EFEITO DE PROBIÓTICOS NA EFICIÊNCIA ALIMENTAR EM FRANGOS DE CORTE AGREDIDOS COM Salmonella enteritidis

Gil de los Santos, JR*1; Storch, OB2; Gil-Turnes, C3

Resumo
Foi testado o efeito de dois probióticos, um preparado com Saccharomyces boulardii e outro com Bacillus cereus var. toyoii, na eficiência alimentar em frangos de corte agredidos com Salmonella enteritidis. Frangas de um dia de idade foram divididas aleatoriamente em três grupos e alimentadas com ração comercial livre de antibióticos: grupo um foi alimentado com ração comercial, grupo dois recebeu a mesma ração suplementada com S. boulardii, e o grupo três foi suplementado com B. cereus. Aos 14 dias de idade os animais foram desafiados com 1x107 células viáveis de S. enteritidis. No dia 47 os pesos vivos médios eram: grupo um, 1,767 kg, grupo dois, 1,892 kg, e grupo três, 2,057 kg, significativamente diferentes (P<0,05). A conversão alimentar média foi 2,61 para o grupo um, 2,35 para o grupo dois e 2,3 para o grupo três. Concluímos que ambos probióticos aumentaram a eficiência alimentar nos frangos de corte.

Palavras chave: eficiência alimentar, probióticos, frangos de corte, Bacillus cereus, Saccharomyces boulardii.

Introdução
Nos últimos anos o interesse pela pesquisa de probióticos como suplementos alimentares aumentou devido à necessidade de eliminar os antibióticos da ração animal em resposta a demanda do mercado mundial e a exclusão do uso de antibióticos como promotores de crescimento na União Européia a partir de 2006 (Council of the European Union, 2003).
	Probióticos são produtos que contém microrganismos conhecidos e viáveis, capazes de modificar a microbiota autóctone e de produzir respostas benéficas no hospedeiro (Schrezenmeir & de Vrese, 2001). Eles melhoram a eficiência alimentar e o controle de doenças infecciosas (Zani et al., 1998), aumentam as respostas imunes do hospedeiro (Conceição et al., 2002) e inibem o crescimento tumoral em modelos animais (Perdigón & Alvarez, 1992), além de outros benefícios. Bacillus cereus var. toyoii e Saccharomyces boulardii são duas espécies de probióticos particularmente interessantes para o uso em animais, pois eles retêm suas propriedades benéficas mesmo durante longos períodos em condições de granja.
	O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito, na eficiência alimentar de frangos de corte, de dois probióticos preparados no Centro de Biotecnologia da Universidade Federal de Pelotas, Brasil, com B. cereus var. toyoii e S. boulardii.

Materiais e métodos
	Frangas de um dia de idade da linhagem Ross® 308, vacinadas com uma vacina viva contra a Doença de Marek, foram distribuídas aleatoriamente em três grupos de dez animais cada, e alimentadas com ração comercial. O grupo 1 (Controle) recebeu ração não suplementada, o grupo 2 (S. boulardii) recebeu a mesma ração suplementada com 1x107 células viáveis de S. boulardii gr-1 e o grupo 3 (B. cereus) suplementada com 1x106 gr-1 esporos viáveis de B. cereus var. toyoii (Gil Turnes et al., 1999b). Ração e água foram oferecidos ad libitum. Cada grupo foi alojado em isoladores semiflexíveis de pressão negativa (Alesco, Campinas, SP, Brasil), sob condições idênticas durante todo o experimento.
	Os animais foram desafiados aos 14 dias de idade por via oral com 1x107 células viáveis de Salmonella enteritidis. Amostras de sangue foram coletadas aos 1, 14 e 33 dias pós-infecção (dpi). A resposta sorológica ao patógeno foi monitorada pelo teste de soroaglutinação rápida em placa utilizando um antígeno de S. gallinarum e por ELISA. Os títulos de anticorpos contra S. enteritidis foram determinados por ELISA utilizando a suspensão de S. enteritidis usada no desafio dos animais como antígeno. Imunoglobulinas de cabra antigalinha conjugadas com peroxidase (03328-656EY) e Tetra Metil Benzidina (07217-0313YA) foram obtidos do Idexx Laboratories (Idexx Laboratories, Inc, Westbrook, MN, USA). Os resultados da ELISA foram expressos como soroconversões, dividindo as absorbâncias aos 14 e 33 dpi pelas obtidas ao 1 dpi nos animais do mesmo grupo (Gil-Turnes et al., 1999a).
	Os animais foram pesados nos dias 1, 14 e 47 de idade, e o ganho de peso diário e conversão alimentar foram estimados.
	A analise estatística dos resultados foi realizada por análise de variância e teste de Tukey no programa Statistix versão 8 (Analytical Software, Tallahassee, Fl, USA). Os valores reportados são as médias de três repetições.

