,29³
(2,90-3,73)4	2,49
(2,21-2,79)	
MISTURA 
(DIPEL + MATCH) 	3,79 
(3,12-4,59)	3,86
(3,10-4,79)	
¹Concentração da suspensão/solução.
²Sem determinação, pela mortalidade ser zero.
³Tempo Letal Mediano (TL50) em dias.
4Intervalo de confiança (95%).

	A análise do Índice de toxicidade (Tabela 3) resultou nos valores de 55,7 aos 5 DAT e de 49,6 aos 7 DAT. Esses valores, segundo o exposto por HAMILTON & ATTIA [2], indicam num primeiro momento antagonismo, por apresentarem valores inferiores a 100. No entanto, como a mistura foi composta com a metade da concentração dos produtos estremes, e considerando-se que o Bt não provocou nenhuma mortalidade, estes valores indicam apenas, numa análise mais apurada, que novamente o Bt mesmo em mistura com o lufenuron, não teve qualquer efeito sobre larvas de S. frugiperda.

Tabela 3. Índice de toxicidade da mistura de DIPEL PM (B.t. kurstaki, 	  	        	      linhagem HD-1) e MATCH CE (Lufenuron), obtido através do 	    	 	      método de imersão de cubos de dieta em suspensão/solução para 	   	      larvas de S. frugiperda (3º instar).

Índice de toxicidade¹	
5 DAT²	7 DAT	
55,7	49,6	
¹ Pela fórmula de HAMILTON & ATTIA (1977).
² Dias após o tratamento.

4. CONCLUSÕES

	Nas condições em que o trabalho foi realizado, pode-se concluir que o B. thuringiensis subsp. Kurstaki HD-1 não é efetivo na mortalidade de lagartas de 3º instar de S. frugiperda. O inseticida inibidor da síntese de quitina, ao contrário, produz elevada mortalidade nessas lagartas. A mistura de Bt (kurstaki, HD-1) e lufenuron não produz resultados diferentes do lufenuron estreme.
	Deste modo, para se ter um controle alternativo eficiente de lagartas de S. frugiperda, dentro da perspectiva proposta, deve-se estudar outros isolados de Bt e sua mistura com lufenurom.

5.	RERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] GREENE, G.L.; LEPPLA, N.C.; DICKERSON, W.A. Velvetbean caterpillar: a rearing procedure and artificial medium. Journal of Economic Entomology, v.69, n.4, p.487-488, 1976.
[2] HAMILTON, J.T., ATTIA, F.I. Effects of mixtures of Bacillus thuringiensis and pesticides on Plutella xylostella and the parasite Thyraeella collaris. Journal of Economic Entomology, v.70, n.1, p.146-148, 1977.
[3] PINTO, J.R. Avaliação de inseticidas à base de Bacillus thuringiensis Berliner estremes e associados com piretróides para o controle de Anticarsia gemmatalis Hübner, 1818 (Lepidoptera, Noctuidae). Pelotas: UFPel, 1995. 70p. Dissertação (Mestrado) – Agronomia, Fitossanidade. UFPel/FAEM, 1995.
[4] POLANCZYK, R.A.; SILVA, R.F.P. da; FIUZA, L.M. Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae).  Brazilian Journal of Microbiology, n.31, p.165-167, 2000.
[5] POLANCZYK, R.A.; SILVA, R.F.P. da; FIUZA, L.M. Screening of Bacillus thuringiensis isolates pathogenic to Spodoptera frugiperda (J.E. SMITH) (Lepidoptera: Noctuidae).  Arq. Inst. Biol., v.70, n.1, p.69-72, 2003.
[6] SILVA-WERNECK, J.O.; ABREU-NETO JR, M.V.; TOSTES, A.N.; FARIA, L.O.; SOUZA-DIAS, J.M.C. Novo isolado de Bacillus thuringiensis efetivo contra a lagarta-do-cartucho. Pesquisa Agropecuária Brasileira, 35: 1, p.221-227, 2000.