a GERMINAÇÃO E A ATIVIDADE TOTAL DA ALFA AMILASE EM SEMENTES DE TRIGO afetadas pelo ácido acético
Neves, L. A.1*;  Moraes, D. M.2
1Prof. do Departamento de Biologia – CCNE/UFSM
Doutorando em Produção Vegetal – FAEM/UFPEL
E-mail – augusto@smail.ufsm.br

2Prof. Dr. Departamento de Botânica – IB/UFPEL
Campus Universitário  – Caixa Postal 354 – CEP 96010-900  
E-mail – moraesdm@ufpel.tche.br

1.	INTRODUÇÃO

O ácido acético, assim como os demais ácidos alifáticos de cadeia curta, têm sido objeto de estudo, pois são derivados da decomposição anaeróbica da matéria orgânica no solo (3;7). Estudado inicialmente  na cultura do arroz irrigado verificou-se que em culturas de sequeiro como a do trigo também esse ácido afeta o desenvolvimento inicial das plântulas de trigo (8).
Os ácidos orgânicos têm seus máximos de produção na fase inicial do plantio de forma que, em arroz irrigado, foi constatado diminuição do número de perfilhos, altura de plântulas e das plantas, redução do rendimento de grãos e de palhada no final do cultivo e que esses efeitos estariam intimamente relacionados com os estágios iniciais do processo de germinação. Além dessa cultura foi constatado a redução de 77% da germinação em cevada devido ao ácido acético e, no trigo, redução de 22%, enquanto que nada germinou quando o autores utilizaram os ácidos butírico e propiônico (4;9)
Durante o processo de germinação das sementes, após embebição, reservas endospermáticas são mobilizadas para desenvolver o eixo embrionário. Essas reservas são  metabolizadas enzimaticamente para fornecimento de energia através de enzimas como a alfa-amilase que hidroliza as ligações alfa-1,4 da molécula de amido, produzindo vários oligossacarídeos (1;5;6).
Como os ácidos orgânicos têm sido mais estudados mais intensamente no desenvolvimento das plântulas, esse trabalho objetiva analisar a influência do ácido acético sobre a germinação e sobre a atividade total da  -amilase em sementes de trigo.

2.	MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi conduzido no Laboratório de Fisiologia Vegetal, do Departamento de Botânica, da UFPEL. Sementes de trigo da cultivar EMBRAPA 16, da safra 2003 cedidas pelo Engenho de David, do município de Santa Maria (RS), foram tratadas com soluções de ácido acético nas doses zero; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 e 16,0 ml l-1. Foram realizados o teste padrão de germinação – amos de 200 sementes divididas em sub-amostras de 50 sementes, por tratamento, foram colocadas em papel do tipo germitest previamente umedecido; enroladas e colocadas em saco plástico escuro, vedado e postas em câmara na temperatura de180 C. A primeira contagem da germinação foi realizada aos 4 dias e a contagem final aos 8 dias. Os dados expressos em porcentagem foram transformados pela fórmula arc sem (x/100)1/2 para análise estatística;  atividade total da -amilase – avaliou-se amostras aos zero dia (semente), aos 4 dias e aos 8 dias (plântulas). Os dados de leitura do espectrômetro a 620 nm foram transformados conforme fórmula: A. T. = [(substrato a 620 nm – leitura a 620 nm)/5’x].(20/alíquota.0,5g), onde x = 1g de amido. Os dados foram expressos em  g de amido hidrolizado. nm-1.g semente-1. O delineamento estatístico utilizado foi o totalmente casualizado com as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%.

3.	RESULTADOS E DISCUSSÃO

A tabela 1 mostra os resultados da primeira contagem da germinação, a germinação e a atividade da -amilase aos zero, 4 e 8 dias em sementes de trigo. Verifica-se que na primeira contagem da germinação e na germinação as doses zero e 1,0 ml l-1 não diferem entre si; a dose de 2,0 ml l-1 difere das demais; as doses 4,0 e 8,0 ml l-1 não diferem entre si e a dose de 16,0 ml l-1 difere de todas as demais. Observa-se que houve redução em ambos parâmetros com o aumento da dose do ácido acético, com exceção da dose de 1,0 ml l-1 que na primeira contagem da germinação apresentou um leve aumento em relação à dose zero. Resultados semelhantes foram obtidos quando sementes de soja foram tratadas com ácido jasmônico (2;5)
A atividade da -amilase no período zero mostrou diferença significativa apenas na dose de 8,0 ml l-1 que apresentou baixa atividade enzimática culminando com o decréscimo na primeira contagem da germinação e na germinação. Em  Amaranthus caudatus houve inibição da germinação e redução da atividade da -amilase quando suas sementes foram tratadas com ácido metil-jasmonato (2). A dose de 1 ml l-1 foi menor que a dose zero, fato esse que pode ser explicado pela infuência do ácido acético na solubilização do amido nessa mesma dose. Aos 4 dias tem-se maior significância para a dose de 16 ml l-1 evidenciando atraso no desenvolvimento das plântulas, o mesmo acontecendo com o período de 8 dias.
Com relação às médias percebe-se que no primeiro período a atividade é baixa, aumenta aos 4 dias e torna a decrescer aos 8 dias. Esses resultados evidenciam que a disponibilidade de amido, como fonte de carbohidrato, aumenta com o tempo de germinação até aos 4 dias quando alcança o máximo para, a partir daí voltar a decrescer(1;6;7).