Resultados e discussão
	Um probiótico produzido no Centro de Biotecnologia da Universidade Federal de Pelotas com B. cereus var. toyoii, e que foi testado durante a última década (Zani et al., 1998; Gil Turnes et al., 1999), apresentou resultados encorajadores em suínos (Zani et al., 1998) e camundongos (Bugallo, 2002; Conceição et al., 2002; Coppola et al., 2004). Neste trabalho reportamos os resultados de testes realizados em frangos de corte com nosso probiótico de B. cereus e um novo probiótico desenvolvido utilizando Saccharomyces boulardii.
	Existe vasta informação a respeito da utilização de diferentes probióticos em várias espécies animais. Os resultados reportados são extremamente contraditórios, provavelmente devido a que os experimentos foram desenvolvidos em diferentes condições. Abdollahi et al. (2003) comunicaram que um probiótico contendo duas espécies de Bacillus induziu ganho de peso em frangos de corte durante a fase inicial, mas não durante o período de crescimento, não encontrando diferenças significativas entre os pesos totais aos 42 dias de idade. Contrariamente, em nosso trabalho ambos probióticos mostraram efeitos benéficos significativos nos índices de eficiência alimentar no final do experimento, mas não durante as duas primeiras semanas de vida (Tabela 1). Os pesos médios não foram diferentes nos dias 1 e 14, mas no dia 47 eles foram 1,767 kg no grupo 1, 1,892 kg no grupo 2 e 2,057 kg no grupo 3, significativamente diferentes (P< 0,05) (Tabela 2). A conversão alimentar foi 2,61 para o grupo 1, 2,35 para o grupo 2 e 2,3 para o grupo 3 (Tabela 1).

TABELA 1: Índices de eficiência alimentar aos 14 e 47 dias de idade. 
Índices 

                Dia	Grupos	
	Controle
14/47	S. boulardii
14/47	B. cereus
14/47	
Ganho de peso (kg)	0,25a/1,720c	0,24a/1,850b	0,24a/2,020d	
Ganho diário de peso (kg)	0,018a/0,037c	0,017a/0,039b	0,017a/0,043d	
Conversão alimentar	1,72/2,61	2,06/2,35	2,11/2,30	
Letras iguais na mesma linha não são diferentes estatisticamente (α=0,5)
TABELA 2: Pesos aos 1, 14 e 47 dias de idade. 
Grupo	Dias de idade	Peso médio (kg)	Homogeneidade	
B. cereus	47	2,057	       A 	
S. boulardii	47	1,892	          B	
Controle	47	1,767	            C	
Controle	14	0,295	              D	
S. boulardii	14	0,280	              D	
B. cereus	14	0,277	              D	
Controle	1	0,045	                 E	
S. boulardii	1	0,042	                 E	
B. cereus	1	0,040	                 E	
Grupos com a mesma letra não significativamente diferentes um do outro com α= 0.05 (teste de Tukey)

Em um experimento prévio com suínos, o probiótico de B. cereus também produziu um aumento significativo na eficiência alimentar durante a fase de creche, o que não ocorreu na fase de maternidade (Zani et al., 1998). Em ambos os casos os animais foram desafiados com agentes infecciosos, Salmonella enteritidis, neste experimento, no qual todos os animais demonstraram soroconversão, e Escherichia coli enterotoxigenica, no experimento anterior. Esses resultados reforçam o conceito de que probióticos mostram seus efeitos benéficos em condições inadequadas de criação. A conversão alimentar não foi diferente entre os grupos suplementados com probióticos, mesmo quando outros parâmetros tais como ganho diário de peso e ganho de peso foram significativamente maiores nos animais suplementados com B. cereus. 
	Nossos resultados mostraram que os probióticos testados podem ter um efeito benéfico na criação industrial de frangos de corte. Os valores de conversão alimentar estimados em nosso experimento indicam que os animais suplementados com S. boulardii consumiram 10 % e os suplementados com B. cereus 12 % a menos por kg de peso vivo que o grupo controle, valores similares aos obtidos em suínos com o probiótico de B. cereus (Zani et al., 1998). Jin et al. (1998) relataram que frangos de corte suplementados com Lactobacillus acidophilus, um probiótico extensamente utilizado, ou uma mistura de lactobacilos, apresentaram eficiência alimentar 4,5 % e 7 % maiores, respectivamente, do que os controles não suplementados. Outro beneficio para a industria de criação de frangos de corte registrado em nosso experimento foi que o peso final foi significativamente maior nos frangos alimentados com probióticos. Os animais suplementados com B. cereus chegaram ao fim do experimento com um peso médio vivo 8 % e 14 % maior do que os alimentados com S. boulardii e os controles, respectivamente, enquanto que os que receberam S. boulardii foram 8 % mais pesados do que os controles. Ainda que a análise econômica estava fora do interesse deste trabalho, é evidente que os pesos finais maiores associados com uma melhor eficiência alimentar tendem a otimizar investimentos em instalações e custos de pessoal.
	Nossos resultados reforçam o conceito de que probióticos podem ser substitutos apropriados para os antibióticos na alimentação animal.

Referências Bibliográficas

ABDOLLAHI, M.R., KAMYAB, A., BAZZAZZADEKAN, A., NIK-KHAH, A.; SHAHNEH, A.Z. Effect of different levels of bacterial probiotic on broiler's performance. Proc. British Society of Animal Science, 2003. Disponível em: <http://www.bsas.org.uk/meetings/annlproc/Pdf2003/185.pdf> Acesso em: 31 out. 2003.

BUGALLO, M.Q. Efeito dos probióticos Bacillus cereus var toyoii e Sacharomyces boulardii nos níveis de colesterol em camundongos BALB-C. 2002. 68 f. Tese (Mestrado em Veterinária) - Programa de Pós Graduação em Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Brasil. 

CONCEIÇÃO, F.R.; ZANI, J.L.; GIL-TURNES, C. Effect of the probiotic CenBiot on the humoral response to an Escherichia coli bacterin. Food and Agriculture Immunology, v.14, p.135-140, 2000.

COUNCIL OF THE EUROPEAN UNION. Council Of The European Union, 2003 Brussels, 13 February 2003 (OR. en); 6120/03; AGRILEG 30 OC 35; Council Regulation on the authorisation of the additive avilamycin in feeding stuffs COMMON GUIDELINES. Disponível em: <http://register.consilium.eu.int/pdf/en/03/st06/st06120en03.pdf>. Acesso em: 15 out. 2003. 

COPPOLA, M.M., CONCEIÇÃO, F.R.; GIL-TURNES, C. Effect of Saccharomyces boulardii and Bacillus cereus var. toyoii on the humoral and cellular response of mice to vaccines. Food & Agricultural Immunology, in press, 2004.
GIL-TURNES, C., ALEIXO, J.A.G., MONTEIRO, A.V.; DELLAGOSTIN, A.O. DNA inoculation with a plasmid vector carrying the faeG adhesin gene of Escherichia coli K88ab induced immune responses in mice and pigs. Vaccine, v.17, p.2089-2095, 1999a.

GIL TURNES, C., DOS SANTOS, A.F., DA CRUZ, F.W.; MONTEIRO, A.V. Properties of the Bacillus cereus strain used in Probiotic CenBiot. Brazilian Journal of Microbiology, v.30, p.11-14, 1999b.

JIN, L.Z., ABDULLAH, N., ALI, M.A.; JALULADIN, S. Effect of adherent Lactobacillus cultures on growth, weight of organs and intestinal microflora and volatile fatty acids in broilers. Animal Feed Science Technology, v.70, p.197-209, 1998. 

PERDIGÓN, G.; ALVAREZ, S. Probiotics and the immune state. In: FULLER, R. Probiotics: the scientific basis. London: Chapman e Hall, p.145-180, 1992.  

SCHREZENMEIR, J.; DE VRESE, M. Probiotics, prebiotics and symbiotics-approaching a definition. American Journal of Clinical Nutrition, v.73, p.361S-364 S, 2001.

ZANI, J.L., CRUZ, F.W., SANTOS, A.F.; GIL-TURNES, C. Effect of probiotic CenBiot on the control of diarrhoea and feed efficiency in pigs. Journal of Applied Microbiology, v.84, p.68-71, 1998.