Tabela 1 – Efeitos das doses do ácido acético sobre a primeira contagem da germinação (PCG), germinação (G) e na atividade total da -amilase em três períodos, de sementes de trigo cv EMBRAPA 16.

Dose
(ml l-1)	
PCG
(%)	
G
(%)	Atividade total da -amilase (g g-1)
 (dias)	
			Zero	4	8	
0,0	93,9 a	96,5 a	24.808,68 a	29.745,56 a	24.473,37 a	
1,0	94,6 a	96,4 a 	22.510,85 a	33.011,83 ab	23.806,71 ab	
2,0	58,1  b	68,1  b	26.037,48 a	31.386,59 ab	23.970,41 ab	
4,0	31,7   c	43,8   c	26.218,93 a	28.913,21   bc	23.378,70   b	
8,0	23,2   c	34,0   c	25.041,42 a	27.607,50 abc	22.836,29    c	
16,0	3,83    d	8,75    d	17.595,66  b	25.130,18 ab d	20.913,21     d	
Média	50,8	57,9	23.702,17	29.299,15	23.229,78	
C. V. (%)	7,77	7,17	2,69	4,49	2,71	
F	250,3	223,87	314,87	53,61	48,45	

4.	CONCLUSÕES

O ácido acético nas concentrações estudadas no cultivar de trigo EMBRAPA 16 afetou  a primeira contagem da germinação, a germinação, diminuindo-as com o aumento da dose. Com referência a atividade da -amilase concluiu-se que o ácido acético afetou mais intensamente os períodos de 4 e 8 dias após a germinação, sendo que o período inicial da germinação as doses não diferiram significativamente, com exceção da dose de 16,0 ml l-1 que demonstrou redução da atividade dessa hidrolase em todos os períodos analisados..

5.	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] BEWLEY, J. D. e BLACK, M. Seeds, physiology of development and germination. New York: Plenum Press. 1994. 445p.
[2] BIALECKA, B. e KEPCZYNSKI, J. Regulation of α-amylase activity in Amaranthus caudatus seeds by metal-jasmonate, gibberelin A3, benzyladenina and ethylene. Plant Growth Regulation.Netherlands, 39:51-56, 2003.
[3] CAMARGO, F. A. O. Caracterização da ação fitotóxica de ácidos orgânicos sobre a cultura do arroz. Itaguaí-RS: Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro. 1992. 196p.
[4] CAMARGO, F. A. O.;  ZONTA, E.;  SANTOS, G. A. e ROSSIELLO, R. O. P.  Aspectos fisiológicos e caracterização da toxidez de ácidos orgânicos voláteis em plantas.  Ciência Rural. Santa Maria, 31(3): 523-529,  2001.
[5] MAIA, F. C.; MORAES, D. M. e MORAES, R. C. P. Atividade total da fosfatase ácida e da alfa amilase por ácido jasmônico em sementes de soja. Revista Brasileira de Sementes. Londrina, 22(1): 259-264, 2000.
[6] MAYER, A. M. e POLJAKOFF-MAYBER, A. The germination of seeds. Oxford: Pergamon Press. 2.ed. 1975. 192p.
[7] POPINIGIS, F.  Fisiologia de sementes. Brasília:AGRIPLAN. 1985. 212p.
[8] SOUSA, R. O. e BORTOLON, L. Crescimento radicular e da parte aérea do arroz (Oryza sativa L.) e absorção de nutrientes em solução nutritiva com diferente concentrações do ácido acético. Revista Brasileira de Agrociências. Pelotas, 8(3): 231-235, 2002
[9] WALLACE, J. M. e ELLIOT, L. F. Phytotoxins from anaerobically decomposing wheat straw. Soil Biology and Biochemistry. Oxford, 11(4):325-330, 1979.